运输温度对酶免试剂质量影响分析

梁俊杰 肖玮 刘乐霞 赵国宏 冯丽娜 张燕

国产酶免试剂的有效期为12个月，是指储存在温度为2～8℃情况下，若超出此温度范围，会影响酶免试剂应用质量，有效期会发生变化［1］。酶免试剂在生产后运输过程中，运输温度往往达不到2～8℃要求。我们模拟夏秋高温及冬季寒冷天气下试剂运输过程，监测试剂在各储存阶段的质量变化，确定运输温度对试剂有效期的影响，避免血液检验过程中使用不合格试剂。

1 材料与方法

1.1 材料 血站在10月份购进乙肝试剂B，批批检合格，试剂进站时温度在2～8℃内，进货抽检合格。

1.2 试剂与设备 康彻思坦生物有限公司提供0.2 U/ml HB-sAg弱阳性质控血清;购买成品重蒸馏水。各试剂均经批批检合格，并在有效期内。爱康全自动酶免分析仪(深圳市爱康电子有限公司，Uranus AE90)，经强检的外显式电子温度计(JM624U型)。

1.3 方法 取5盒乙肝试剂B在2～8℃(2～8℃冰箱冷藏室)存放3 d，作为对照组;另取5盒乙肝试剂B在(24±2)℃［空调控制室温(24±2)℃］存放3 d，作为实验组1;取5盒乙肝试剂B在－6～0℃(－6～0℃冰箱冷冻室)存放3 d，作为实验组2。然后将3组试剂放于2～8℃冰箱冷藏，并在冷藏的第0、1、2、3、4……个月用同批号 0.2 U/ml HBsAg 弱阳性质控血清检测两种试剂，分别做20孔，计算原始均值、变异系数CV做至有效期末，分析实验组与对照组试剂质量差别。

1.4 统计学分析应用SPSS 10.0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，每组内数据采用F检验及S-N-K法计算，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

通过对比实验组与对照组检测数值，发现各组试剂在各储存阶段检测结果均符合试剂说明书实验有效性最低要求，弱阳性质控品原始均值与临界值比值均大于1，变异系数CV均小于15%，但组间比较:实验组1试剂在6、7月时，实验组2试剂在5～7月时，弱阳性质控品检测原始均值明显降低(图1)，与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);组内比较:对照组0～7个月间数据无差异，实验组1后2个月、实验组2后3个月检测数据与0月比较差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 2组试剂检测结果x¯±s

3 讨论

图1 3组试剂检测结果趋势图

通过对比实验组与对照组的检测数据，发现2组试剂在冷藏冰箱保存的初期检测结果无差别，但随储存时间延长，在接近试剂保存有效期末时，实验组试剂检测能力明显下降，试剂有效期缩短，使用此时的酶免试剂容易漏检弱阳标本。

《血站技术操作规程(2012版)》明确规定:试剂运送途中的温度必须符合试剂说明书要求，供应商必须提供试剂运输冷链监控温度记录［2］。可见，酶免试剂运输的冷链控制尤其重要，试剂在经过运输到达用户手中时，实际的质量可能会有不同程度的变化［3］，试剂盒有效期也会发生改变。若运输温度过高会使酶蛋白变性、活性降低，试剂灵敏度降低，显色剂中的双氧水溶液分解，使显色偏低;运输温度过低，试剂冻结，也会造成酶活性、抗原抗体活性降低，影响试剂的质量，运输温度过高或过低，均会使试剂有效期缩短［1］。

影响酶免试剂运输温度的主要因素是内包装箱保温性能及包装箱内冰排放置数量及放置方式。内包装箱的保温性能与箱体厚度及其导热系数(λ)相关，箱体越厚、导热系数越低，保温性能越好，但箱体太厚会使包装箱比较笨重，不易搬移，选取厚85 mm的聚氨酯泡沫作内包装内箱较为合适［4］。包装箱内放置冰排数量和方式对试剂运输温度影响也较大，目前大多数试剂厂家将5个冰排竖直并排放于靠近箱体中心处试剂盒之间，冰排与试剂盒之间及无隔离措施，炎热季节时，运输温度控制在2～8℃ 的时间短，冰排融化易造成靠近冰排的试剂盒受潮，试剂盒之间空气流通不畅，远离冰排试剂盒温度相对较高，冬季气温较低时，靠近冰排的试剂盒温度过低;9月份我们对一批经3 d运输到达血站的酶免试剂温度进行检测:两冰排之间为15.3℃，包装箱内试剂盒温度分别为16.7℃(靠近冰排)、20.5℃(离冰排较远)，温度明显高于8℃。我们建议试剂供货方改变包装箱内冰排放置方式并适当增加冰排数量，可按内包装箱容积大小，沿内箱周边箱壁单层竖直放置合适数量冰排，冰排与试剂盒之间用隔温泡沫隔开，避免冰排与试剂盒直接接触，靠近冰排的试剂盒不会温度过低或受潮，试剂盒之间用隔温泡沫断续隔开，包装箱内空气充分流通，使每盒试剂均能较长时间维持2～8℃。

因此，试剂供货方应选用合适的包装材料、合适的冷链包装方式，确保试剂运输温度控制在2～8℃内。血站在采购酶免试剂时，一定要考虑运输温度对试剂质量的影响，可适当扩大库存，减少或避免炎热季节进货，不在节假日前采购，防止试剂因节假日在运输中途滞留，不使用接近有效期的试剂，同时与试剂供货商积极沟通，可要求其在试剂包装运输时放置一纽扣式温度记录仪，记录运输过程中试剂温度，使用户能了解整个运输过程中试剂冷链情况，避免运输过程处于失控状态，确保血液检测使用合格的酶免试剂，确保血液安全。

1 邢培青，刘玉振主编.实用输血检验.第1版.郑州:郑州大学出版社，2001.116.

2 高东英.采供血机构体外免疫诊断试剂评价系统的初步探讨.中国输血杂志，1999，16:56-57.

3 卫生部医政司.《血站技术操作规程(2012版)》6.3.9检验试剂质量检查.卫医政发〔2012〕1号附件.

4 吴太虎，石梅生，刘恩贵，等.S99-野战运血箱热传导仿真分析.医疗卫生装备，2001，4:11-12.52.