胃癌CT征象与组织分化及p53、Ki67表达的相关性

王景宇，冬 冬，戴春来，王淑清，周丹丹

吉林大学 第一临床医院放射线科，长春 130021

·论著·

胃癌CT征象与组织分化及p53、Ki67表达的相关性

王景宇，冬 冬，戴春来，王淑清，周丹丹

吉林大学 第一临床医院放射线科，长春 130021

目的探讨胃癌CT征象与病理组织分化及p53、Ki67表达的关系，为临床提供更多信息。方法使用多层螺旋CT机对158例胃癌患者行平扫、增强扫描，纪录CT观察指征(CT图像上最大径及厚度、强化差值、浆膜侵犯、淋巴结及远处转移)，免疫组织化学和反转录多聚酶链式反应测定p53、Ki67的表达。结果组织分化与CT图像上病灶厚度(χ2=5.554，P=0.018)、强化差值(χ2=5.273，P=0.022)、淋巴结转移(χ2=6.061，P=0.014)具有相关性； p53表达与淋巴结转移具有相关性(χ2=5.028，P=0.025)；Ki67表达与CT图像肿瘤厚度(χ2=5.674，P=0.017)、淋巴结转移(χ2=5.028，P=0.025)具有相关性。结论螺旋CT做为一种简便、无创的检查方法，可以初步估计组织分化、p53及Ki67的表达。

CT征象；胃癌；组织分化；p53；Ki67

利用多层螺旋CT (multi-detector row spiral computered tomography,MSCT)对胃癌进行术前评估已得到应用，但对于应用CT术前评估胃癌分化程度及相关免疫组化指标的文献较少，1988年陈峻青[1]从临床外科角度出发,研究胃癌生物学行为的应用问题，力图使外科医师在切胃前能掌握胃癌本质的特征、正确估计胃癌的恶性程度,采取合理治疗,提高疗效。本研究主要从胃癌影像学表现与组织病理学、相关免疫组化指标的相关性入手，达到从术前胃癌CT表现提示胃癌预后，为手术治疗、术前术后化疗方案制定提供有价值信息的目的。

对象和方法

对象收集我院2008年3月至2009年2月经病理证实的胃癌患者158例，其中男性110例、女性48例；年龄21～84岁，平均(60±12)岁。

方法所有患者检查前均禁食4～6 h，于检查前10 min肌注654-2 20 mg，口服温水1000～1200 ml，扫描体位取仰卧位。使用GE lightspeed-16多层螺旋CT机，扫描参数：管电压120 kV、管电流360 mA。扫描范围：平扫、动脉期及静脉期扫描范围包括整个胃部，平衡期扫描范围包括从膈顶至盆腔，于吸气末屏气完成，扫描层厚5 mm，间隔5 mm。高压注射器经肘静脉注入非离子型造影剂[欧乃派克(通用电气药业有限公司)300 mgI/ml或优维显(拜尔医药保健有限公司)300 mgI/ml]100 ml，注入速率3.0 ml/s。增强扫描于注射开始后25 s为动脉期延迟时间，静脉期35 s，平衡期60 s。将扫描所得原始数据进行1.25 mm薄层重建，所有病例均行多平面图像重组处理。

图像分析由两名有经验的放射科医师分别阅片，进行图像后处理，评价图像质量，通过轴位相与多平面重组像相结合分析病变的CT影像表现。确定本研究感兴趣胃癌的各种观察指征(CT三维图像上肿瘤最大径及厚度、强化差值、浆膜侵犯、淋巴结转移和远处转移)。

结果评定

CT征象评定标准：选取平扫原始图像、重建多平面图像病灶最大径及最大厚度，记录肿瘤最大径及厚度：选取静脉期为强化最大期，与平扫CT值比较，记录强化差值。浆膜受侵标准阳性表现为浆膜面粗糙、癌肿邻近脂肪间隙模糊、癌肿结节状外突，周围脂肪层消失出现异常强化或伴邻近脏器异常强化。淋巴结转移的诊断标准阳性表现为邻近淋巴结大小大于5 mm且伴强化。无远处脏器转移记录为阴性。

组织分化评定标准：依据WHO对于胃癌病理分型及分化的描述分为高/中分化组、低分化组；p53及Ki67测量方法及评定标准：采用福州迈新生物技术开发有限公司即用型免疫组化EliVision plus试剂盒，选取鼠抗人p53蛋白、Ki-67抗原免疫组化单克隆抗体，严格按照免疫组化试剂盒说明书进行操作。镜检：细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性，p53阳性细胞计数共1000个细胞的阳性细胞数所占比例标准为：<10%为(-)，≥10%为(+)。Ki67阳性细胞计数共1000个细胞的阳性细胞数所占比例标准为：<50%为(-)，≥50%为(+)。

统计学处理应用SPSS 13.0统计软件,计数资料的比较采用四格表χ2检验及行×列χ2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。

结 果

不同分化程度胃癌螺旋CT征象MSCT上病灶厚度与胃癌组织分化程度密切相关(χ2=5.554，P=0.018)，而胃癌不同分化组织分化程度间病灶大小差异无统计学意义，两者无相关性(χ2=2.054，P=0.152)。高/中分化及低分化组间的强化差值差异均有统计学意义(χ2=5.273，P=0.022)。淋巴结转移与组织分化具有相关性(χ2=6.061，P=0.014)，胃癌不同分化组织分化程度间病灶浆膜是否受侵、是否伴有远处转移间无统计学意义(χ2=1.154，P=0.283；χ2=0.000，P=1.000)(表1)。

不同p53及Ki67表达组间胃癌螺旋CT征象p53表达为阳性103例(65.2%)、阴性55例(34.8%)；不同组间淋巴结转移差异具有统计学意义，两者具有相关性(χ2=4.077，P=0.043)，而与肿瘤最大径(χ2=0.616，P=0.432)、病灶厚度(χ2=0.768，P=0.381)、强化差值(χ2=0.684，P=0.408)、浆膜受侵(χ2=0.128，P=0.721)、远处转移(χ2=1.384，P=0.239)无相关性。

Ki67表达为阳性120例(75.9%)、阴性38例(24.1%)，两组肿瘤厚度(χ2=5.674，P=0.017)、淋巴结转移(χ2=5.028，P=0.025)差异具有统计学意义，而两组强化差值(χ2=2.429，P=0.119)、浆膜受侵(χ2=0.365，P=0.547)、肿瘤最大径(χ2=0.111，P=0.739)、远处转移(χ2=0.285，P=0.594)差异无统计学意义(表2)。

表 1 胃癌螺旋CT征象与组织分化的关系(n)

表 2 胃癌螺旋CT征象与免疫组化p53及Ki67的关系

讨 论

在胃癌的诊断中，胃壁的增厚是公认的主要标准，对于此项观察征象一直是胃癌研究的热点。进展期胃癌多有明显的胃壁增厚及病灶异常强化表现，本组病例在经统计学分析后认为，不同分化程度的病变之间厚度存在差异，认为病变厚度与分化程度存在相关性，与国内郭华等[2]研究存在差异，但考虑病灶厚度及大小尚受发病时间、发病部位及患者营养状态等多因素影响，尚不能确定病灶大小及厚度与胃癌组织分化的有无相关补充文献。肿瘤的发生、发展、浸润均有赖于肿瘤新血管的形成，与肿瘤侵袭性相关的癌基因的表达可诱导生成大量结构、功能异常的肿瘤血管，形成肿瘤生长、浸润的基础[3]。本研究螺旋CT强化差值与胃癌分化程度具有相关性，于静脉期对158例胃癌进行强化差值的测量，在强化界值的选取上综合以往相关文献[3-6]选定60 Hu，结果表明CT增强的强化差值与肿瘤组织分化有相关性，分析原因可能为病灶癌肿血管丰富程度较正常组织明显增高而强化使其表现明显，病灶局部癌肿与胃壁的组织血管化丰富程度差异决定了强化程度，强化差值较大的瘤组织内血管分布不均或稀疏、不规则、紊乱；强化较为均匀的瘤组织血管分布均匀，故认为肿瘤的强化程度可以在一定程度上揭示病灶血管形成的情况，对于分析病变的浸润能力及生物行为有一定意义。

淋巴结转移是胃癌转移的主要途径，但转移淋巴结判定标准一直以来意见不一致，从5～15 mm。因此，CT对转移淋巴结检出率的报道差异较大。5 mm以下淋巴结的检出率及转移率均低[7]；同时，文献报道，76%～90%的胃癌患者，其<10 mm淋巴结的转移率高达50%左右，特别是直径6～9 mm的淋巴结转移率更高，而非转移淋巴结平均大小为4.1 mm[8]。故本研究数据选取5 mm作为标准。进展期胃癌淋巴结清扫术式选择对临床胃癌预后及病理特征的探讨有很大意义[9]，术前淋巴结评估对临床术式方案制定有一定指导意义。

本研究淋巴结转移与组织分化存在相关性，分化程度对淋巴结转移的影响较大，低分化组较高/中分化组易出现淋巴结转移，分化程度低的胃癌具有较强的浸润能力，对于微血管及微淋巴管的浸润能力更强，故出现淋巴结转移的概率大于高/中分化组。

肿瘤的发生是多步骤演变导致多基因突变积累的结果，主要有抑癌基因的失活及癌基因的活化，p53基因是胃癌组织中最常发生变异的肿瘤抑制基因，也是目前研究最多、最为关注的基因，研究表明，由于p53表达对癌细胞增殖的抑制作用减弱，促进癌细胞浸润转移，对判断胃癌的预后有一定意义[10-12]。Lee等[13]和Fondevila等[12]的多变量生存分析表明p53是预后的独立因素。本研究表明淋巴结转移与胃癌p53阳性表达有关，在发生淋巴结转移情况下p53阳性表达率显著增高；与殷信道等[14]和Xie等[15]报道结果一致，淋巴结转移与胃癌的浸润转移能力有关，而p53阳性表达可以反映胃癌的浸润转移能力，所以，MSCT观察淋巴结转移可以在一定程度上反映胃癌p53阳性表达，对于反映癌肿的生物学行为有一定意义，提示今后影像学可以在分子水平研究胃癌。本研究证实p53表达与胃壁形态、浸润厚度及远处转移无明显相关性。

Ki67抗原是与增殖细胞相关的核抗原，分布于核内，有研究表明，Ki67抗原表达可反映肿瘤细胞的增殖活性，与恶性肿瘤的发展、转移和预后高度相关[16]。本研究显示，Ki67抗原表达水平与胃癌淋巴结转移密切相关，这是由于肿瘤淋巴结转移与肿瘤细胞的增殖活性密切相关，而Ki67抗原是与增殖细胞相关的核抗原，其阳性表达提示肿瘤组织的增殖活性较强，癌细胞的增殖是胃癌浸润转移的重要原因，而胃癌的主要转移途径之一即为淋巴结转移，胃癌淋巴结转移提示Ki67抗原高表达，同时，本研究认为在螺旋CT中病灶厚度与Ki67表达存在相关性，但与浆膜浸润未见相关，推测肿瘤的增殖活性在一定程度影响病灶的生长。胃癌MSCT征象是对胃癌病理形态改变的真实反映，又是以微观的细胞分子病理学改变为前提的，可较可靠地反映胃癌病理学形态及淋巴结转移情况。因此，依据CT征象可推测出胃癌Ki67表达水平，进而指导临床手术、化学预防和治疗以及评价患者预后。

综上，胃癌患者术前行MSCT检查，并针对某些特征性表现，如强化程度、肿瘤厚度进行观察测量将有助于对胃癌术前估计组织学类型,并对p53、Ki67表达具有提示意义，将有可能为术前辅助性化疗及诊疗方案的制定提供重要参考。

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CorrelationofCTPresentationwithHisto-differentiationandp53andKi67ExpressionsinGastricCancer

WANG Jing-yu，DONG Dong，DAI Chun-lai, WANG Shu-qing, ZHOU Dan-dan

Department of Radiology, the First Affiliated Hospital of Jilin University, Changchun 130021，China

WANG Shu-qing Tel：0431-85612920，E-mail: shuqingwangjdyy@yahoo.com.cn

ObjectiveTo study the relationship between spiral CT findings and histological differentiation and expressions of p53 and Ki67 in gastric carcinoma.MethodsTriphasic spiral CT was performed in 158 patients. CT findings included maximal diameter and thickness of tumor in three dimensional CT images, degree of enhancement, muscous situation,lymph nodes, and visceral metastasis were recorded. The expressions of p53 and Ki67 were detected with immunohistochemistry and reverse transcription polymerase chain reaction.ResultsThe thickness of tumor (χ2=5.554,P=0.018), degree of enhancement (χ2=4.978,P=0.026), and lymph nodes metastasis (χ2=6.061，P=0.014) in the three dimensional CT images were significantly correlated with tumor histological differentiation. Lymph nodes metastasis was significantly correlated with the expression of p53 (χ2=5.028，P=0.025). The expression of Ki67 was significantly correlated with the thickness of tumor (χ2=5.674,P=0.017) and lymph nodes metastasis (χ2=5.028,P=0.025).ConclusionMulti-slice CT is a simple and noninvasive technique, and can be used for assessing the histological differentiation of gastric cancer as well as the expressions of p53 and Ki67 before the operation.

CT findings, gastric carcinoma; histological differentiation; p53; Ki67

ActaAcadMedSin, 2011,33(5):555-559

王淑清 电话：0431-85612920，电子邮件：shuqingwangjdyy@yahoo.com.cn

R735.2

A

1000-503X(2011)05-0555-05

10.3881/j.issn.1000-503X.2011.05.015

2010-10-14)