溶剂法提取青蒿素的工艺

周凌云

安徽省皖南医学院药学系，安徽 芜湖 241002

青蒿素(Artennuin)是从菊科植物青蒿 (Artemisia annua L.)中提取而得，对脑型及抗氯喹恶性疟疾有特殊疗效，引起国内外的重视。［1］目前，青蒿素的提取方法及纯化方法有很多种，笔者也曾经报道过通过多次柱层析来降低成本的研究工艺，［2］但同样存在回收率低，不易工艺化，生产周期长的缺点。

本实验仅采用溶剂法处理，简化了生产步骤，生产周期短;且对滤饼中夹带的少量青蒿素也用溶剂反复处理得到结晶，回收率高。

1 原料及试剂

黄花蒿购自安徽亳州中药基地;青蒿素对照品购自中国药品生物制品检定所;所涉试剂除120号汽油外其余均为国产化学纯;Agilent公司1100系列HPLC。

2 HPLC检测方法

ZORBAX-C18色谱柱 (4.6mmх150mm，5um);流动相：乙腈：水 (44：56);检测波长：210nm;柱温：30℃;流速：1mL/min，进样体积：10uL。本方法精密称取青蒿素对照品20mg于10mL棕色容量瓶，用流动相溶解，取对照品溶液10uL注入，按上述色谱条件进行检测，按外标法测定，以峰面积计算。测得青蒿素平均回收率100.1%(n=3)，RSD=0.3。

3 实验步骤

3.1 精制过程 将青蒿原料粉碎至60目，然后倒入5倍青蒿总量的120号溶剂油 (价格为石油醚的1/2，提取率相似，达到90%以上)。通过均匀设计的现代试验设计方法，确定了分三次提取，时间分别为4-3-3小时，每次溶剂量均为5倍量，第一次的前2个小时冷浸，后2小时加热，后面均直接加热，加热温度为50～55度，每次提取均应搅拌。提取结束后60度下回收溶剂，大约每10Kg青蒿原材料的提取液可浓缩至600mL膏状物。在其中加入自配的混合溶剂，经过滤，得到黄色滤饼，其中夹杂有白色针状结晶，该滤饼中含有大量的青蒿素 (提取率约90%，HPLC检测含量约40%)，滤液中还有约10%青蒿素，留待合并处理。在黄色滤饼中加入固体物20倍量的80～85%乙醇，和固体重量10%的粉状活性炭，加热至沸腾2min，放出过滤，滤液自然冷却结晶12小时，过滤出结晶体，加热乙醇重结晶，可得白色针状结晶物 (纯度为99.0%)。

3.2 滤液中剩余10%青蒿素的处理 合并多次滤液，浓缩成浸膏，取2倍量的无水乙醇与浓缩剩余物充分混合，然后缓缓加入水，加水量约为无水乙醇量的30%，上层油状物滤去，下层液体回收为浸膏，采用3.1方法处理即可得到结晶。滤饼中经HPLC检测仅含约1%青蒿素。

4 小结

本工艺的精制部分，取消了繁琐的柱层析方法，改用溶剂法，首先使用混合溶剂除去提取物中大部分的杂质，得到粗品，再用乙醇进行结晶-重结晶，得到纯度很高的精品。方法简单易行，溶剂消耗量少，毒性相对较小，且60度下回收率高，生产周期短 (约为60小时)，易进行工艺生产。

［1］李国栋，周全.青蒿素类药物的研究现状［J］.中国药学杂志，1998，33(7)：385-389.

［2］周凌云.青蒿素纯化工艺的研究［J］.中国民族民间医药，2010，19(11)：49.