灯台叶碱抗炎镇痛作用研究

杨坤芬， 赵云丽， 尚建华

(云南省药物研究所， 云南 昆明 650111)

灯台叶为云南特色天然民族药，其粗提物制剂“灯台叶颗粒”和“灯台叶片”已上市使用多年，安全性和有效性均得到临床验证。灯台叶碱，是从灯台叶中提取分离的有效部位，具有止咳平喘、清热解毒的功效，用于急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作期(风热袭肺证)，症见咳嗽、咯痰、发热、咽痒不适、恶风、气急、头痛、口渴、尿黄。本文主要考察灯台叶碱的抗炎、镇痛作用，并与市售“灯台叶片”进行比较，为深度开发的必要性和临床应用提供实验依据。

1 材料

1.1 药品与试剂 灯台叶碱，棕黄色粉末，水中混悬，常温密闭保存，批号20070512(含量53.58%)，由中科院昆明植物研究所和云南省药物研究共同研制提供；灯台叶片，国药准字Z20025348，0.3 g/片，云南大唐汉方制药有限公司，批号060803；阿斯匹林肠溶片(拜阿斯匹灵、ASP)，进口药品注册证号H20050059，100mg/片，Bayer Health Care AG生产，批号BTA4RE2；醋酸泼尼松片，国药准字H33021207，5 mg/片，浙江仙居制药股份有限公司，批号061112；冰醋酸，分析纯，天津市化学试剂三厂，批号20030908；二甲苯，分析纯，天津市致远化学试剂有限公司，批号2006-10-15；羧甲基纤维素钠，化学纯，国药集团化学试剂有限公司，批号F20040826；鸡蛋清，取自农户家产3日内的鲜蛋。

1.2 主要仪器 AL104型电子分析天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；JJ2000电子天平，常熟市双杰测试仪器厂；PV-200型足趾容积测量仪，成都泰盟科技有限公司；101型电热鼓风干燥箱，北京仪器有限公司。

1.3 动物 SPF级ICR小鼠，雌雄兼用，体重19～24 g；SPF级雄性SD大鼠，体重170～240 g；动物生产许可证：SCXK(滇)2005-0008，饲料生产许可证：SCXK(滇)2005-000 9；均由昆明医学院实验动物中心提供。

透明塑料盒群养，雌雄分笼，小鼠每箱≤10只，大鼠每箱≤6只；饲养于IVC动物实验室，温度20～25 ℃(日温差≤3 ℃)；湿度40%～70%；照明12 h：12 h明暗交替，照度150～300lx；噪音≤60dB。实验动物使用许可证号：SYXK(滇)2005-0001。每日喂饲鼠用配合饲料，自由饮水，视情况更换笼具和垫料；

2 方法与结果

2.1 抗炎作用研究

2.1.1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响[1]选用19～22 g小鼠70只，雌雄各半，按体重和性别随机分为7组，每组10只。除阿斯匹林组仅于实验当天灌胃给药1次外，其余各组均预先每日灌胃给药1次，连续3天，对照组灌服等容量1%CMC-Na，各组灌胃容积均为20 mL/kg.bw。末次灌胃后30 min，各组小鼠于右耳两面均匀涂抹二甲苯0.05 mL/只，左耳不涂为对照。致炎后1 h脱颈椎处死动物，用直径8 mm的打孔器于双耳同部位等面积切下，以两耳片重量之差作为肿胀度。结果见表1。

表1 灯台叶碱对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

由表1可见，阿司匹林、灯台叶片及灯台叶碱10、20、40、80 mg/kg剂量连续灌胃给药3 d，均能明显抑制二甲苯致小鼠的耳廓肿胀，与对照组相比差异非常显著；灯台叶碱10、20 mg/kg剂量的作用与1.2 g/kg的灯台叶片相当，40、80 mg/kg的作用又与0.2 g/kg阿司匹林相当，均强于1.2 g/kg的灯台叶片。

2.1.2 对蛋清致大鼠足跖肿胀的影响[1]取170～220 g雄性SD大鼠70只，按体重随机分为7组，每组10只，给药方法同2.1.1，给药容积为10 mL/kg.bw。末次给药后30 min，于每鼠右后足跖皮下注射新鲜蛋清0.1 mL致炎。分别测定致炎前及致炎后0.5、1、2、3、4 h的足容积，以致炎前后足容积的差值作为肿胀度，并计算肿胀率。结果见表2。

肿胀率=(给药后足容积-给药前足容积)÷给药前足容积

表2 灯台叶碱对蛋清致大鼠足跖肿胀的影响(n=10)

由表2可见，阿司匹林、灯台叶片及灯台叶碱以30、60、120 mg/kg的剂量连续灌胃给药3天，均能明显抑制蛋清所致大鼠的足跖肿胀；30 mg/kg剂量的灯台叶碱作用持续时间比灯台叶片长，但短于阿司匹林组。

2.1.3 对大鼠棉球肉芽肿的影响[1]取180～240 g雄性SD大鼠70只，按体重随机分为7组，每组10只。各鼠于消毒条件下在左右后肢蹊部皮下各植入(20.0±1.0)mg灭菌棉球1个(植入前加青霉素和链霉素混合液0.2 mL浸润、60℃烘干)，手术当日各组动物开始按剂量灌胃给药，每日1次，连续10天。第11日禁食不禁水12 h后称重，脱颈椎处死大鼠，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，于60 ℃烘箱内干燥24 h后称重，减去棉球重量即为肉芽净重；按体重折算成肉芽系数(每100 g体重所占的肉芽肿重量)，并与对照组比较各给药组对棉球肉芽肿的抑制率。结果见表3。

抑制率=(对照组肉芽系数-给药组肉芽系数)÷对照组肉芽系数×100%

表3 灯台叶碱对大鼠棉球肉芽肿的影响(n=10)

由表3可见，醋酸泼尼松、灯台叶片及灯台叶碱以15、30、60、120 mg/kg的剂量连续灌胃给药10 d，均能明显抑制大鼠皮下棉球肉芽肿的生成，各组间抑制率无明显差异。

2.2 对醋酸致小鼠扭体性疼痛的影响[1]选用20～24 g ICR小鼠70只，雌雄各半，按性别和体重随机分为7组，每组10只。各组动物分别按剂量灌胃给药1次，对照组灌服等容量1%CMC-Na，容积均为20 mL/kg体重。给药后30min，每鼠腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.1 mL/10 g体重，观察并记录15 min内各鼠因疼痛引起的扭体次数，计算抑制率。为消除系统误差，实验采用平行操作。结果见表4。

表4 灯台叶碱对醋酸致小鼠疼痛的影响

由表4可见，灯台叶碱以10、20、40及80 mg/kg的剂量单次灌胃给药，能不同程度抑制醋酸所致小鼠的扭体性疼痛，10 mg/kg 剂量有作用趋势，其余3剂量组与对照组相比差异均有统计学意义；3剂量组的作用强度与0.2 g/kg阿司匹林相当；1.2 g/kg的灯台叶片无抑制作用。

3 讨论

急性支气管炎通常是由病毒或细菌感染引起的气管-支气管黏膜炎症，而慢性支气管炎是由于感染或非感染因素引起气管、支气管黏膜及其周围组织的慢性非特异性炎症。本研究围绕灯台叶碱的临床适应症，选择多种动物实验模型，观察灯台叶碱对镇痛及抗炎作用的影响。结果表明，灯台叶碱能明显抑制醋酸所致小鼠的扭体性疼痛，明显抑制二甲苯致小鼠耳廓炎症和蛋清所致大鼠足趾肿胀，并对大鼠棉球肉芽肿有明显抑制作用。提示灯台叶碱提具有镇痛、抗炎作用，可能对感冒和支气管炎引起的疼痛、继发性感染的炎症有预防或治疗作用。研究结果为灯台叶碱的临床应用提供了实验依据。

[1]陈奇.中药药理实验方法[M].北京：人民卫生出版社，1994：308～378.