敦煌前列宝对慢性前列腺炎模型大鼠血液流变学指标及血管内皮功能的影响*

朱向东，丁文君，程畅和

(1.甘肃中医学院，甘肃兰州730000;2.甘肃省中医院肾病科，甘肃兰州730050)

慢性非细菌性前列腺炎是男性泌尿系统常见病、多发病，好发于青壮年［1］。其病因及发病机制目前尚不完全清楚，属难治性疾病，临床缺乏有效的治疗方法和药物。敦煌前列宝是以敦煌出土卷子《辅行诀脏腑用药法要》中所载“大泻肾汤”为基础，依据慢性前列腺炎临床表现加减化裁而成，经临床反复应用，疗效肯定。笔者观察了敦煌前列宝对慢性前列腺炎模型大鼠血液流变学及血管内皮功能的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 动 物

SPF级Wistar大鼠32只，雄性，3月龄，体质量(240±20)g，由甘肃中医学院动物实验中心提供，实验动物质量合格证:SCXK(甘)2004－0006。动物购置后适应性喂养1周，全部实验操作均于SPF级动物实验室进行，设施使用合格证为SYXK(甘) 2004－0006。

1.2 药品、试剂与仪器

敦煌前列宝由茯苓、生甘草、制大黄、黄芩、赤芍、干姜、川牛膝、益母草按比例组成，药材由甘肃中医学院附属医院中药房提供，煎煮后过滤去渣，水浴浓缩滤液，使每mL药液含生药1.72 g;前列泰胶囊，陕西东泰制药有限公司产品，批号Z20050021，以蒸馏水配制成10μL/g混悬液备用;消痔灵注射液，北京第四制药厂产品，批号0710312，实验前用生理盐水配制成250 g/L备用。ET-1放免试剂盒，兰州军区总医院安宁分院核检验科提供，批号S20063089。Biofuge Fresco低温高速离心机，德国贺力氏(Heraeus)公司产品;BS124s电子分析天平，德国赛多利斯(Sartorius)公司产品;UV－2401 PC型紫外分光光度计，日本岛津(SHIMADZU)公司产品; BH 2型光学显微镜，日本奥林巴斯公司产品;MDF－71超低温冰箱，日本三洋(SANYO)公司产品;HH－601数显恒温水浴箱，江苏省金坛市恒丰仪器厂产品;LBY－N6A自清洗旋转式黏度仪，北京普利生仪器有限公司产品;K－80型全自动血液黏度测定仪，中外合资北京世帝仪器公司。

1.3 分组、模型的建立与给药

将32只大鼠依体质量编号，按随机数字表法选取8只为正常对照组，其余24只动物造模后称量体质量，按随机数字表法分为模型对照组、前列泰组、敦煌前列宝组3组，每组8只。模型的建立参照文献方法［2］:将实验大鼠用100 g/L水合氯醛(250～300μg/g)麻醉，无菌操作下取下腹部正中切口约1 cm，直达腹腔，提出膀胱及两侧精囊，暴露附属于精囊内侧的前列腺背叶，注入前列腺双侧背叶250 g/L消痔灵注射液共0.2 mL，缝合肌肉、皮肤。创口处喷庆大霉素注射液以防感染。造模期为7 d。

敦煌前列宝组予敦煌前列宝水煎剂10μL/g灌胃，相当于8.6 g/kg生药，是临床用量的1倍;前列泰组予前列泰混悬液 10μL/g灌胃，相当于0.66 g/kg生药，是临床用药量1倍;模型对照组、正常对照组按用药组的方法，灌服蒸馏水，灌胃量10 mL/(kg·d)。每日给药1次，连续30 d。

1.4 检测指标

于末次给药后24 h，称大鼠体质量，将大鼠以50μg/g的戊巴比妥钠腹腔麻醉，腹主动脉取血，肝素抗凝，测血液流变学各参数。取出前列腺组织，剥离被膜及周围脂肪组织，以生理盐水涮洗，滤纸吸干，电子天平称量质量，计算大鼠前列腺指数。将大鼠前列腺自中轴均分2份，右侧部分保存于40 g/L多聚甲醛/0.1M PBS(pH值7.2)固定液中，室温下经水洗、梯度酒精脱水、二甲苯透明、浸蜡、包埋等处理后，切片，HE染色，光镜下观察前列腺局部病理变化;左侧部分匀浆，将匀浆液以3 000 r/min离心15 min，将上清液装入试管，按照ET-1试剂盒说明书采用放免法检测ET-1含量。

1.5 统计学方法

采用SPSS 17.0统计分析软件处理。所有数据以均数(x－)±标准差(s)表示，各组间比较采用单因素方差分析，各个实验组的两两比较采用最小显著性差异法LSD-t法。以P＜0.05为差别有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠前列腺湿质量、体质量及腺体指数对比

模型对照组及药物组大鼠体质量与正常对照组对比，差别无统计学意义(P＞0.05)，表明各组之间前列腺腺体质量有可比性。模型对照组前列腺指数与正常对照组对比，差别有统计学意义 (P＜0.05)。与模型对照组对比，前列泰组、敦煌前列宝组大鼠前列腺指数降低，差别有统计学意义(P＜0.05、P＜0.01)，但敦煌前列宝组与前列泰组两组间对比，差别无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 各组大鼠体质量、前列腺湿质量及腺体指数对比 ±s

表1 各组大鼠体质量、前列腺湿质量及腺体指数对比 ±s

注:与正常对照组对比，*P＞0.05，＊＊P＜0.05;与模型对照组对比，##P＜0.05，###P＜0.01;与前列泰组对比，ΔP＞0.05。

组 别 动物数 大鼠体质量/g 单侧前列腺湿质量/mg 前列腺指数/(mg·g－1)正常对照组 8 379.714 3±39.373 1 0.453 7±0.090 3 0.003 1±0.000 8模型对照组 8 366.375 0±37.332 2* 0.646 6±0.139 1 0.005 2±0.000 6＊＊前列泰组 8 370.875 0±37.146 2* 0.465 6±0.154 9 0.004 5±0.000 5##敦煌前列宝组 8 373.857 1±67.966 7* 0.447 5±0.070 2 0.003 3±0.000 4###Δ

2.2 各组大鼠前列腺组织病理学对比

正常腺体组织柔软，有光泽，弹性好，与周围组织无粘连，易分离。模型对照组腺体明显增大，与周围组织粘连较重，部分组织表面可见暗红色或灰白色片状结节。前列泰组腺体中度增大，与周围组织有粘连，弹性较差，部分组织表面呈暗红色，其程度较模型对照组明显减轻。敦煌前列宝组腺体与周围组织有轻度粘连，腺体较柔软，表面有光泽，但腺体较正常对照组有轻度的肿胀。见图1。

图1 各组大鼠前列腺组织病理学对比(HE染色，100×)

2.3 各组大鼠血液流变学指标对比

与正常对照组对比，模型对照组红细胞压积、血浆黏度及全血黏度升高，差别有统计学意义(P＜0.01)。与模型对照组对比，敦煌前列宝组各血液流变学指标均降低，差别有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。与前列泰组对比，敦煌前列宝组的各血液流变学指标偏低，差别无统计学意义(P＞0.05)见表2。

表2 各组大鼠血液流变学指标对比 ±s

表2 各组大鼠血液流变学指标对比 ±s

注:与正常对照组对比，＊＊＊P＜0.01;与模型对照组对比，##P＜0.05，###P＜0.01;与前列泰组对比，ΔP＞0.05。

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2.4 各组大鼠前列腺组织匀浆ET-1含量对比

与正常对照组对比，模型对照组大鼠前列腺组织中 ET-1含量增高，差别有统计学意义(P＜0.05)。与模型对照组对比，敦煌前列宝组和前列泰组前列腺组织ET-1含量均减少，差别有统计学意义(P＜0.01、P＜0.05)。与前列泰组对比，敦煌前列宝组前列腺组织ET-1含量减少，差别有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 各组大鼠前列腺组织ET-1含量对比 ±s

表3 各组大鼠前列腺组织ET-1含量对比 ±s

注:与正常对照组对比，＊＊P＜0.05;与模型对照组对比，##P＜0.05，###P＜0.01;与前列泰组对比，ΔΔP＜0.05。

ET-1正常对照组组别 动物数0.300 0±0.012 0模型对照组 8 0.505 0±0.010 2＊＊前列泰组 8 0.471 3±0.174 8##敦煌前列宝组 8 0.253 8±0.152 3###ΔΔ 8

3 讨论

中医典籍中虽无前列腺炎病名，但根据其临床症状可归属于“精浊”、“白淫”范畴。历代医家对其病因病机进行了深入探讨，认为湿热是前列腺炎早期的主要病机、精浊瘀阻是其主要病理变化、肾虚是其后期病机演变的结果。敦煌前列宝是在敦煌《辅行诀脏腑用药法要》所载的“大泻肾汤”的基础上，依据临床经验并根据慢性前列腺炎“肾虚为本，湿热、血瘀为标”的病机本质加减化裁而成。“大泻肾汤”以茯苓为君，淡以利窍，甘以助阳;以大黄为臣，重用以清泄湿热、活血化瘀;辅以黄芩清热燥湿、泻火解毒;独特之处是在荡涤祛实之中，妙用芍药护阴，佐以干姜辛开温阳，阴阳并调，气化以行。敦煌前列宝方是在上方基础上酌加了川牛膝、益母草，是针对前列腺炎瘀血病机，增强其组方的活血化瘀、利尿通淋之功效。

本研究采用传统的前列腺内注射消痔灵方法复制了慢性非细菌性前列腺炎动物模型［2］，并且以血液流变学和ET-1为观察指标［3］，研究结果表明敦煌前列宝可明显改善实验性慢性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织的炎症状态及病理损伤，其主要机制可能是通过提高前列腺指数，升高模型大鼠全血黏度、血浆黏度、红细胞压积百分率及降低前列腺组织中ET-1的表达，从而改善模型大鼠的血液流变学异常及内皮功能紊乱。此研究为敦煌前列宝临床治疗慢性前列腺炎提供了理论依据，也为敦煌古方的临床开发提供了佐证。

［1］王琦.王琦男科学［M］.北京:中国中医药出版社，1997: 653.

［2］史红，郑晓亮.慢性非细菌性前列腺炎动物模型研究进展钱伯初［J］.中国临床药理学与治疗学，2007，12(1): 14－18.

［3］陈国宏，李兰群，任映.前列通瘀汤对前列腺蛋白所致慢性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织细胞因子影响的研究［J］.北京中医药大学学报，2007，30(6):406－408.