大叶白蜡树皮的化学成分研究Δ

肖正华，蔡玉鑫，阿依别克·马力克（1.四川理工学院，四川自贡643000；.新疆大学化学化工学院，乌鲁木齐 830046）

木樨科梣属大叶白蜡树（Fraxinus chinensis var.rhynchophylla Hemsl.），又名亚生（维吾尔语），为城市绿化树种，全新疆均有分布。其皮性寒、味苦，具清热燥湿、收敛之效；其种子性温、味辛，具镇静安神之效，为常用维吾尔医药[1]。新疆部分地区以其同属美洲绿梣的树皮作秦皮，其化学成分与正品秦皮（富含香豆素类）差异很大[2]。为了开发新疆药用资源，本课题组对大叶白蜡树的皮及种子进行了系统研究。从大叶白腊树皮的90%乙醇提取物中分离出11个化合物。经理化常数检测、标准品对照、文献比较和波谱学等方法，鉴定为咖啡酸（1）、丁香醛（2）、槲皮素（3）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（4）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（5）、黄芩素（6）、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷（7）、丁香苷（8）、木犀草素（9）、汉黄芩素（10）、芦丁（11）。

1 仪器与试药

MP-S3型熔点仪（温度计未经校正，日本Yanaco公司）；ARX-300型核磁共振（NMR）仪（TMS为内标）、Equinox 55 FT-IR型（KBr压片）红外光谱（IR）仪（德国Bruker公司）；1100LC-MS（ESI）型质谱（MS）仪（美国HP公司）；lambda17UV/VIS型紫外光谱（UV）仪（美国Perkin-Elmer公司）。

薄层（TLC）和柱色谱用硅胶（青岛海洋化工厂）；所用试剂均为分析纯。大叶白蜡树皮采自乌鲁木齐市，由新疆大学阿依别克·马力克副教授鉴定为真品，标本现存于四川理工学院天然药物实验室。

2 提取与分离

取大叶白蜡树皮2 kg，粉碎，用90%乙醇渗漉，减压浓缩至适量，加水分散，冷置。滤液依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇抽提，得石油醚提取物17 g、氯仿提取物68 g、醋酸乙酯提取物38 g、正丁醇提取物43 g。经D101大孔树脂、Sephadex LH-20、硅胶柱（100～200目）制备色谱反复分离，甲醇反复重结晶等方法分离纯化。氯仿部分用石油醚-醋酸乙酯洗脱，得化合物1、2；正丁醇部分用氯仿-甲醇洗脱，得化合物8、9、11；其余化合物由醋酸乙酯部分用氯仿-甲醇、乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱而得。

3 结构鉴定

化合物1：土黄色粉末（甲醇），mp 224～226℃；分子式：C9H8O4。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：12.06（1H，br s，COOH），9.49（1H，br s，OH），9.10（1H，br s，OH），7.40（1H，d，J＝15.9 Hz，H-3），7.01（1H，d，J＝2.0 Hz，5-H），6.95（1H，dd，J＝8.1，2.0 Hz，9-H），6.75（1H，d，J＝8.1 Hz，8-H），6.16（1H，d，J＝15.9 Hz，2-H）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：168.0（C-1），148.3（C-7），145.7（C-6），144.7（C-3），125.9（C-4），121.2（C-2），115.9，115.3，114.8（C-5，8，9）。根据1H-NMR、13C-NMR数据及文献[3]对照，确定化合物1为咖啡酸。

化合物2：白色羽状结晶（甲醇）；分子式：C9H10O4；ESI-MS（m/z）：181[M-H]-；IRνkBrmax（cm－1）：3440，1671，1607，1588，1465，1331，1107。1H-NMR（CDCl3，300 MHz）δ：9.83（1H，s，H-7），7.15（2H，s，H-2，6），6.10（1H，br s，OH-4），3.98（6H，s，3，5-OCH3）。13C-NMR（CDCl3，75 MHz）δ：190.6（C-7），147.5（C-3，5），141.0（C-4），128.6（C-1），106.9（C-2，6），56.5（3，5-2×OMe）。理化数据及波谱与文献[4]报道一致，故确定化合物2为丁香醛。

化合物3：黄色晶体（醋酸乙酯），mp 313～315℃；紫外灯光（365 nm）下显黄绿色荧光，Mg-HCl反应呈阳性，浓硫酸反应呈黄色。其TLC的Rf值、UV和IR与槲皮素标准品基本一致，故确定化合物3为槲皮素。

化合物4：黄色粉末（甲醇），mp 284～285℃；紫外灯光（365 nm）下显黄色荧光，Mg-HCl反应呈阳性，浓硫酸反应呈黄色，Molish反应呈阳性（nm）：257，269，299，362；IR（cm－1）：3500～3200（OH），1665（C＝O），1560，1510（芳香烃双键），1095，1030（葡萄糖C－O－C）；EI-MS m/z（%）：302（100）。1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：6.18（1H，s，H-6），6.38（1H，s，H-8），6.84（1H，d，J＝8.4 Hz，H-5′），7.54（1H，d，J＝8.4 Hz，H-6′），7.56（1H，s，H-2′），5.46（1H，d，J＝7.5 Hz，H-1″）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：156.2（C-2），133.3（C-3），177.4（C-4），161.3（C-5），98.7（C-6），164.1（C5-7），93.5（C-8），156.3（C-9），104.0（C-10），121.2（C-1′），115.2（C-2′），144.8（C-3′），148.-5（C-4′），116.2（C-5′），121.6（C-6′），100.1（Gal-C-1），73.2（Gal-C-2），76.5（Gal-C-3），69.6（Gal-C-4），78.2（Gal-C-5），60.7（Gal-C-6）。以上数据与文献报道[5]一致，故确定化合物4为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物5：黄色粉末（甲醇）；mp 252～254℃；Mg-HCl反应呈阳性cm－1）：3483，3447，1656，1607，1566，1498，1273，1177，1086，1030，839。nm）：255，268（sh），348。1H-NMR（DMSO-d6）：7.47（1H，d，J＝2.3 Hz，C2′-H），7.44（1H，dd，J＝2.2，8.2 Hz，C6′-H），6.91（1H，d，J＝8.2 Hz，C5′-H），6.81（1H，d，J＝2.1 Hz，C8-H），6.75（1H，s，C3-H），6.46（1H，d，J＝2.1 Hz，C6-H），5.07（1H，d，J＝7.2 Hz，C1′-H）。13C-NMR（DMSO-d6，75 MHz）：182.0（4-C），164.6（2-C），163.1（7-C），161.2（5-C），157.1（9-C），150.0（4′-C），145.8（3′-C），121.5（1′-C），119.3（6′-C），116.1（5′-C），113.6（2′-C），105.4（10-C），103.3（3-C），99.7（6-C），94.8（8-C），100.0（1″-C），77.2（3″-C），76.5（5″-C），73.2（2″-C），69.7（4″-C），60.7（6″-C）。以上数据与文献报道[6]基本一致，故确定化合物5为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物6：黄色针状结晶（氯仿-甲醇）；mp 273～275℃；Mg-HCl反应呈樱红色，Molish反应呈阴性（nm）：278，314；EI-MS（m/z）：270[M]+，168[A1]+，140[A1-CO]+，102[B1]+，提示A环有3个羟基，B环无取代。1H-NMR：12.70（1H，s，C5-OH），10.60（1H，s，C7-OH），8.48（1H，s，C6-O），8.04（2H，m，C2，′6′-H），7.57（3H，m，C3，′4，′5′-H），6.91（1H，s，C3-H），6.62（1H，s，C8-H）。13C-NMR（DMSO-d6）：163.0（C-2），104.6（C-3），182.2（C-4），147.1（C-5），129.4（C-6），153.7（C-7），94.1（C-8），149.9（C-9），104.4（C-10），131.0（C-1′），126.3（C-2′），129.1（C-3'），131.8（C-4′），129.1（C-5′），126.3（C-6′）。其波谱数据与文献报道[7]基本一致，聚酰胺和硅胶TLC的结果也与黄芩素对照品基本一致，故确定化合物6为黄芩素。

化合物7：黄色无定型粉末（甲醇）；mp 181～183℃；紫外灯光（365 nm）下显黄色荧光，Mg-HCl反应呈阳性，Molish反应呈阳性，提示该化合物为黄酮苷类。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：6.21（1H，d，J＝2.4 Hz，H-6），6.39（1H，d，J＝2.4 Hz，H-8），7.30（1H，d，J＝2.1 Hz，H-2′），6.87（1H，d，J＝8.7 Hz，H-5′），7.26（1H，dd，J＝2.1，8.7 Hz，H-6′），5.26（1H，br s，H-1″of Rha），0.82（3H，d，J＝5.7 Hz，H-6″）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：157.4（C-2），134.3（C-3），177.8（C-4），161.4（C-5），98.7（C-6），164.2（C-7），93.7（C-8），156.5（C-9），104.1（C-10），120.8（C-1′），115.7（C-2′），145.3（C-3′），148.5（C-4′），115.5（C-5′），121.2（C-6′），101.9（C-1″），70.4（C-2″），70.6（C-3″），71.2（C-4″），70.1（C-5″），17.5（C-6″）。其理化性质和波谱数据均与文献报道[8]基本一致，故确定化合物7为槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷（即槲皮苷）。

化合物8：白色针晶（甲醇），mp 188～190℃，分子量：372，分子式：C17H24O9。（nm）：279，235，222，217（cm－1）：3431，3387，2900，1587，1510，1466，1420，1239，1133，1094，986，967。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：6.73（2H，s，H-2，6），6.47（1H，d，J＝15.8 Hz，H-7），6.34（1H，td，J＝4.8，15.8 Hz，H-8），5.0～4.8（糖上羟基和端基氢），4.10（2H，d，J＝4.5 Hz），3.77（6H，s，2OCH3），3.7～3.2（6H，m）。其理化检测数据与文献报道[9]基本一致，TLC的Rf值与丁香苷标准品也基本一致，故确定化合物8为丁香苷。

化合物9：黄色粉末（氯仿-甲醇），mp 203～205℃；（cm－1）：3396（－OH），1658（－C＝O），1608，1510，1446；EI-MS m/z（%）：286[M]+（100），285（10），258（17），153（25），134（12），125（15），69（10）。1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）δ：12.96（1H，s，5-OH），7.41（1H，dd，J＝9.0，2.7 Hz，6′-H），7.38（1H，d，J＝2.7 Hz，2′-H），6.89（1H，d，J＝9.0 Hz，5′-H），6.66（1H，s，3-H），6.43（1H，d，J＝1.8 Hz，8-H），6.18（1H，d，J＝1.8 Hz，6-H）。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）：163.8（C-2），102.9（C-3），181.6（C-4），157.3（C-5），98.8（C-6），164.0（C-7），93.9（C-8），161.2（C-9），103.7（C-10），119.0（C-1′），113.3（C-2′），145.6（C-3′），149.6（C-4′），116.0（C-5′），121.5（C-6′）。经TLC多体系检测，其Rf值与木犀草素标准品一致，波谱数据也与文献报道[10]基本一致，故确定化合物9为木犀草素。

化合物10：黄色颗粒状结晶（甲醇），mp 203～204℃；紫外灯光（365 nm）下显黄色荧光。1H-NMR（300 MHz，acetone-d6）：12.57（1H，s，5-OH），9.40（1H，s，7-OH），8.07（2H，m，2′，6′-H），7.62（3H ，m，3′，4′，5′-H），6.80（1H，s，3-H），6.32（1H，s，6-H），3.86（3H，s，OCH3）。13C-NMR（75 MHz，CDCl3），164.4（C-2），105.6（C-3），183.2（C-4），157.9（C-5），99.8（C-6），158.2（C-7），127.2（C-8），151.0（C-9），105.4（C-10），130.0（C-1′），130.1（C-2′，6′），127.2（C-3′，5′），132.8（C-4′），61.9（OCH3）。EI-MS m/z：284（M+），269（M+-CH3），241（M+-H2O），102（Ph-C≡CH）。以上数据与文献报道[11]基本一致，经TLC检测其Rf值也与汉黄芩素标准品基本一致，故确定化合物10为汉黄芩素。

化合物11：黄色无定形粉末（甲醇），mp 187～188℃；紫外灯光（365 nm）下显黄绿色荧光；FeCl3反应呈深绿色，浓硫酸反应呈黄色。经TLC对照，其Rf值与芦丁标准品一致，混合后熔点不下降，故确定化合物11为芦丁。

4 讨论

本研究发现大叶白蜡树皮的化学成分（富含黄酮类）与正品秦皮（富含香豆素类）差异很大，其中有7个化合物（化合物3、4、5、6、7、9、10）为首次从该属植物中分得。这为研究维吾尔药的活性成分奠定了一定的物质基础，但其药理活性及抑菌等方面的工作有待进一步开展。另外，本课题小组在试验过程中还发现大叶白蜡树的种子富含多酚类色素，并作了部分理化性质研究，证明其种子是天然食用红色素的有效材料之一。

（致谢：感谢新疆大学理化测试中心孙万福老师对本试验所做的部分测试工作！）

[1]新疆维吾尔自治区卫生厅.新疆中草药[M].乌鲁木齐：新疆人民出版社，1975：150.

[2]李存红，徐 燕.秦皮的研究进展[J].焦作大学学报，2004，10（4）：34.

[3]魏秀丽，杨春华，梁敬钰.中药秦皮的化学成分[J].中国天然药物，2005，3（4）：228.

[4]Sano K，Sanada S，Ida Y，et al.Studies on the constituents of the bark of Kalopanax pictus Nakai[J].Chem Pharm Bull，1991，39（4）：865.

[5]叶 冠，范明松，黄成钢.芨芨草中的黄酮类化学成分的分离与鉴定[J].中草药，2006，37（6）：821.

[6]周雷宏，袁久荣.中华苦荬菜化学成分的研究[J].中草药，1996，27（5）：267.

[7]肖丽和，王红燕，宋少江，等.滇黄芩化学成分的分离与鉴定[J].沈阳药科大学学报，2003，20（3）：181.

[8]耿红梅，张嫡群，吴一兵，等.欧亚旋覆花黄酮类化学成分研究[J].中国药房，2008，19（30）：2373.

[9]何立巍，李 祥，陈建伟，等.板蓝根水溶性化学成分的研究[J].中国药房，2006，17（3）：232.

[10]古海锋，陈若芸，孙玉华，等.香青兰化学成分的研究[J].中国中药杂志，2004，29（3）：232.

[11]杜程芳，杨欣欣，屠鹏飞.白鲜皮的化学成分研究[J].中国中药杂志，2005，30（21）：1663.