红花黄色素冻干粉针对大鼠体内体外血栓形成的影响

苏慧，刘萍，温薇，苏云明

(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)

中药红花为菊科植物红花干燥管状花，性温，味辛，具有活血化瘀的功效。红花黄色素为红花的主要活性成分，研究证实［1－5］，红花黄色素能明显减轻心肌缺血及缺血再灌注损伤，抑制血小板聚集并改善血流动力学［6］。本实验通过大鼠动静脉旁路血栓形成及体外血栓形成实验，观察红花黄色素冻干粉针对体内、体外血栓形成的影响，为其临床应用提供实验依据。

1 实验材料

1．1 实验药物 注射用红花黄色素冻干粉针由乌鲁木齐郎润医药开发有限公司提供;规格:80mg/支;用法:每天1支，用时以0．9%生理盐水15～20ml溶解。

1．2 阳性对照药 复方丹参注射液由上海第九制药厂提供;规格:2m l/支;用法:静脉注射4m l/次，溶于20m l 50%葡萄糖溶液中，1日1～2次。

1．3 实验动物 Wistar大鼠，体质量250～300g，雌雄各半，由黑龙江中医药大学药物安全性评价中心提供;动物合格证号:09－3－3。

1．4 实验仪器 LBY－S5型血栓形成仪(北京宇华国际技术公司);DG－1型电热干燥箱(重庆实验设备

作者简介:苏慧(1979－)，女，讲师，主要研究方向:中药现代药理学研究。

收稿日期:2012－07－15

修回日期:2012－08－14

厂);DT100分析天平(北京光学仪器厂);CS213电热培养箱(重庆实验设备厂)。

2 实验方法

2．1 红花黄色素冻干粉针对大鼠动静脉旁路血栓形成的影响

取50只Wistar大鼠，称质量后随机分5组，每组10只，以0．3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔麻醉，仰位固定于大鼠手术台上，实施手术。弯剪剪去颈部位毛，正中切开颈部皮肤，钝剥离分离右颈总动脉及左颈外静脉，将事先充满肝素生理盐水(50u/ml)的聚乙烯管(分三段连结，在中段放入长6cm的4号手术线)的一端插入左颈外静脉后，从聚乙烯管注入肝素50u/kg，夹住管壁，将右颈总动脉近心端以止血夹阻断血流，眼科剪剪一“△”口，将聚乙烯管另一端插入右颈总动脉，结扎，立即舌下静脉注射红花黄色素冻干粉针溶液，低剂量组7.2mg/kg;中剂量组14.4mg/kg;高剂量组28.8mg/kg;阳对药复方丹参注射液1.8ml/kg;阴性对照组给予等体积生理盐水，10min后打开止血夹开放血流，血液从右颈总动脉经聚乙烯管返回左颈外静脉，开放血流15min后，中断血流，迅速取下聚乙烯管，取出手术线并称重，以总重量减去线重计算血栓湿重。2．2 红花黄色素冻干粉针对大鼠体外血栓形成的影响

取50只Wistar大鼠，随机分为5组，每组10只，0．3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔麻醉大鼠，仰位固定于大鼠手术台上，手术剥离颈总动脉及股静脉。舌静脉给药，剂量同上，10min后颈总动脉插管取血1．8ml，注入标好刻度线的血栓硅胶管中，套紧血栓管装入体外血栓形成仪，启动转盘，计时，转动15min后，停机，取下血栓管，将管内血液及已形成的血栓迅速倒在预先铺好滤纸的平皿中，用眼科镊子轻轻由一端提出血栓，使血栓下垂，移放干燥滤纸上，用分规刻度尺测血栓长度，后提起血栓重新放在称量好的滤纸上，称其湿重后，置恒温烤箱60℃烘烤30min，称干重。

3 实验结果

3．1 红花黄色素冻干粉针对大鼠动静脉旁路血栓形成的影响

复方丹参组及红花黄色素冻粉针各剂量组与生理盐水组组间比较用t检验，结果显示，复方丹参组与红花黄色素冻干粉针各剂量组均具有统计学差异(P＜0.01或P＜0．005)，说明红花黄色素冻干粉针及复方丹参均具有明显的抑制大鼠体内血栓形成的作用，且红花黄色素冻干粉针中剂量组作用优于高、低剂量组及复方丹参组。结果见表1。

表1 红花黄色素冻干粉针对大鼠血栓形成的影响(±s，n=10)

表1 红花黄色素冻干粉针对大鼠血栓形成的影响(±s，n=10)

注:与生理盐水组比较，＊＊P ＜0．01，＊＊＊P ＜0．005。

组别 剂量(mg/kg) 血栓湿重(mg)生理盐水组 等体积62．89 ±20．41复方丹参组 1．8(ml) 33．59 ±13．30＊＊＊红花黄色素冻干粉针低剂量组 7．2 35．85 ±16．52＊＊红花黄色素冻干粉针中剂量组 14．4 30．30 ±13．18＊＊＊红花黄色素冻干粉针高剂量组 28．8 35．94 ±14．78＊＊

3．2 红花黄色素冻粉针对大鼠体外血栓形成的影响

红花黄色素冻干粉针各剂量组及复方丹参注射液组与生理盐水组组间比较用t检验，结果显示，红花黄色素冻干粉针各组及复方丹参组血栓长度均有统计学差异(P＜0．05或P＜0．005);红花黄色素冻干粉针各组及复方丹参组血栓湿重均有显著性差异(P＜0．05或P＜0．01或P＜0．005);红花黄色素冻干粉针各组能减少血栓干重形成，但无统计学差异，而复方丹参组有显著统计学差异(P＜0．01);结果显示，红花黄色素冻干粉针及复方丹参注射液均有抑制血栓形成的作用，其中红花黄色素冻干粉针中剂量组优于低、高剂量组，与复方丹参组作用相当。结果见表2。

表2 红花黄色素对大鼠体外血栓形成的影响(±s，n=10)

表2 红花黄色素对大鼠体外血栓形成的影响(±s，n=10)

注:与生理盐水组比较，*P ＜0．05，＊＊P ＜0．01，＊＊＊P ＜0．005

组别 剂量(mg/kg) 血栓长度(mm) 血栓湿重(mg) 血栓干重(mg)生理盐水组 等体积103．0 ±51．9 578．7 ±363．0 64．33 ±36．0复方丹参组 1．8(ml) 24．0±30．4＊＊＊ 105．2±103．5＊＊＊ 21．12±14．5＊＊冻干粉针低剂量组 7．2 53．0 ±26．9* 267．6 ±155．1* 49．72 ±31．7冻干粉针中剂量组 14．4 29．7±25．3＊＊＊ 152．9±127．2＊＊ 35．83±31．9冻干粉针高剂量组 28．8 47．6 ±52．7* 215．7 ±220．7*41．23 ±41．1

通过大鼠动静脉旁路血栓形成和体外血栓形成实验，观察红花黄色素冻干粉针的抗血栓作用，证实红花黄色素冻干粉针具有明显的抑制大鼠体内与体外血栓形成作用，其中在体内血栓形成试验中，红花黄色素冻干粉针组药效优于复方丹参组。在体外血栓形成试验中，红花黄色素冻干粉针对血栓湿重、干重影响与复方丹参组作用相当。说明红花黄色素冻干粉针具有较好的活血化瘀作用，具有较好的临床应用前景。

［1］孙建国，滕梅，张文忠，等．红花黄色素对兔缺血再灌注心肌的保护作用［J］．山东医药，2012，52(1):42 －43．

［2］林楚生，方懿珊，林昱，等．红花黄色素对脑梗死患者凝血机制的影响［J］．基层医学论坛，2010，14(16):502 －503．

［3］黄正良，崔祝梅，任远，等．红花黄色素的抗凝血作用研究［J］．中草药，1987，18(4):22 －25．

［4］陈文梅，金鸣，吴伟，等．食品红花黄色素抗血小板激活因子作用的研究［J］．心肺血管病杂志，2001，20(4):201 －201，240 －240．

［5］杨志福，文爱东，贾敏，等．红花黄色素对急性血瘀大鼠微循环及血液流变学部分指标的影响［J］．中药材，2001，24(4):283 －284．

［6］万先惠，秦亚利，颜涛．红花注射液药理作用研究进展［J］．中医药学报，2011，39(6):109 －110．