重组人胰岛素在不同输液及不同材质输液容器中的含量变化

舒德忠，彭其胜，郑小敏，郑维国

(1.重庆市涪陵区中心医院药剂科，涪陵408000；2.重庆市涪陵区药品检验所抗生素室，涪陵408000)

[本文编辑] 兰 芬

胰岛素是治疗糖尿病的有效药物之一，临床上经常将胰岛素注射液加入0.9%氯化钠注射液(NS)或5%葡萄糖注射液(GS)中静脉滴注，或作为极化液组分。常用的胰岛素注射液为猪胰岛素、牛胰岛素，以及重组人胰岛素。文献[1]认为重组人胰岛素不可用于静脉注射，而文献[2]中重组人胰岛素的用法却有皮下注射、静脉滴注和静脉注射三种方式。目前，塑料材质如塑料瓶和塑料袋包装的输液应用日益广泛。有文献报道，塑料制品对胰岛素有吸附作用，可能会影响其临床疗效，特别是聚氯乙烯(PVC)对胰岛素的吸附作用较大[3，4]，但临床医护人员将胰岛素注射液与常用溶媒混合时并未考虑吸附作用对药效的影响。本研究考察了不同输液和不同输液容器对重组人胰岛素的吸附作用，以期为临床合理配制胰岛素注射液提供参考。

1 材 料

1.1 仪器 LC－20AT 高效液相色谱仪，包括 SPD－M20A PDA二极管阵列检测器、7725i型手动进样阀、CBM－20Alite系统控制器和Shimpack VP－ODS色谱柱(日本岛津公司)；pH计(上海仪器厂)。

1.2 试剂和药品 市售重组人胰岛素注射液[规格：3ml:300U，商品名 优泌林，批号A562898A、A672675A，礼来(苏州)制药有限公司]；重组人胰岛素对照品(20mg／瓶，中国药品生物制品检定所，批号140633－200703)。PVC塑料瓶包装的5%GS(宁波长富药业有限公司，批号09101903)；聚丙烯(PP)塑料瓶包装的5%GS(浙江济民制药有限公司，批号10092334)；玻璃瓶包装的5%GS(批号091116)、玻璃瓶包装的10%GS(批号091116)和玻璃瓶包装的NS(批号091110)均由重庆天圣制药股份有限公司提供；乙腈为色谱纯(北京亚太龙兴化工有限公司)；盐酸(重庆无机化学试剂厂)；其他试剂均为分析纯。

2 方法和结果

2.1 重组人胰岛素含量的测定

2.1.1 色谱条件 VP－ODS C18色谱柱(150mm×4.6mm，4.6μm)；流动相：0.2mol／L硫酸盐缓冲液－乙腈(74:26)；流速：1.0ml／min；检测波长：214nm；柱温：40 ℃；进样量：20μl。溶液的配制及实验操作在20～25℃室温下进行。

2.1.2 系统适用性实验 取重组人胰岛素对照品适量，先加0.01mol／L盐酸溶液1ml溶解，然后加流动相至刻度，摇匀。取5%GS和NS作为阴性对照品，另取含有25U重组人胰岛素注射液的5%GS、10%GS和NS作为供试品(含重组人胰岛素0.5U／ml)。按《中华人民共和国药典》2010年版[5]规定的方法进样测定，得到色谱图见图1。由图1可见，重组人胰岛素与输液带来的杂质峰，以及重组人胰岛素注射液带来的间甲酚杂质峰分离度好。

2.1.3 线性关系的考察 精密称取胰岛素对照品适量置10ml量瓶中，先加0.01mol／L盐酸溶液1ml溶解，然后加流动相至刻度，摇匀，再用流动相稀释成系列浓度为0.009 4、0.018 8、0.037 6、0.056 4、0.075 2mg／ml的标准溶液。取各浓度的标准溶液各20μl进样，按2.1.1项下色谱条件测定峰面积。以重组人胰岛素浓度(c)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为A＝(1.744 9×107c－3.15×104(r＝0.999 8，n＝5)。

2.1.4 精密度实验 取2.1.3项下配制的浓度为0.009 4、0.037 6、0.075 2mg／ml的重组人胰岛素对照品溶液进样，每个样品连续进样5次，每次进样20μl。结果低、中、高浓度的 RSD分别为3.52%、2.48%和4.15%(n＝5)，表明日内精密度良好。

2.1.5 回收率实验 将25U重组人胰岛素注射液加入50ml的容量瓶中，用5%GS稀释到刻度，摇匀，作为母液(此浓度作为100%)。分别取8、6、4和2ml母液置于10ml容量瓶中，加5%GS到刻度，摇匀，配得相对百分含量为80%、60%、40%和20%的样品溶液，用HPLC法测定各浓度样品溶液的峰面积。以样品溶液的峰面积与母液的峰面积相比，得到实际相对百分含量，回收率(%)＝(实际相对百分含量／理论相对百分含量)×100%。结果相对百分含量为80%、60%、40%和20%的样品溶液回收率分别为：(99.78±1.16)%、(100.58±1.59)%、(100.90±2.13)%和(99.10±1.27)%(n＝5)。

2.2 吸附性及稳定性实验 将输液分成以下两组：一组为包装材质为玻璃瓶、PP和PVC的5%GS；另一组为玻璃瓶装的5%GS、10%GS及NS。将25U重组人胰岛素注射液分别加入50ml以上输液中，充分摇匀。量取一定量的混合溶液，用0.45μm微孔滤膜滤过，取20μl续滤液进样，测定浓度，该浓度即为配置0h的浓度。将混合液留置1、2、4、12h，取样，同法测定，以0h的浓度为100%(吸附率为0)，计算各时间点的相对百分含量，考察不同输液容器对重组人胰岛素的吸附性以及重组人胰岛素在不同输液中的稳定性。

2.4 测定结果 重组人胰岛素注射液加入以上两组输液中，各时间点的相对百分含量见表1。PVC瓶装的葡萄糖输液在配置后2h胰岛素的相对百分含量较低，但各浓度差异无统计学意义(P＞0.05)；玻璃瓶装不同输液中重组人胰岛素相对百分含量变化较小，差异无统计学意义(P＞0.05)。

图1 重组人胰岛素的HPLC谱图

表1 重组人胰岛素在不同输液中的相对百分含量(%)

3 讨 论

重庆市涪陵区中心医院的合理用药监测系统(PASS)在审查住院医嘱时，对5%GS或NS与重组人胰岛素注射液配伍均提出了黑色警示，对这两种输液与胰岛素注射液(猪或牛胰岛素)配伍却未提出任何警示。临床常有5%GS或NS与重组人胰岛素配伍的医嘱执行，未见相关药品不良反应上报。PASS对审查结果解释为：生物合成人胰岛素注射液与输液溶媒混合时，数量不详的胰岛素会被输液溶媒吸收，但这是由药物还是输液容器所导致尚无明确说明。礼来(苏州)制药有限公司提供的重组人胰岛素注射液说明书中注明该制剂可以皮下或静脉注射方式给药，没有提及输液和输液容器对胰岛素含量的影响。输液和输液容器对重组人胰岛素是否有吸附，文献对此也有争议。文献[1]特别提示重组人胰岛素不能静脉注射，而胰岛素注射液可以。徐小薇等[3]检测了重组人胰岛素在3种材质包装的NS和5%GS输液中存放48h，剩余药物相对0h的相对百分含量。存放1h时，胰岛素在PVC袋装的NS和5%GS中相对百分含量分别为94.08%和93.04%；在非PVC袋(即不含增塑剂的非PVC复合膜)装的NS和5%GS中相对百分含量分别为98.46%和97.67%；玻璃瓶装的NS和5%GS中相对百分含量分别为99.96%和99.52%。48h时，PVC袋装的NS和5%GS中胰岛素相对百分含量分别为68.83%和65.72%。

临床使用的重组人胰岛素与人体自身合成的胰岛素结构完全相同，与猪、牛胰岛素相比只有一个氨基酸不同。鉴于文献对输液和输液容器的吸附性尚无定论，本研究考察了不同容器(PVC、PP、玻璃瓶)和不同输液(5%GS和 NS)对胰岛素的吸附性。结果显示，重组人胰岛素注射液加入到不同材质包装的输液中，尽管相对百分含量略有减少，但并不明显(P＞0.05)；且不同浓度的GS对重组人胰岛素的含量影响没有显著差异。本研究的结果与文献[2]结果不完全一致，作者认为这与胰岛素在输液容器中存在吸附与洗脱作用有关[6]。由于本研究测定取样前都振摇了输液瓶，可能导致被吸附的部分重组人胰岛素重新洗脱出来，从而使其相对百分含量变化幅度比文献报道值小。

结合相关文献，本研究认为，重组人胰岛素注射液加入到5%GS、10%GS和NS输液中，在临床使用的时间内是稳定的。溶媒本身以及玻璃瓶和PP塑料瓶对重组人胰岛素几乎没有吸附作用，PVC塑料瓶对重组人胰岛素有少量吸附，但其吸附量对临床疗效影响不大。文献[2]认为重组人胰岛素可以静脉滴注，没有对输液的包装材质提出特殊要求。值得提醒的是，本研究的样品是直接从输液瓶中采取，未经过输液管等临床使用途径。流经输液管的液体量小，停留时间长，与输液管接触面积大，输液管对重组人胰岛素是否有明显的吸附性应进一步研究证实[4]。

[1]四川美康医药软件研究开发有限公司.药物临床信息参考(2007)[M].成都：四川出版集团，四川科学技术出版社，2007：1196.Sichuan Medicom Medical Software Research and Development Co.，Ltd.Reference of clinical drug information(2007)[M].Chengdu：Sichuan Publishing Group，Sichuan Science and Technology Press，2007：1196.Chinese.

[2]卫生部合理用药专家委员会.中国医师药师临床用药指南[M].重庆：重庆出版集团，重庆出版社，2009：899－900.Experts Committee on Rational Use of Drugs，Ministry of Health.Guideline of clinical medication for doctors and pharmacists in China[M].Chongqing：Chongqing Publishing Group，Chongqing Press，2009：899－900.Chinese.

[3]徐小薇，杜小莉，李大魁，等.3种不同材质输液容器对15种药物的吸着性实验[J].中国药学杂志，2004，39(3)：205－208.Xu XiaoWei，Du XiaoLi，Li DaKui，etal.Study on sorption of fifteen injectable drugs in three different kinds of intravenous solution containers[J].Chin Pharm J，2004，39(3)：205－208.Chinese with abstract in English.

[4]王世岭，韩玉琴，刘清云，等.输液滤器对几种常用静脉注射药物吸附作用的观察[J].中国医院药学杂志，1996，16(10)：452－454.Wang ShiLing，Han YuQin，Liu QingYun，etal.Investigation of adsorption of intravenous drugs by infusion filter[J].Chin J Hosp Pharm，1996，16(10)：452－454.Chinese.

[5]国家药典委员会.中华人民共和国药典.2010年版 二部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：845－846.State Pharmacopoeia Committee.Pharmacopoeia of the People’s Republic of China.2010ed.Volume 2[S].Beijing：China Medical Science Press，2010：845－846.Chinese.

[6]施春华，倪元红.聚氯乙烯输液装置对胰岛素吸附及洗脱作用的观察[J].交通医学，2010，24(4)：461－462.Shi ChunHua，Ni YuanHong.Study on adsorption and elution of insulin by polyvinyl chloride(PVC)infusion sets[J].Med J Commun，2010，24(4)：461－462.Chinese.