解肌退热颗粒质量标准研究

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(长春中医药大学附属医院，吉林 长春 130021)

解肌退热颗粒由柴胡、葛根、枳壳、甘草等14味中药组成，具有发表解肌，解毒退热的功效。本文旨在建立解肌退热颗粒的质量标准。实验表明该方法操作简单、稳定、专属性和重现性强，可作为该制剂的质量控制方法。

1 仪器与试药

仪器：Agilent 1100高效液相色谱仪，岛津2550UV紫外分光光度计。试药：柴胡对照药材、柚皮苷对照品购于中国药品生物制品检定所(批号为120992-201007、0722-201007)；解肌退热颗粒由本院制剂室制备(批号为20110101、20110102、20110103)；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 薄层鉴别 取本品20 g，研细，置锥形瓶中，加甲醇70 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用乙醚提取2次，每次20 mL，弃去乙醚液，再用乙酸乙酯提取3次，每次20 mL，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010版一部附录ⅥB)[1]试验，吸取供试品溶液2 μL、对照品溶液4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3%三氯化铝乙醇溶液[1]，在105 ℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2.2 含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱：Shim-pack(岛津)C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)；乙腈-2.5%醋酸水(32∶68)为流动相；检测波长为254 nm。流速：1 mL/min；柱温：25 ℃；理论板数按甘草酸峰计算不低于3 000。

2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取甘草酸单铵盐对照品适量，加70 %乙醇制成每1 mL含0.0625 mg的溶液(每1 mL相当于甘草酸0.06119 mg)。

2.2.3 供试品溶液的制备 取本品，研细，取1.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70 %乙醇50 mL，称定重量，超声提取30 min(功率250 W，频率20 KHZ)，放冷，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。

2.2.4 阴性样品溶液的制备 按供试品溶液制备时的取样量，折算成除甘草外，处方中其余药材的取样量，按制备工艺制成阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制成阴性样品溶液，即得。

2.2.5 线性关系的考察 分别吸取对照品溶液4、8、12、16、20 μL,按上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，甘草酸单铵盐含量为横坐标绘制标准曲线，回归方程为Y=655 953.41X-139.71,r=0.999 99,表明在0.244 76～1.223 8 μg范围内线性关系良好。

2.2.6 精密度试验 精密吸取对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，连续6次，依法测定，计算其相对标准偏差，RSD=1.12%(n=6),表明方法精密度良好。

2.2.7 稳定性试验 取供试品溶液，室温放置，在0、2、4、6、10 h分别进样10 μL，于0、2、4、6、10 h连续测定5次，计算其相对标准差，RSD=0.82%(n=5)，表明在10 h内供试品稳定性良好。

2.2.8 回收率试验 精密称取已知甘草酸含量的样品6 WV，分别精密加入甘草酸浓度为0.800 4 mg/mL的对照品溶液2 mL，按供试品溶液的制备方法制备所需溶液，测定，外标法计算，测得平均回收率为98.72%，RSD=0.94 %(n=6)。

3 结论

本文建立的薄层色谱法能够有效检出样品中的枳壳、柴胡，可以作为该药品的专属性试验；建立的高效液相色谱法准确、合理，可靠，可用于解肌退热颗粒中甘草酸的含量测定。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京:化学工业出版社,2010:230.