9种杀菌剂对刺槐心材腐朽菌的室内毒力测定

祁金玉，高国平，信雯，王月

(沈阳农业大学，辽宁沈阳 110866)

刺槐Robinia pseudoacacia因具有速生性和用途多样性被许多国家广泛引种栽培，与桉树、杨树一起被称为世界上引种最为成功的三大树种之一。当前刺槐在中国已经乡土化，而且形成很多地方类型，是非常重要的城市绿化树种;但是近年来在辽宁沈阳棋盘山等地区发现刺槐心材腐朽病造成树木死亡或风折后死亡［1］。

刺槐心材腐朽病由槐生多年卧孔菌Perenniporia robiniophila(Murr.)Ryv.引起，属于卧孔菌属真菌。在我国卧孔菌有11种，南、北方均有分布。寄生在活立木上的卧孔菌多为多年生，长在树干基部，也寄生在倒木和枯立木上，造成针叶树和阔叶树白色腐朽病［2］。槐生多年卧孔菌以前仅作为一种腐生菌在国内的分布加以报道，且描述简单［3－4］。戴玉成等［1］首次将槐生多年卧孔菌确定为树木病原菌，并描述其形态特征—子实体、菌丝结构、菌肉、孢子的大小，形态、颜色，卧孔菌发病的症状。

由于刺槐心材腐朽病防治的研究国内外还没有切实可行防治措施的报道，本试验使用9种杀菌剂对刺槐心材腐朽菌进行毒力测定，以期为防治的药剂选择提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料 2008年10月在沈阳市棋盘山风景区人工刺槐纯林30～40年生病株上采集新鲜子实体，通过分离纯化、鉴定得到槐生多年卧孔菌［5］。

采用的以下9种药剂应用普遍，除退菌特毒性中等，其它均为低毒。

70%甲基硫菌灵可湿性粉剂(WP)，保定农药厂;80%代森锌WP，沈阳丰收农药有限公司;75%百菌清WP，四川省广汉市利邦生化厂;50%多菌灵WP，山东德州大成农药有限公司;50%退菌特WP，天津市捷康化学品有限公司;77%可杀德WP，美国杜邦公司;15%三唑酮WP，四川国光农化有限公司;45%石硫合剂结晶粉，宜宾川安高科农药有限公司;70%代森锰锌WP，利民化工有限公司。

1.2 方法

1.2.1 药剂的初步筛选 采用室内菌丝生长速率法测定。在无菌条件下，把9种药剂分别配成不同的药剂浓度PDA培养基。将菌饼接于含药剂培养基中央，置于25℃恒温箱中培养，加入清水培养基作为对照，每处理5次重复。培养3 d后采用生长速率法测量菌落直径。连续4 d测量菌落直径，然后根据5次重复的结果，算出各处理菌丝生长的平均直径［6－8］。根据测得的数据算出相对抑制率。

1.2.2 对初筛药剂的毒力测定 在药剂初步筛选的基础上，用菌丝生长速率法进行测定。

根据测得的数据算出相对抑制率，求出毒力方程及其相关系数R值，y为相对抑制率对应的机率值，x为浓度对数值。利用毒力方程求出抑制中浓度EC50。

2 结果与分析

2.1 药剂的初步筛选 9种药剂中，三唑酮、代森锰锌、代森锌抑菌作用明显。15%三唑酮的抑制作用最明显，在10 000倍液时，菌丝仍无法生长。70%代森锰锌在5 000倍液时平均抑菌率为100%，8 000倍液时平均抑菌率为97.29%。80%代森锌在3 000倍液时平均抑菌率为100%，5 000倍液时平均抑菌率为93.79%。其他6种药剂对病原菌也有一定抑制作用，但效果不明显。其中多菌灵对病原菌的抑制作用最差，50倍液时平均抑菌率仅为42.65%。其他4种药剂50倍液时抑菌率在82%～97%之间。

2.2 初筛药剂的毒力测定 已筛选的3种药剂抑制作用测定结果见表1。三唑酮在20 000～40 000倍液时菌落不生长，抑菌率为100%，50 000倍液平均抑菌率为99.01%;代森锰锌7 000倍液平均抑菌率为99.16%，其后随着倍数的增加，抑菌率下降;代森锌4 000倍液平均抑菌率为99.23%，随着药剂倍数的增加，抑菌效果下降。

表1 3种药剂对槐生多年卧孔菌抑制作用的测定结果

对表1进行回归统计分析，以平均菌落直径为基础数据，拟合出各药剂浓度对数值(x)与抑菌率几率值(y)的毒力回归方程(表2)。根据毒力回归方程算得3种药剂的抑制中浓度EC50。15%三唑酮的EC50最小，为2.8 mg/L，80%代森锌EC50最大，为62.7 mg/L。

表2 不同杀菌剂对槐生多年卧孔菌的毒力方程

综合抑制率和抑制中浓度分析，3种药剂中15%三唑酮对病原菌的抑菌效果最好，平均抑菌率达到99%，且用药量最小，说明槐生多年卧孔菌对三唑酮最敏感，其次代森锰锌。

3 结论与讨论

经对9种药剂室内毒力的初步筛选，三唑酮、代森锰锌和代森锌对槐生多年卧孔菌相对防效较好;进一步试验证明，15%三唑酮对刺槐心材腐朽菌的抑制效果较好，40 000倍液平均抑菌率还为100%，EC50为2.8 mg/L;其次是70%代森锰锌，7 000倍液平均抑菌率为99.16%，EC50为42.21 mg/L。

刺槐心材腐朽病的防治，国内外还没有切实可行的防治措施的报道。及早清除受害木上的子实体是减少病害进一步扩展的途径之一。另外，在有条件的地区及时清除受害木也是减少病害扩展的有效方法。本研究只是针对刺槐心材腐朽菌作为活立木病原菌进行室内药物防治试验，室外防治时药剂的施用时期、施用方式、气候、环境条件以及树木自身的耐药性等因素都会影响药剂的使用和药效的发挥，所以野外施用的效果，还有待于野外进一步验证。

［1］ 戴玉成，高强．刺槐心材腐朽病初报［J］．东北林业大学学报，2005，33(1):88 －90．

［2］ Allen E A．，Morrison D J，Wallis G W．Common tree diseases of British Columbia［M］．Canadian Forest Service，1996:1 －48．

［3］ 戴玉成，秦国夫，徐梅卿．中国东北地区的立木腐朽菌［J］．林业科学研究，2000，13(1):15 －22．

［4］ Zhao J D，Zhang X Q．The Polyporus of China［J］．Bibl Mycol，1992，145:510 －524．

［5］ 高国平，信雯，郑雅楠，等．刺槐心材腐朽菌鉴定及生物学特性研究［J］．东北林业大学学报，2010，38(8):60 －62．

［6］ 任小杰．草莓炭疽病病原鉴定、生物学特性及药剂毒力测定［D］．浙江扬州:扬州大学，2007:27 －28．

［7］ 张勇，李晓军，曲健禄，等．扁桃流胶病病原鉴定及药剂毒力研究［J］．山东农业科学，2008(1):74－77．

［8］ 李赤，于莉，陈永钦，等．9种杀菌剂对香蕉枯萎病菌的室内毒力测定［J］．中国南方果树，2008，37(2):44 －45．