科技进展

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巴西圣保罗州感染猪圆环病毒2型猪群的流产胎猪中检测到基因型2a和2b的猪圆环病毒

猪圆环病毒2型 （PCV2）与许多复杂疾病相关，其中包括繁殖障碍。这个研究的目的是鉴别巴西圣保罗州繁殖障碍猪的PCV2亚型，调查与其它传染性病原共感染的情况。

巴西圣保罗州5个商品猪饲养场168个流产胎猪和木乃伊胎用聚合酶链式反应 （PCR）检测出感染了PCV2。阳性样品再用PCR检测细小病毒 （PPV）、钩端螺旋体和布鲁氏菌病。PCV2在18个样品中被检测到 （检出率为10.7%）。分别检测到2、10、和0个样品为猪细小病毒 （PPV）、布氏杆菌和钩端螺旋体阳性。对11个PCV2株测序判定是2a型 （n= 1）的还是2b型 （n=10）的。

这个研究结果表明巴西圣保罗州流产的胎猪中PCV2的感染频率相当低 （10.7%），PCV2与其它病原共感染导致繁殖障碍非常普遍。PCV2衣壳蛋白氨基酸修饰特征与母猪流产相关。 （王蕾 编译，译自 《斯堪的纳维亚兽医学报》）

译自：Castro AM，Cruz TF，Salgado VR，et al.Detection of porcine circovirus genotypes 2a and 2b in aborted foetuses from infected swine herds in the State of Sao Paulo,Brazil.Acta Vet Scand，2012 May 3.[Epub ahead of print]

在中国分离的猪流行性腹泻病毒的膜蛋白基因多样性

2010年年底，猪流行性腹泻病毒 （PEDV）重新出现在免疫猪群，给中国河北省的养猪业造成巨大经济损失。七株猪流行性腹泻病毒从患有严重腹泻病的仔猪粪便中分离出来。

七株猪流行性腹泻病毒的M基因包含681个核苷酸的开放阅读框，编码含226个氨基酸的蛋白质。分离的七株流行性腹泻病毒株核苷酸序列一致性达到99.4%～99.9%，氨基酸序列一致性达到98.2%～99.1%。当与其它中国和国外分离的毒株比较，这七株病毒与泰国分离株M-NIAH1005具有很高的核苷酸一致性 （99.6%～99.9%），与韩国分离株PFF188的核苷酸具有99.7%～100%一致性，但是与其它中国分离的毒株的核苷酸具有较低一致性 （96.6%～99.1%），与中国所用的疫苗株CV777的核苷酸一致性有97.8%～98.2%。系统发育分析表明所有七株病毒可分到同一群。虽然CV777也被分在相同的群中，但是它们属于不同的亚群。这些结果表明，这七株病毒在系统发育上是密切联系的，与韩国株PFF188和泰国株M_NIAH1005关系更近。这七株病毒与其它中国株和疫苗株CV777基因是不同的。因此，中国有待于筛选更有效的疫苗株，以防控猪流行性腹泻病。 （王蕾 编译，译自 《病毒基因》杂志）

译自：Fan JH，Zuo YZ，Li JH，et al.Heterogeneity in membrane protein genes of porcine epidemic diarrhea viruses isolated in China.Virus Genes，2012 May 15.[Epub ahead of print]

美国北部地区猪弓形虫病高发

食入未煮熟的含有弓形虫的猪肉是弓形虫传播的重要途径。在过去的20年，美国采用封闭饲养模式生产的猪肉弓形虫的感染率降低了，然而户外养殖猪的感染率比较高。消费者需求 “有机产品”、 “人道主义”和 “自由”已导致越来越多的猪饲养在户外。为了确定这些有机方式饲养的猪的弓形虫感染率，本研究对密歇根州两个猪场用有机方式饲养的猪的弓形虫的流行情况进行调查 （猪场1和猪场2）。上述两个猪场的33只猪在屠宰时采集血清和组织样品用于弓形虫检测。

采用酶联免疫吸附试验 （ELISA）和改良凝集试验（MAT）进行血清学检测。33个样品中30个样品的弓形虫的抗体通过MAT滴度检测出，3个1︰25、6个1︰50、7个1︰100、13个1︰200、1个1︰400。所有这33只猪的心脏组织接种小鼠进行弓形虫的生物检测。从17只猪中分离出弓形虫，其中包括一个血清学检测阴性猪 （ELISA和MAT检测均为阴性）。对17株弓形虫中的16株进行了基因分型，用SAG1、SAG2、SAG3、 BTUB、GRA6、c22-8、 c29-2、L358、PK1和Apico位点发现猪场1的弓形虫为克隆Ⅱ型，猪场2的弓形虫为克隆Ⅲ型。

这个结果第一次揭示了在美国，用有机方式饲养的猪弓形虫的流行率很高，表明消费有机猪肉产品会增加患弓形虫病的风险。 （王蕾 编译，译自 《兽医寄生虫学》杂志）

译自：Dubey JP，Hill DE，Rozeboom DW，et al.High prevalence and genotypes of Toxoplasma gondii isolated from organic pigs in northern USA.Vet Parasitol，2012 Mar 15.[Epub ahead of print]

评估一个反向遗传学方法构建的转基因口蹄疫病毒疫苗

口蹄疫 （FMD）是一种高度接触性传染病。控制疫病主要靠大规模的灭活苗免疫。近几年，一系列的O型口蹄疫在中国暴发 （包括中国台北和中国香港），给中国畜牧业构成了巨大威胁。其病原体——0型口蹄疫病毒，已演变成三个拓扑型 [东-南亚拓扑型 （ME-SA）、东南亚拓扑型 （SEA）、中国拓扑型 （CHY）]。中国的FMD疫苗对ME-SA和SEA型的病毒可起到很好的免疫保护作用，但是对一些变异的CHY型病毒不能产生足够的保护作用。

本研究构建了一个FMDV疫苗株全长cDNA感染性克隆，转基因病毒是在已经建立的感染性克隆的基础上在抗原位点1、3和4进行了一些氨基酸替换。重组病毒具有与野生病毒O/HN/CHA/93相似的生长特性。 所有免疫灭活苗（O/HN/CHA/93毒株）的猪28天后，用ME-SA和SEA型病毒攻毒，全部得到保护，而对于CHA型病毒的攻毒只有部分保护作用。而用转基因疫苗免疫猪可以产生对这三种病毒的保护作用。

FMDV疫苗毒株一些氨基酸替换对于体外病毒复制没有影响。用反向遗传学构建的转基因口蹄疫病毒与野生毒株O/HN/CHA/93相比大大提高了对CHA型变异病毒的保护效果。FMDV全长cDNA克隆可用于开发口蹄疫病毒基因工程疫苗。 （王蕾 编译，译自《英国医学委员会兽医研究》杂志）

译自：Li P，Bai X，Sun P，Li D，et al.Evaluation of a geneticallymodified foot-and-mouth disease virus vaccine candidate generated by reverse genetics.BMC Vet Res，8（1）：57. [Epub ahead of print]

法国林业工人和野猪具有很高的戊型肝炎病毒血清流行率

戊型肝炎病毒 （HEV）是经粪口传播的病原。在工业发达国家，HEV感染的地方案例越来越多。更多的事实揭示了HEV是一个动物传染病，接触猪的人是HEV感染的高危人群。这个实验的目的是检测法国野猪HEV流行率以及林业工人是否具有更高的HEV感染率。

对比三个不同的HEV抗体检测试验的有效性。用最敏感的试验用于调查593个林业工人和421头野猪的HEV血清流行率。林业工人的HEV抗体阳性率为31%，野猪抗体阳性率为14%。人的HEV的抗体阳性率与年龄、所处地理位置和职业的活动性相关，野猪的HEV抗体阳性率则与地理位置相关。 （王蕾 编译，译自 《临床微生物学》杂志）

译自：Carpentier A,Chaussade H,Rigaud E,et al.High HEV seroprevalence in forestry workers and in wild boars in France.Clin Microbiol，2012 Jun 20.[Epub ahead of print]

屎肠球菌菌株NCIMB 10415显示对感染鼠伤寒沙门氏菌的断奶仔猪无益处

在欧洲鼠伤寒沙门氏菌是爆发沙门氏菌病的主要致病菌。该研究拟研究益生菌屎肠球菌NCIMB 10415能否预防或缓解沙门氏菌病。32头仔猪断奶后10天用鼠伤寒沙门氏菌进行攻毒试验，其中16头用屎肠球菌进行治疗，16头用作对照。检测了粪便和部分器官中的沙门氏菌及免疫应答情况。与对照组相比，用接受屎肠球菌处理猪的体重较轻 （P=0.05）。屎肠球菌对攻毒后猪粪便中的沙门氏菌无影响，但增加了扁桃体中致病菌的丰度。仔猪用沙门氏菌攻毒后，淋巴结、不同肠道片段 （空肠、回盲肠）的肠道集合淋巴结，回盲乳头及血液中的特异性 （抗沙门氏菌IgG）和非特异性 （结合珠蛋白）体液免疫反应和细胞免疫反应 （T辅助细胞，细胞毒性T细胞，调控性T细胞，γδT细胞和B细胞）受到了影响 （P＜0.05），但屎肠球菌对这些指标没有影响。这些结果表明，屎肠球菌对感染沙门氏菌仔猪的生产性能无影响。可见，将屎肠球菌用作猪的益生菌有待进一步研究。 （彭华 编译，译自《应用与环境微生物学》杂志）

译自：Kreuzer S,Janczyk P,Aβmus J,et al.Enterococcus faecium NCIMB 10415 shows no beneficiary effects in weaned pigs infected with Salmonella enterica serovar Typhimurium DT 104.Applied and Environmental Microbiology,2012[Published ahead of print].

罗伊乳杆菌NCIMB 30253用作益生菌的体内外试验鉴别和安全性评价

罗伊乳杆菌NCIMB 30253被证实具有减少炎性因子IL-8的益生潜能。用体内外试验检测了其对人类的安全性。用代谢轮廓分析和16S rRNA基因测序对这株菌进行了鉴别，用分子和代谢技术进行体外试验对其安全性进行了评价。通过估计其在抗生素平板上的最小抑菌浓度 （MIC）的遗传分析表明这株菌对8种检测的抗生素敏感。对这株菌产生的有害物质和抗菌成分进行分析表明，此菌不会产生生物胺类物质，也不会产生细菌素活性。用正常的大鼠进行连续28天的投喂试验支持体外试验结果，即此菌是安全的。与对照组相比，口服该菌的大鼠身体状况无变化，生化及血液安全指标也无明显的临床变化。可见罗伊乳杆菌NCIMB 30253用作益生菌是安全的。 （彭华 编译，译自 《加拿大微生物学杂志》）

译自：Sulemankhil I,Parent M,Jones ML,et al.In vitro and in vivo characterization and strain safety of Lactobacillus reuteri NCIMB 30253 for probiotic applications.Canadian Journal ofMicrobiology,2012,58：776-787.