黄药子凝胶的制备与质量控制研究

钟锐生，陈桂红，李玉兰（深圳市宝安区西乡人民医院，广东深圳 518000）

尖锐湿疣为妇科临床常见的性传播疾病，目前国内、外尚缺乏安全有效的治疗方法，临床上观察黄药子水煎外用治疗阴道尖锐湿疣效果显著[1]。现代药理研究[2]表明，黄药子块茎含有多种甾体皂苷，水解后生成薯蓣皂苷元，具有抗炎、抗病毒和抗真菌的作用。凝胶具有较好的生物相容性，并有利于药效释放，可克服口服、注射等给药途径的不足，且携带方便。因此，笔者尝试将黄药子提取物制成凝胶，由此可克服其他剂型给药所带来的味苦等缺点，并建立了该制剂的质量标准。结果表明，该制剂制备工艺简单，含量测定方法简单、准确、可靠。

1 仪器与试药

515高效液相色谱（HPLC）仪，包括2478紫外检测器、717自动进样器和色谱数据处理机（美国Waters公司）。

薯蓣皂苷元标准品（中国食品药品检定研究院，批号:20100879，纯度:采用HPLC面积归一化法测定纯度达到99.9%以上）；黄药子提取物（陕西瑞康生物有限公司，批号:070161，活性物质为薯蓣皂苷元，含量:1.050 mg·g－1（生药），70%乙醇提取）；黄药子凝胶（自制，规格:10 g∶1 000 g）；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 处方及制备

2.1 处方

黄药子提取物10 g，卡波姆（型号:940）10 g，丙二醇100 g，三乙醇胺18 g，70%乙醇240 g，蒸馏水适量。

2.2 制备

取卡波姆10 g加入1 000 g蒸馏水中，使之溶解完全，然后加入三乙醇胺搅拌，溶解至均匀，即得卡波姆凝胶基质。然后将黄药子提取物溶于丙二醇和乙醇混合液中，加入至卡波姆基质中搅拌，并加入三乙醇胺调至pH6.5左右，并加入适量促透剂，加水至足量，搅匀得透明凝胶，分装即得。

3 质量控制

3.1 一般检查

本凝胶系棕色半透明凝胶体，质地均匀、细腻，容易涂展，黏稠度适宜。加蒸馏水纯化搅拌溶解后pH值为6.0～7.0。微生物限度检查符合凝胶剂项下的规定（《中国药典》2010年版一部附录ⅠQ）[3]。

3.2 薯蓣皂苷元的含量测定

3.2.1 色谱条件。色谱柱为Alltech C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-水＝75∶25（体积比），流速为1 mL·min－1；柱温为30℃；检测波长为303 nm；灵敏度为0.04 AUFS；进样量为10µL。

3.2.2 标准品溶液的制备。精密称取薯蓣皂苷元标准品20.0 mg，置于25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制备成每mL含0.8 mg的溶液作为标准品溶液。

3.2.3 供试品溶液的制备。取本品1 g，精密称定，置于100 mL锥形瓶中，用50 mL甲醇超声提取30 min，过滤，蒸干；残渣加20 mL盐酸溶液（2 mol·L－1）置于沸水浴中水解2 h，冷却后用石油醚（60～90℃）萃取3次，每次20 mL，合并萃取液，水洗至中性，回收石油醚，蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至10 mL，作为供试品溶液。

3.2.4 阴性样品溶液的制备。按黄药子凝胶的制备工艺制备缺黄药子提取物的阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备成阴性样品溶液。

3.2.5 系统适用性试验。分别取标准品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液，按“3.2.1”项色谱条件分别进样10µL，记录色谱图，见图1。

图1 高效液相色谱图Fig 1 HPLC chromatograms

在图1中，供试品溶液与标准品溶液色谱中在相应位置处均出现主峰，阴性样品对主峰未见干扰；而且，薯蓣皂苷元峰与其他组分色谱峰可以达基线分离，分离度大于1.5，以薯蓣皂苷元计理论板数不低于3 500。

3.2.6 标准曲线的制备。精密量取标准品溶液不同量，置于10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.08、0.24、0.4、0.56、0.8 mg·mL－1的溶液，精密量取10 µL注入色谱仪，以峰面积（Y）对浓度（X）作图，得回归方程:Y＝1.321X+13.456（r＝0.999 6），得薯蓣皂苷元的检测浓度线性范围为0.08～0.8 mg·mL－1。

3.2.7 精密度试验。将上述标准品溶液连续进样5次，每次10µL，结果峰面积RSD＝0.75%（n＝5），表明精密度良好。

3.2.8 稳定性试验。取同一批标准品溶液，分别在制备后2、4、6、8、12、16、18、24 h（室温20～30 ℃下放置）测定薯蓣皂苷元的峰面积，计算得RSD＝0.54%（n＝8），表明溶液放置24 h内稳定性较好。

3.2.9 重复性试验。取同一批样品5份，制备成供试品溶液，测定其中薯蓣皂苷元的含量，结果含量的RSD＝0.83%（n＝5），表明本方法重复性较好。

3.2.10 加样回收率试验。取黄药子凝胶适量，共5份，精密加入标准品溶液适量，按供试品溶液制备方法制备溶液，测定，计算平均回收率。结果，平均加样回收率为98.79%，RSD＝0.88%（n＝5），详见表1。

3.2.11 样品含量测定。取不同批次的5批样品，制备成供试品溶液后，测定其中薯蓣皂苷元含量，结果平均百分含量分别为100.29%、100.00%、100.57%、99.90%、100.09%，平均值为100.17%（RSD＝0.23%）。

4 讨论

目前临床治疗阴道尖锐湿疣的方法主要有:（1）物理疗法:包括激光、电灼、手术切除等。（2）局部外用药物治疗。经临床观察发现物理疗法创伤性大，创面易形成疤痕或并发细菌感染，影响局部皮肤愈合，且复发率高，尤其在黏膜部位更难以清除[4，5]。局部外用药大多采用腐蚀性的药物，此类药物对阴道黏膜部位易引起创面周围皮肤破溃疼痛，患者难以接受。笔者根据阴道尖锐湿疣多为触染淫邪、湿毒下注所至的病因病机，结合文献[6，7]，筛选清热解毒、祛湿散结、杀虫蚀赘类中药，发现中药黄药子在治疗阴道尖锐湿疣方面疗效显著。黄药子为薯蓣科植物黄独的干燥块茎，味苦、性平，有凉血解毒、消瘿散结功效[7]。《滇南本草》记载本品:“味苦涩，性寒，攻诸疮毒，止咽喉痛，利小便，走经络，治筋骨痛、痰火、手足麻木、五淋浊白、妇人赤白带下效。”现由于黄药子块茎含的甾体皂苷水解后生成薯蓣皂苷元，故本文选择薯蓣皂苷元作为活性成分检测。

表1 加样回收率试验结果（n＝5）Tab 1 Results of recovery test（n＝5）

在建立含量测定方法时，笔者发现，在紫外-可见分光光度计上250～400 nm的波长范围内对薯蓣皂苷元标准品溶液进行扫描，发现其在303 nm波长处有最大吸收，故选择303 nm为检测波长；在流动相的选择方面，笔者考察了文献[8]并进行了预试验，结果表明用乙腈-水＝75∶25作为流动相分析薯蓣皂苷元较为适宜，出峰时间短，且其他成分对主峰干扰较小。

综上所述，本文建立的质控方法简单、准确、重复性较好、灵敏度较高，可用于黄药子凝胶的质量控制。

[1]磨良群.尖锐湿疣的研究进展[J].数理医药学杂志，2005，18（3）:268.

[2]王建云.尖锐湿疣的诊断与研究进展[J].中国医刊，2003，38（2）:17.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].2010年版.北京:中国医药科技出版社，2010:附录ⅠQ.

[4]陈 勇.电灼合并干扰素局部封闭治疗湿疣的疗效观察[J].华夏医学，2000，3（6）:13.

[5]赵 建.临床皮肤性病学[M].第3版.南京:江苏科学技术出版社，2001:266-269.

[6]王淑燕.中药治疗女性阴道尖锐湿疣8例的疗效观察[J].黑龙江中医药，1994，7（1）:16.

[7]陶 治，张明华.中药治疗尖锐湿疣60例[J].皮肤病与性病杂志，1995，17（4）:49.

[8]史艳霞，周日宝，童巧珍，等.HPLC法测定药用百合中薯蓣皂苷元的含量[J].湖南中医药大学学报，2009，29（2）:37.