血清甘油三酯测定的临床应用

李雅楠

血清甘油三酯测定的临床应用

李雅楠

目前国内大医院多已采用酶法，由于酶试剂价格高，少数基层单位仍在应用化学法。血清TG水平可用于高脂蛋白血症的分类了解机体内TG代谢状况、早期识别动脉粥样硬化的危险性、高甘油三酯血症诊断、代谢综合征的诊断和降脂药治疗后的监测指标等。

甘油三酯;化学方法;酶法

全身98%以上的甘油三酯则是贮存在脂肪组织中，甘油三酯的主要生理功能是氧化供能。甘油三酯是CHD的一个独立危险因子。血清中甘油三酯的含量随年龄增长而有上升的趋势，尤其是体重超过标准的中年以上的人往往偏高。进食脂肪后，血清中甘油三酯上升，并可出现浑浊，显示乳糜微粒增多。现对临床甘油三酯的临床测定方法进行分析。

1 血清甘油三酯(TG)测定分类

1.1 化学法 用有机溶剂抽提标本中的TG，去除抽提液中的磷脂等干扰物后，用碱水解(皂化)TG，以过碘酸氧化甘油生成甲醛，然后用显色反应测定甲醛。这类方法中比较最准确的是用氯仿抽提，硅镁型吸附剂(如Flo-risil)吸附磷脂、皂化及氧化后用变色酸显色法。此法虽有抽提完全、去除磷脂与甘油、及变色酸显色灵敏度很高而且呈色稳定等优点，但因操作步骤繁多不适于日常工作中应用［1］。

1.2 酶法 早期是化学法结合酶法，80年代普及全酶法。用单一试剂的甘油磷酸氧化酶(GPO)法，指示反应同TC测定，QP用PAP试剂的Trinder反应。此法具有酶法的简速、微量、精密度高的优点，而且反应特异，易于达到终点，线性范围宽，试剂较稳定等多种特点。目前国内外试剂盒大都采用此法。

2 方法

2.1 变色酸显色法

2.1.1 试剂 抽提二氯甲烷(HPLC级，乙醇或甲醇为保存剂);生理盐水(0.9%W/V NaCl);硅酸:用去离子水洗3次，去除细颗粒，然后用甲醇洗2次，用布氏漏斗过滤，空气干燥。用煎放入65℃干燥箱至少72h，贮存在干燥器内。

2.1.2 皂化(TG水解成甘油及酸化) 0.25%KOH乙醇液:①制备5%KOH水溶液100m l;②5%KOH 5m l用无水乙醇(USP)稀释至l00m l，临用当天配制，用超声波去气泡。0.1mol/L H2SO4:浓H2SO46.0ml用蒸馏水稀释至1L。

2.1.3 自动分析仪用的试剂(氧化、还原、显色) 过碘酸钠，溶1.34窑NaIO4于IL蒸馏水中［2］。亚砷酸钠，溶11.25g NaOH于约100ml蒸馏水中，未冷却前加125g As2O3(Baker或Fisher分析试剂)，最后用蒸馏水稀释成250m l。

2.2 酶法

2.2.1 试剂 甘油三酯液体稳定酶试剂组成，GOODs缓冲液(pH 7．2)50mmol/L;脂蛋白脂酶 ≥4000U/L;甘油激酶≥40U/L;磷酸甘油氧化酶≥500U/L;过氧化物酶≥2000U/L;ATP 2.0mmol/L;硫酸镁 15mmol/L;4-AAP 0.4mmol/L;4-氯酚4.0mmol/L。

2.2.2 准确称取三油酸甘油酯 (平均相对分子质量:885．4)200mg加 TritonX-1005ml，用蒸馏水定容至100m l，分装后，4℃保存，切勿冰冻保存。

2.2.3 取3支试管混匀后，37℃水浴5min，用分光光度计于500nm波长处以空白管调零，测各管的吸光度。

3 临床意义

血清TG受生活习惯、饮食和年龄等多种因素影响，在个体内及个体间的波动较大。由于TG的半衰期短(5～15min)，进食高脂、高糖和高热量饮食后，TG可明显增高，且以乳糜微粒的形式存在，后者会使血浆变得浑浊，甚至呈乳糜样。因此，必须在禁食12～16h后静脉采集标本，以排除和减少饮食的影响［3］。甘油三酯增高:高TG血症也有原发的与继发的两类。前者多有遗传因素，其中包括家族性高TG血症与家族性混合型高脂(蛋白)血症等。继发的见于糖尿病、糖原累积病、甲状腺功能不足、肾病综合征、妊娠、口服避孕药、酗酒等，但不易分辨原发或继发。

4 讨论

正常人血清TG浓度平均约0．11mmoL/L，对于变动幅度较大的TG来说，由此引起的误差是可以忽略的，但有些标本中TG明显增高，以致影响对TG水平的判断。如TG高而血清不混浊者应排除高 TG的可能。酶法测定TG时，脂蛋白脂酶(LPL)除能水解TG外，还能水解甘油一酯和甘油二酯(血清中后两者约占总TG的3%)，亦被计算在TG中，实际上测定的是总甘油酯。酶法测定TG反应达终点时间37℃不应超过5min。试剂空白吸光度A500nm≤0．05。酶法测定TG干扰因素与胆固醇测定类同。胆红素＞100μmol/L或抗坏血酸＞170μmol/L出现负干扰。血红蛋白的干扰是复杂的。其本身的红色会引起正干扰。溶血后，红细胞中的磷酸酶可水解磷酸甘油产生负干扰。当Hb＜l g/L时反映为负干扰，＞1g/L反映出正干扰，但Hb≤2g/L时干扰不显著，明显溶血标本不宜做TG测定。

［1］ 吴德祥．微波法快速检测甲种胎儿球蛋白．陕西医学检验，1993，8(4):224.

［2］ 梅永焕．用DG3022型酶标仪甘油三酯酶法测定．临检杂志，1989，7(4):223.

［3］ 钱士匀．临床生物化学和生物化学检验实验指导．第2版．北京:人民卫生出版社，2003:205.

163001黑龙江省大庆油田总医院