LCT配合血小板的输注对HLA抗体的影响

张伟东，夏文杰，张晓梅，黄 爽

(广州血液中心，广东 广州 510095)

LCT配合血小板的输注对HLA抗体的影响

张伟东，夏文杰，张晓梅，黄 爽

(广州血液中心，广东 广州 510095)

目的了解随机血小板输注无效患者输注淋巴细胞毒实验(Lymphocyte cytotoxicity test,LCT)配合血小板后，其人类组织相容性抗原(Human leukocyte antigen，HLA)抗体的变化，探讨HLA抗体阳性患者的血小板有效输注方式。方法选取5例由于HLA抗体阳性引起的随机血小板输注无效，需长期输注LCT配合血小板的患者，以每输注LCT配合血小板5个治疗量为一间隔期，动态检测患者的HLA抗体强度和特异性。结果随着输入血小板数量的增加，5例患者的HLA抗体强度逐渐减弱，2例患者的HLA抗体特异性发生改变。结论LCT能够解决由于HLA抗体阳性引起的随机血小板输注无效，但随着输入抗原的改变HLA抗体的特异性亦会发生改变，产生新特异性的HLA抗体，建立HLA相合血小板供者库是最有效的解决方法。

淋巴细胞毒实验；HLA抗体；血小板输注

输注淋巴细胞毒实验 (Lymphocyte cytotoxicity test,LCT)配合血小板是解决随机血小板输注无效的方法之一[1]。我们动态观察了随机血小板输注无效的HLA抗体阳性患者输注LCT配合血小板后HLA抗体的变化情况，旨在了解LCT在解决血小板输注无效中的应用价值，探讨HLA抗体阳性患者的血小板有效输注方式。

1 材料与方法

1.1 病例选择 对各医院送检随机血小板输注无效患者90例进行HLA抗体检测，选取5例需长期输注血小板的HLA抗体阳性患者，其中再生障碍性贫血1例，多发性骨髓瘤1例，β-地中海贫血干细胞移植术后3例，年龄3～50岁。

1.2 输注血小板效果判断 采用血小板增加修正值 (CCI)，CCI=输后血小板增加值×体表面积/输注血小板总数×1011，若输注后1h CCI<10×109/L或24hCCI<5.0×109/L 为无效[2]。

1.3 试剂 ⑴T淋巴细胞荧光免疫磁珠；⑵美国One Lambda公司生产的Lambda Antigen TrayTMELISA-LATM试剂盒；⑶美国One Lambda公司生产的Lambda Antigen TrayTMELISA-LAT1240试剂盒；所有试剂严格按照说明书操作，在有效期内使用。

1.4 实验方法 ⑴采用ELISA-LATM试剂盒对各医院送检随机血小板输注无效患者进行HLA抗体检测。⑵选取5例HLA抗体阳性患者行淋巴细胞毒实验(LCT)配型血小板，试验结果阴性输注；对5例患者在输注LCT配合血小板每5个单位后使用ELISA-LAT1240试剂盒测定HLA抗体强度和特异性。

HLA抗体强度计算公式：

HLA抗体特异性判断：根据阳性反应孔与试剂公司提供的细胞抗原盘确定特异性。

1.5 仪器 ⑴日本OLYMPUS 1×70倒置相差荧光显微镜；⑵美国Bio-Tek公司生产的ELX800型通用酶标仪。

2 结果

2.1 90例随机血小板输注无效患者中有57例HLA抗体阳性，阳性率为63.3%。其中5例长期输注血小板患者的HLA抗体强度随输注LCT配合血小板的数量的增加而逐渐减弱甚至逆转。

2.2 伴随着HLA抗体强度的减弱，有2例患者HLA抗体特异性发生了改变，见表1。

3 讨论

表1 2例患者的HLA抗体特异性情况

血小板表面存在着与其他细胞或组织共有的抗原，如HLA抗原、ABO抗原、Rh抗原。产生血小板输注无效的免疫学原因主要是HLA抗原引起的，其次是血小板特异性抗原(HPA)，在广东汉族人群仅有HPA-3和HPA-15系统抗原是引起血小板输注无效的潜在抗原[3]。输注LCT配型相合血小板能够改善因HLA抗体阳性引起的随机血小板输注无效患者的CCI。本次实验观测90例随机血小板输注无效患者中有57例HLA抗体阳性，阳性率为63.3%，与文献报道基本一致[4]。其中5例需长期输注LCT配型相合血小板的HLA抗体阳性患者，HLA抗体强度逐渐减弱甚至逆转，推测与两方面的因素形成有关：一是抗体本身对特异性免疫应答具有负反馈调节作用，随着抗体数量的增加，加速了抗原的清除，从而降低了抗原浓度，形成抗独特型抗体；二是免疫抑制药物的长期应用，在一定程度上抑制同种免疫的发生。

5 例患者中有2例患者伴随着HLA抗体强度的减弱，HLA抗体特异性发生了改变：1例再生性障碍贫血患者第一次检测的HLA抗体特异性为：-A24；-B27,51,57,输入相合血小板5U后，出现了新的抗体-A30；输入相合血小板10U后，又增加了抗体-B55；另 1例β-地中海贫血患者第一次检测的HLA抗体特异性为：-A11,29,30,31,32,33;-B13,27,37,55,60,61，在输入相合血小板15U后，出现了新的抗体-B35。我们认为这是由于LCT试验虽然可以帮助患者选择避开针对体内HLA特异性抗体的抗原，但其无法识别非HLA交叉反应组的相应HLA抗原[5]，使机体接受新抗原的刺激产生新的抗体，持续输注无效，降低临床预期值。

我们建议对长期输注配型血小板患者的HLA抗体应实施动态观察检测，LCT能够解决由于HLA抗体阳性引起的随机血小板输注无效，但随着输入抗原的改变，HLA抗体的特异性亦会发生改变，产生新特异性的HLA抗体，建立HLA相合血小板供者库是最有效的解决方法。

[1]Levin MD.The value of alloantibody detection in predicting response to HLA-matched platelet transfusions[J].Br J Haematol.2004,124(2):244-50.

[2]田兆嵩.临床输血进展[M].成都:四川科学技术出版社，2010：21-23.

[3]张伟东,夏文杰,叶 欣,等.血小板抗原谱细胞的建立和应用[J].实验与检验医学杂志，2008,(4)26:372-373.

[4]Fabris F,Soini B,Sartori R，et al.Clinical and laboratory factors that affect the post-transfusion platelet increment[J].Transfus Sci，2000,23(1):63-68.

[5]魏亚明,吕 毅.基础输血学[M].北京：人民卫生出版社，2011：245-246.

R457.1+2，R446.62

B

1674-1129(2012)04-0357-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.04.015