HPLC法测定通之舒胶囊中丹参酮ⅡA含量

谭玉龙 韩 苗

（1、哈尔滨亲情制药有限公司，黑龙江 哈尔滨 150029 2、哈尔滨仁皇药业有限公司，黑龙江 哈尔滨 150300）

通之舒胶囊是以丹参、山楂、降香、柞蚕蛹为原料，经特殊制剂工艺制成。本产品活血通脉。适用于冠心病、心绞痛属心血瘀阻证的辅助治疗，可改善胸闷、胸痛等症状。丹参是通之舒胶囊中的君药，而丹参酮ⅡA是丹参的重要有效成分之一，因此，本试验用高效液相色谱法对该制剂中的丹参酮ⅡA进行了含量测定。本实验建立了一种HPLC法测定其中丹参酮ⅡA含量，重现性好。可用于评价丹参酮ⅡA及制剂中该成分的指标。

1 仪器与试剂

美国Agilent 1100色谱仪；丹参酮ⅡA对照品 (中国生物制品检定所，供含量测定用）；甲醇为色谱纯；水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 检测波长的选择

取丹参酮ⅡA对照品适量，加甲醇溶解，在 200～400nm波长扫描，结果本品在270.0nm处有最大吸收，故选择270nm作为检测波长。

2.2 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18（4.6mm×250 mm，5μm）；流动相：甲醇―水（73:27）；流速：1.0ml/min；检测波长：270nm；进样量：5μl。理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。

2.3 对照品溶液的制备

精密称取丹参酮ⅡA对照品10.01mg，置50ml棕色量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液5ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1ml中含丹参酮ⅡA 40.04μg）。

2.4 供试品溶液的制备

取本品10粒，倾出内容物，精密称定，研细，取 1g，精密称定，精密加入甲醇 25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.5 方法学考察

2.5.1线性关系考察

分别精密量取丹参酮ⅡA对照品贮备液1ml、3ml、5ml、7ml、9ml置 25ml棕色量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，照高效液相色谱法,分别量取5μl注入液相色谱仪,测定。以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标进行线性回归,方程为 Y=75.506X+7.15，r=0.9995。结果表明,丹参酮ⅡA在8.008～72.072μg/ml范围内呈良好线性关系。

2.5.2精密度试验

取同一样品溶液连续进样6次，测得丹参酮ⅡA的峰面积RSD=1.1%。

2.5.3重复性试验

取同一批通之舒胶囊，按2.4项下的方法操作，平行制备6份样品溶液，依样品测定法测定，计算丹参酮ⅡA的含量，结果RSD=1.5%。

2.5.4稳定性试验

将同一样品溶液室温条件下放置，分别于 0、2、4、6、8、12h 按上述色谱条件测定样品液峰面积，并计算相对标准偏差。结果RSD=1.6%。表明样品溶液在12h内稳定。

2.5.5回收率试验

采用加样回收法，取已知含量的通之舒胶囊10粒，添加一定量的丹参酮ⅡA对照品溶液，按2.4项下的方法操作，制备成加样回收供试溶液，依样品测定法测定。结果，丹参酮ⅡA的加样回收率为99.28%，RSD=1.1%（n=6）。

2.6 样品测定

取三批样品，按2.4项下的方法操作，制成供试品溶液，在上述色谱条件下，分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各5μl注入液相色谱仪，依法测定。结果三批样品含量均符合规定。

3 讨论

3.1通过比较甲醇、10%甲醇、15%甲醇、50%甲醇为提取溶剂，结果采用甲醇作为提取溶剂效果最好。同时考察了不同超声处理时 间 20min、30min、40min， 结 果 表 明 超 声30min后丹参酮ⅡA基本提取完全，故选择提取方法为超声30min。

3.2在测定丹参酮ⅡA含量时，曾分别考察了不同比例的甲醇―水（70：30）、甲醇―水（73：27）、甲醇―水（80：20）、甲醇―水―冰醋酸（70：29：1），结果以甲醇―水（73：27）为流动相时溶液分离效果最佳。

通过以上实验测定通之舒胶囊中丹参酮ⅡA的含量，结果表明此方法简便、准确、稳定性与重复性好，可有效控制产品质量。

[1]胡少娟，HPLC测定心可宁胶囊中丹参酮ⅡA 的含量，海峡药学，2009，10（21）:69-70。

[2]黄烽，HPLC法测定丹舒胶囊中丹参酮ⅡA的含量，药物鉴定，2009,18（3）:9。