芍药苷抗肝纤维化机制的研究进展

秦 斌

广西壮族自治区桂林市第二人民医院药剂科，广西 桂林 541000

芍药苷 (paeoniflorin，PAE)是主要从毛莨科植物芍药中提取，是一种易溶于水单萜类糖苷白色无定形粉末化合物，是芍药的主要单体活性成分，芍药苷具有抗炎及免疫调节作用［1］。近年来，对于芍药苷这一中药提取物的研究近期也开始成为热点。国内外有关学者运用芍药苷进行了大量抗肝纤维化的研究，效果较为满意。本文就芍药苷抗肝纤维化方面的研究作一综述。

1 肝纤维化形成机制

肝纤维化是肝组织对慢性损伤的修复反应，是多种类型细胞、氧化应激、细胞因子和生长因子等一系列复杂作用的结果，以细胞外基质 (extracellular matrix，ECM)成分的过度增生与异常沉积为主要特征。肝纤维化是慢性肝病重要的病理特征，也是肝硬化发生的前奏和必经的中间环节，是临床治疗慢性肝病的关键环节。近年来国内外取得广泛共识的是:肝星状细胞 (hepatic stellate cell，HSC)是肝脏ECM的主要来源，是肝纤维化形成的细胞学基础，它在ECM代谢和各种细胞介质的产生过程中处于中心地位，HSC的表型激活和过度增殖是肝纤维化形成过程的关键［2］。

2 芍药苷抗肝纤维化的机制

2.1 抗自由基过氧化损伤，促进肝细胞再生

芍药苷的化学结构表明，芍药苷分子中的多个酚羟基使其具有较强的自由基清除活性、具有生物学应答调节作用［3］，对由H2O2诱导DNA单链损伤有保护作用［4］:抗氧化用氧自由基和其他基因产生的增多与很多种类的肝损伤和肝纤维化有关，其中最重要的是超氧化物。在肝纤维化中，线粒体呼吸链的破坏导致电子泄露增加和超氧化物的增多，通过以4n几何级数的速度增长，超氧基团又可使过氧化氢、羟自由基、单线氧气等活性氧类产物增加。羟自由基极度活跃，能够攻击包括脂类、蛋白质、核酸和糖类在内的许多细胞成分。同时肝内原有的细胞保护机制 (抗氧化系统、修复系统)遭到破坏，氧化物的产生与消除之间不平衡，因而诱发肝纤维化的形成与发展，在体外试验李文庭反应中［5］，芍甘多苷大剂量组肝细胞和肝细胞线粒体中MDA含量降低，SOD活性升高 (P＜0.05或0.01)，说明芍甘多苷有较强的抗氧化作用，拮抗自由基对肝脏的损伤。骆和生等［6］体内实验发现芍甘多苷大剂量能显著提高线粒体Na。K+ATPase、Ca”ATPase活性，减轻线粒体钙超载和水肿，增强能量代谢、有效减轻自由基对线粒体的损伤，从而对受损的线粒体起到保护作用。因此，芍药苷可认为是通过清除氧自由基，抑制脂质过氧化反应，阻断或者减缓肝损伤时的炎症刺激，达到抗肝纤维化的作用。

2.2 抑制炎性因子释放，改善肝脏微循环

肝细胞受损后，Kupffer细胞和淋巴细胞等炎性细胞被激活，释放多种细胞因子 (肿瘤坏死因子、白细胞介素一β等)，促进间质细胞的有丝分裂，使贮脂细胞及其他细胞合成胶原纤维增多［7］。因此，消除炎症，减少细胞因子的释放，是抑制胶原合成、抗肝纤维化的重要途径。Nero E等［8］发现，肿瘤坏死因子 (TNF)活性的高低与肝细胞坏死程度的轻重有着正相关的关系，且TN单抗 (mAb—TNF)对TNF介导的肝细胞坏死有保护作用。提示TNF是造成急性肝坏死的重要介质，在肝纤维化产生过程中，白细胞介素—β(IL—β)、IL—6、IL—8水平升高。Hung KS研究表明［9］，IL—6及IL—8主要由单核细胞和巨噬细胞产生并参与炎性损伤过程。肝脏内核因子KB能通过调控炎性因子和抗炎因子增加和减少来影响反应的损伤修复，Ping J在CCl4联合乙醇诱导的大鼠肝纤维化模型中［10］，芍甘多苷能显著抑制肝组织中NF—KBp65/IKBCt的过度表达，降低血清TNF—d水平。总之，TNF。在细胞因子网络中起重要调节作用，它的增加破坏了网络平衡，导致免疫功能紊乱，加重肝细胞坏死。Czaja MJ实验研究表明［11］，模型组大鼠肝脏TNF－a含量较正常组为高，有显著性差异，表明TNF a参与介导了CCL4。所致的大鼠亚急性肝损伤。芍甘多苷大剂量能显著降低 CO1。亚急性肝损伤大鼠肝脏TNF—Q含量，从而对损伤肝脏起到保护作用。芍甘多苷是一抗炎免疫调节药，在不同的病理状态下，芍甘多苷对异常的免疫功能具有双相调节作用。lseri SO研究发现［12］在化学性和免疫性肝损伤模型中，芍甘多苷有抗炎作用。

2.3 降低肝脏总NOS、iNOS的活性及NO的含量，阻断NO对肝脏的损伤作用。NO(一氧化氮)是NO合成酶以左旋精氨酸为底物合成的。体内合成NO的酶有两种即原生酶 (eNOS)和诱生酶 (iNOS)，eNOS合成的NO，主要参与传递信息、舒张血管和抑制血小板聚集与粘附的过程，而iNOS合成的N0，主要作为细胞免疫和细胞毒性的效应分子，在多种感染性及自身免疫性疾病的发病机制中起重要作用。研究表明［13－14］，在免疫刺激条件下iNOS mRNA在肝细胞的表达对肝损伤的发生有重要意义。iNOS及其合成的NO对肝细胞有损害作用，NO介导了枯否氏细胞对肝细胞的毒性，但eNOS可以减轻肝脏损伤。同时，NO可作为NF—K B的激活剂，激活NF—K B。与RObt一样，还可攻击caspase中起关键作用的巯基，使其丧失活性，抑制凋亡，但同时可导致细胞坏死。与模型对照组相比，芍甘多苷大剂量灌胃给药能显著降低CCL4亚急性肝损伤大鼠肝脏N0含量 (P＜0.01)，中小剂量有一定的降低作用趋势 (P＞0.05)，表明芍甘多苷能通过降低肝脏NO含量而起到肝脏保护作用。

2.4 抑制HSC活化，抑制胶原生成，促进病理沉积胶原降解。

在各种因素引起的肝脏损伤中，多种内源性细胞因子参与肝细胞的凋亡，从而导致肝脏功能的异常，抗肝纤维化治疗中诱导细胞的凋亡是目前研究的热点。王晓玉等实验［15］发现PAE作用24和48 h均可明显抑制体外培养大鼠HSC分泌HA和PcⅢ，还发现PAE能显著降低血清ALT，AST和ALP水平，升高血清ALB水平和A/G值。晏雪生实验［16］，2m∥mL芍药苷作用HepG—2细胞48h后的细胞凋亡率 (21.67%)显著高于相应无药对照组 (3.49%)，P＜0.05。肝脏病理组织学观察显示PAE能减轻肝脏炎细胞浸润，改善脂肪变性，有利于肝细胞和肝脏组织结构、形态恢复正常。周登余等研究表明PAE能减少大鼠系膜增生性肾小球肾炎时系膜细胞的增生，使已经聚积的ECM部分降解，能一定程度保护和恢复大鼠的肾功能。

2.5 基因表达谱芯片检测表明，芍甘多苷对肝脏基因表达的调控是多靶点的，这些多途径的靶基因的改变可能是芍甘多苷肝脏保护作用的分子生物学机理，具体表现在［17－20］:①上调与能量代谢有关的基因表达;②上调与转录、细胞分裂和增殖有关的蛋白和酶的基因表达，促进转录、细胞分裂和增殖;③下调与促进细胞凋亡有关的基因表达，抑制细胞调亡;④下调部分能促进肝纤维化的基因表达，减轻肝纤维化;⑤上调与应激反应有关的基因表达，保护肝细胞;⑥调节与肝脏代谢酶有关的基因表达;⑦调节与免疫和炎症反应有关的基因表达，降低白细胞介素等细胞因子，降低细胞免疫和体液免疫，减少炎症介质及受体的产生:⑧上调与抗自由基损伤有关的基因表达;⑨上调与转运有关的基因表达。

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