胶体金法与ELISA法在检测血液丙型肝炎病毒抗体中的比较

袁 杰 (湖北民族学院附属民大医院输血科，湖北 恩施 445000)

丙型肝炎病毒(HCV)呈世界性分布〔1〕，目前临床中尚无特效治疗慢性丙型肝炎(丙肝)的药物，且也无有效疫苗预防HCV感染，对健康人群进行筛选及早期临床诊断成为当前有效控制丙肝传播的重要手段〔2〕。胶体金法为上世纪80年代诞生的一种新技术，目前已在医学检验中广泛应用〔3〕。但有学者报道，胶体金法虽具有快速、简便及无需检测设备等优点，但其与ELISA检测结果存在不符合情况，不符合率约为1%〔4〕。本文以HCV胶体金法与ELISA法在检测血液HCV抗体中应用情况为研究点进行临床观察。

1 材料与方法

1.1 一般资料 2010年1月至2011年12月在我院住院丙肝疑似患者541例。其中208例急诊入院，333例平诊入院;男314例，女227例;年龄14～68岁，平均(37.8±21.6)岁。

1.2 标本来源 患者晨起空腹时，采用含有分离胶的HCV抗体检测专用试管抽取静脉血5 ml，抽取后及时离心，将分离的血清放置于－80℃冰箱内保存备检。

1.3 试剂与仪器 HCV抗体ELISA检测试剂盒为上海英科生物技术有限公司产品，批号：201001284;HCV抗体胶体金检测试剂盒由天津九鼎生物制药有限公司提供，批号为200910011。全自动FAME酶联免疫分析系统和AT2样品处理系统全为奥斯邦公司产品。严格按试剂盒说明操作。

1.4 判断标准 ①胶体金法：检测线和对照线均出现紫红色条带，或在检测线隐约出现紫红色条带，判断为阳性;只是对照线处出现紫红色条带，判断为阴性;如检测线和对照线均未出现色带，判断为无效。②ELISA法：以标本吸光度值和临界值之比(S/CO)≥1判断为阳性，＜1判断为阴性。相对特异性、相对灵敏性及相对准确性计算方法参照李文胜等〔5〕报道。

1.5 统计学方法 应用SPSS14.8统计软件进行分析，计数采用(χ2)检验，计量资料以s记录，采用t检验。

2 结果

2.1 HCV胶体金与ELISA法检测结果 ELISA检测阳性样本272份，阴性269份;胶体金法检测阳性291份，阴性250份，与ELISA法检测结果对比，胶体金法相对特异性为96.0%(261/272)，相对灵敏性为88.8%(239/269)，相对准确性92.4%(500/541)。

2.2 胶体金法与ELISA法检测结果对照情况 胶体金法与ELISA法均阳性261例，均阴性239例，仅胶体金法阳性30例，仅ELISA法阳性11例。胶体金法与ELISA法检测结果差异显著(P＜0.05)。

2.3 胶体金法与ELISA法检查时间和费用比较 胶体金检查时间〔(22.4±4.6)min〕和费用〔(6.2±1.1)元〕显著低于ELISA 法〔(118.2±21.1)min，(13.3±3.2)元〕(P ＜0.05)。

3 讨论

目前临床中HCV抗体的常用检测方法有HCV胶体金法和ELISA法。ELISA法是利用酶催化底物反应的放大作用，提高特异性抗原、抗体免疫学反应的一种标记免疫技术〔6〕;而胶体金法是以胶体金作为标志物，利用层析作用检测抗原、抗体反应。但胶体金和ELISA法在HCV抗体检测中的应用情况，不同学者所持的观点存在差别。孙宗立等〔7〕认为，二者灵敏度、特异性对比无显著差异，但胶体金法快速、便捷，且不需特殊设备，更适合于临床，而蒋树海等〔8〕认为，ELISA法检测抗HCV检出率高出胶体金检测法0.8%，临床中应将ELISA法检测作为最终结果，而胶体金法只应作为参考，对于降低输血后医疗纠纷具有重要意义。

本研究资料表明，ELISA法对HCV抗体检测的准确性优于胶体金法，分析发现，胶体金假阴性或假阳性情况的出现大多为人为及环境因素所致;如判断结果的时间不够充分、检测环境温度低及加样量不足等〔9〕，上述因素都会造成反应不足而造成假性结果出现;同时过滤膜破损及判断不仔细等也是影响结果的重要原因〔10〕。之所以不同学者对于胶体金法与ELISA法对照研究的结论存在偏差，其原因可能是研究过程中对人为及环境等上述因素的注重程度不同。相对于胶体金法，ELISA法对HCV抗体的检测虽有较高的准确率，但其检出相对费时，且花费高。

笔者认为，胶体金法应用于HCV检测，操作便捷、省时及费用低，且有相对较高的特异性和灵敏度，可作为紧急和特殊需要情况下的初筛。但因存在诸多影响检测结果的因素，可能出现漏检和误诊，建议条件允许时应使用ELISA方法进一步确认，以降低医院感染或医疗纠纷的发生率。

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3 姚仁南，陈复兴，陈 玲，等.化学发光免疫分析法检测献血者HCV抗体的应用评价〔J〕.中华全科医学，2011;9(3)：450-3.

4 姚根宏，栾建凤，朱培元等.丙型肝炎病毒核酸扩增及微流芯片检测方法的建立〔J〕.临床输血与检验，2010;12(4)：289-91.

5 李文胜，周 伟，柳晓琴，等.快速输血免疫胶体金法检测的临床应用评价〔J〕.现代预防医学，2011;38(12)：2369-70.

6 张雄民，伍晓菲，刘宇宁，等.国产化学发光免疫试剂检测血清HB-sAg的应用评价〔J〕.临床输血与检验，2009;11(1)：32-4.

7 孙宗立，谷 雷，李武威，等.胶体金免疫层析法检测丙型肝炎病毒抗体的临床应用评估〔J〕.陕西医学杂志，2008;37(6)：728-9.

8 蒋树海，杨发青，LEE Tony，等.运用免疫胶体金技术快速检测丙型肝炎病毒抗体〔J〕.解放军预防医学杂志，2009;27(1)：30-3.

9 Nothdurft P，Motter PJ，Pospiech PR.Effect of surface treatment on the initial bond strength of different luting cements to zirconium oxide ceramic〔J〕.Clin Oral Investig，2009;13(2)：229-35.

10 侯晓箐，梁 艳，陈 洁，等.化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体内实验评价〔J〕.检验医学，2010;25(5)：365-7.