三种不同染色方法在TCT(液基细胞学)检查中的应用

蔡中文

湖北省蕲春县人民医院，湖北 蕲春 435300

近几年来，采用液基细胞学取样进行阴道脱落细胞检查在国内外得到很大的普及，它改变了传统的手工涂片的方法，制片效果好，利于观察，阳性检出率高，是细胞病理学检查的一大改革。液基制片后的染色效果直接关系到检测的结果，细胞学的常用染色方法有瑞氏染色、巴氏染色、H-E染色，效果都不错。但对于液基细胞学来说，通过比较，H-E染色效果是最理想的选择。

1 材料与方法

1.1 液基细胞制片，使用的是孝感亚光医用电子技术有限公司生产的细胞保存液 (成分为：乙醇、甲醇、氯化钙、碳酸氢钙、葡萄糖等)通过VCT-2000细胞制片机、95%酒精固定30min、水冲洗，分别用瑞氏、巴氏、H-E三种染色法。

1.2 瑞氏染色：在液基细胞涂片上滴数滴瑞氏染液，覆盖整个细胞薄层，后再按1∶2加倍冲液，染色10min。

1.3 巴氏染色：液基细胞涂片置苏木素3min、水冲洗、盐酸酒精分化5S，水冲洗碱水反蓝，95%酒精一过，桔黄一过，95%酒精洗3次，EA-50染色2min，95%酒精1min、无水酒精2min、无水酒精5min、二甲苯2min中性树胶封片。

1.4 H-E染色，液基细胞涂片置苏木素5min，水冲洗，10%盐酸酒精分化5S，水冲洗0.5%，伊红染色2min，水冲洗，95%酒精1min，无水酒精2min，无水酒精5min，二甲苯2min，中性树胶封片。

2 结果

染色后镜下发现

瑞氏染色：偏蓝灰，细胞核、细胞浆对比不明显;

巴氏染色：大部分着色较好，色彩鲜艳，不足部分为部分细胞偏红核周有伊红着色较深处，与核分界不清;

H-E染色：细胞核、细胞质染色分明，红兰适度。

3 讨论

在传统的细胞涂片中，瑞氏染色效果较好，因其省时、方便、快捷，而被广泛采用，但此法适用于血片，胸腹水，淋巴穿刺液涂片，但在液基细胞保存液中，细胞保存时间可较长，适合大批量细胞学筛查，因含防腐剂对细胞的影响而对染色的要求较高，细胞学检查中，核的变化是主要因素，把细胞核染好，核浆对比鲜明是最重要的。瑞氏染液对液基细胞染色不好，核浆对比不鲜明，瑞氏染色过程中不易掌握，易污染，故不采用。巴氏染液对大部分来自上皮和间皮的标本染色较好，细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆着色鲜艳，色彩丰富鲜艳，胞内结构清晰，染色效果好，是细胞病理学检查常用的方法，尤其是观察女性雌激素水平对阴道上皮细胞的影响。少数有部分细胞核偏红，核周有伊红着色较深处，与核分界不清的情况，并且染色时间长、操作繁琐。H-E染色透明度好，核浆对比鲜明，染液的渗透性强，适合液基细胞染色。

H-E染色不理想的弥补，如染色较浅，可分别进行苏木素及伊红复染;如用苏木素使涂片染色过深，后用盐酸酒精处理，可以去除过多的染色，随时用显微镜观察涂片，直到背景干净、至满意为止。

［1]张赛霞，张立群.几种血涂片染色方法比较［J].实用医技杂志，2007，3(14)7.

［2]栗艳玲，朱东新，等.液基细胞学及TBS诊断报告系统［J].中外医学研究，2010，(8)：190.