免疫测定血清脂蛋白(a)与临床意义

杨金新

免疫测定血清脂蛋白(a)与临床意义

杨金新

目的 探讨免疫测定血清脂蛋白(a)的方法与临床意义。方法 对临床120例冠心病疾病患者的血清Lp(a)行免疫测定及临床意义。结果 通常以300 mg/L为分界。高于此水平者冠心病危险性明显增高。结论 将Lp(a)值在300 mg/L以上定为病理性增高。Lp(a)可作为动脉硬化性心脑血管疾病的独立危险因素指标。此外，Lp(a)增高还可见于各种急性时相反应、肾病综合征、糖尿病肾病、妊娠和服用生长激素等。

血清脂;免疫测定;临床意义

血清脂蛋白(a)［Lp(a)］是一种大分子糖蛋白，由于其载脂蛋白［Apo(a)］中唾液酸含量很高，故也是一种急性期反应物质，并在急性反应中起重要作用［1］。Lp(a)是致冠心病的一个独立危险因素;Lp(a)测定在早期诊断和预防糖尿病并发冠心病中有一定应用价值

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取临床2010年收治的患者120例，男85例，女35例，年龄40～80岁，冠心病52例，糖尿病肾病患者28例，脂肪肝22例，其他炎症18例。均空腹采血2 d内检测，采取McAb ELISA测定法。

1.2 试剂 包被缓冲液:0.02 mol/L碳酸盐缓冲液，PH9.5;包被抗体与酶标抗体:用McAb混合液，以硫酸铵沉淀法制备抗tapo(a)-IgG，部分作包被用，部分以过碘酸盐法交联辣根过氧化物酶(RZ≥3)得酶标抗体，-20℃保存可稳定数月;稀释/封闭液:pH7.4缓冲液含磷酸盐0.01 mol/L及氯化钠0.15 mol/L，临用前取适量缓冲液，加入适量小牛血清及吐温-20;底物溶液0.lmol/L柠檬酸及0.2 mol/LNa2HPO4缓冲液，pH5.0，临用前每100 m l缓冲液中加人邻苯二胺0.1 g及30%H2O20.1 ml;终止液2 mol/LH2SO4;洗涤液0.15 mol/L NaCl，每升含吐温一 20 0.5 m l。

1.3 操作 包被，聚苯乙烯板，96孔。抗apo(a)-IgG用包被液稀释成10以/m l浓度，每孔加150μl，4℃过夜。包被后的小孔用洗涤液洗3次，每次5 min。每孔中加入封闭液0.15 ml，37℃放置30 min后，再用洗涤液洗3次。校准血清1∶200稀释起，用稀释液倍比稀释8管，作校准曲线用。血清标本1∶500稀释，吸光度过低或过高的标本可稀释成1∶100或1∶2000后复查。

2 结果

正常人Lp(a)数据呈明确偏态分布。80%的正常人＜200 mg/L，个别人可高达l000 mg/L以上。通常以300 mg/L为分界线，高于此水平者表明冠心病危险性明显增高。动脉粥样硬化患者为31/52占59.6%，糖尿病肾病患者17/28占60%，脑血管病12/22占54%。

3 讨论

Lp(a)主要在肝脏合成后分泌入血，血浆Lp(a)浓度主要取决于Lp(a)的合成速率，而与分解速率基本无关;人群中Lp(a)浓度个体差异极大，浓度范围可在0～1000 ml/L，这种差异最主要由ApoA基因位点决定。在个体中Lp(a)的血浆浓度相当稳定，这主要由遗传因素决定，几乎不受年龄、性别、血脂、饮食等影响，但有报道认为绝经后女性的Lp(a)浓度较绝经前升高［2］。

Lp(a)测定标准化研究极为困难，但临床实验室又迫切需要有一种可靠的参考血清(二级标准)，使不同分析系统及世界各地实验室测得的数据比较接近或有可比性。由于Lp(a)分子高度异构，要使参考血清组成与一切患者的标本一致是不可能的，但不能不提出一份参考血清作为国际标准化的基础，一般主张选用apo(a)分子大小适中、TG正常的血清。Lp(a)水平主要决定于遗传因素，家族性高LP(a)与冠心病发病倾向相关。男、女之间与不同年龄组间无明显差异，环境、饮食与药物对Lp(a)水平的影响也不明显，降胆固醇药洛伐他汀不会使Lp(a)下降，吸烟也无影响，但严重肝病时Lp(a)水平下降［3］，急性时期反应(如急性心肌梗死、外科手术、急性风湿性关节炎)则上升。现在将高LP(a)水平看作动脉粥样硬化性疾病(心、脑血管病，周围动脉硬化)的独立危险因素，因为它与高血压、吸烟、高 VLDL-C(高TC)、低HDL-C等因素无明显相关。但LDL-C较高时LP(a)的危险性就更高。在动脉粥样硬化病变形成中，LP(a)与 ApoB起协同作用。冠状动脉搭桥手术者，高LP(a)易于引起血管再狭窄。因为Apo(a)与PMG在结构上有同源性，Apo(a)故可致血凝块(纤维蛋白)的溶解，促进动脉粥样硬化形成。

［1］赵永平.临床血脂学.长沙:湖南科学技术出版社，1997:64.

［2］王克勤.脂蛋白与动脉粥样硬化，北京:人民卫生出版社，1995:180-183.

［3］姜春义，吕国良.脂蛋白(a)检测及其临床意义心血管康复医学杂志，2000，9(2):87-88.

163001 黑龙江省大庆油田总医院