阿德呋啉对人工感染鸡球虫病的疗效试验

吴丽君，曾明华，江善祥，阮祥春，万荣峰

(1.安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036;2.南京农业大学，南京 210095)

鸡球虫病(Coccidiosis)是由艾美耳属(Eimeria)的多种球虫引起的严重危害家禽生长发育和造成严重环境污染的疾病［1］。其发病率为50% ～70%，死亡率20% ～80%［2］。据报道，全世界每年因球虫病造成的经济损失多达20亿美元，抗球虫药的年消费为3亿多美元［3-4］。目前，防治鸡球虫病的主要手段仍是用药［5］，自从 Levine［6］发现磺胺类药物具有抗球虫作用以来，至今用于防治球虫病的药物有50余种。但前人的研究证明，球虫几乎对所有使用过的抗球虫药都有耐药虫株的出现，只是产生耐药性所需的时间和耐药性强弱不同而已［7-8］。球虫耐药性的产生导致抗球虫药物使用年限缩短，防治效果不佳，甚至失败，引起临床或亚临床鸡球虫病，造成经济损失。为解决耐药性问题，常采用综合防治措施，而开发新药则是根本解决办法。

本试验在长期筛选的基础上，研制出核苷类化合物阿德呋啉。该药通过干扰球虫的嘌呤代谢而发挥抗球虫作用。抗球虫活性主要集中在球虫的无性生殖期，对卵囊的孢子化也有一定的抑制作用。它是一种新型广谱抗球虫药物，与其他抗球虫药无交叉耐药性，从而有效治疗耐药虫株的感染。本试验目的是评价这种新型抗球虫药对人工感染鸡球虫病的治疗效果，探索其使用浓度，为临床合理用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物 1日龄罗曼雄性雏鸡购于合肥长丰鸡场，出壳后即运至实验室，饲喂不含任何药物的饲料，自由饮水，无球虫饲养至20日龄，经粪检确认无球虫卵囊后供试验用。

1.2 试验药物 阿德呋啉，批号200909025，粉剂，含量75%，安徽农业大学药理室与南京农业大学共同研制;磺胺喹噁啉，批号20100226，粉剂，含量≥95%，安徽华澳动物药业有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 试验分组 将19日龄健康鸡称重，剔除精神状态不佳、生长发育不良、体重过大或过小的鸡只，共120只，随机分为6组，每组20只，各感染及给药分组情况如表1所示。

表1 试验分组及药物添加情况

1.3.2 人工感染 供试卵囊:从肥西某鸡场按常规方法采集混合卵囊，其中主要为柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫和布氏艾美耳球虫，经孢子化后保存在本实验室备用。给药24 h后，除不感染不给药组外，各组每只鸡经口接种5万个孢子化卵囊。

1.3.3 给药方法 除阳性对照组和阴性对照组外，在接种卵囊前24 h，给各试验组拌料混饲给药，连续用药7 d。

1.3.4 试验期限及临床观察 试验期为7 d，每日观察鸡的发病情况，记录血便和死亡数等。人工感染后第7天，收集每组鸡的粪便进行粪便卵囊计数;至第8天，将各组鸡分别称重并全部扑杀，观察并记录试验鸡的增重及盲肠和小肠病变情况。

1.3.5 药效判定标准

1.3.5.1 相对增重率 试验开始及结束时分别称鸡只体重，计算平均增重和相对增重率。以不感染不给药组在试验期间相对增重率为100%，计算其他各组的相对增重率，相对增重率×100即为相对增重率得分。

1.3.5.2 存活率 记录各组死亡鸡数，算出死亡率及存活率。

1.3.5.3 病变值 感染后第8天宰杀各组全部鸡只，参照Johnson和Reid［4］设计的病变记分法，记录每只鸡的病变记分，将每组各鸡的病变记分相加得病变值总分。肠道正常、无肉眼可见病变记0分，有少量散在病变记1分，较多稀疏病变记2分，有融合性大面积病变记3分，病变广泛融合、肠壁增厚记4分。

1.3.5.4 卵囊值 根据卵囊比数计算卵囊值(表2)。卵囊比数(%)=(各试验组卵囊数/感染不给药组卵囊数)×100。

表2 卵囊值计算方法

1.3.5.5 抗球虫指数(ACI)ACI=(存活率 +相对增重率)-(病变值+卵囊值)。ACI＜120，为无效;ACI在120～160范围内，为低效;ACI在160～180之间，为中效;ACI＞180，为高效。

2 结果

2.1 临床观察 感染不给药组鸡感染卵囊后，逐渐出现采食减少、羽毛蓬乱、精神差、昏睡等反应，第5天起，有血便出现，第6～7天开始死亡。死亡鸡经剖检发现，盲肠肿大，有血水郁积，盲肠和小肠上有出血点;磺胺喹噁啉组及30 mg/kg阿德呋啉组的鸡精神稍差，第5、6天出现少量血便，有少量鸡只死亡;60 mg/kg阿德呋啉组、90 mg/kg阿德呋啉组、阴性对照组无临床症状和死亡。

2.2 抗球虫疗效 试验结果如表3所示。

表3 阿德呋啉对人工感染鸡球虫病的防治效果

从表3可以看出，各给药组鸡增重差异显著较大。阿德呋啉90 mg/kg组相对增重率为83.2%，其结果经F检验，与不感染不给药组差异不显著(P＞0.05);阿德呋啉60 mg/kg组相对增重率与不感染不给药组相比，差异显著(P＜0.05);而其他各给药组及阳性对照组的相对增重率与不感染不给药组比较，均差异极显著(P＜0.01)。从 ACI来看，阿德呋啉 90 mg/kg组为183.2，为高效抗球虫药。其余各给药组ACI均小于120，无抗球虫效果。

3 讨论

本试验采用鸡球虫野外分离株混合人工感染发病。其感染不给药组，血便严重，卵囊值、病变值和死亡率较高，其他各给药组均有不同程度的病理变化，但90 mg/kg阿德呋啉组除外，其中30 mg/kg阿德呋啉组有死亡。阿德呋啉是目前核苷类化合物中作为抗球虫药物的唯一品种［9］。它通过干扰球虫的嘌呤代谢而发挥抗球虫作用。其抗球虫作用峰期为球虫的无性生殖期，即在球虫感染后1～3 d作用最强。同时它对球虫卵囊形成阶段也有效，可使卵囊的毒力降低，减少感染力。因此，适用于治疗及预防各种鸡球虫病，阿德呋啉属广谱抗球虫药，对柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫都有效。本试验采用混合虫种感染，阿德呋啉90 mg/kg组获得良好的治疗效果，其抗球虫指数ACI为183.2，属高效抗球虫药;30、60 mg/kg组则效果不好，说明该药在发挥治疗作用时应使用较高浓度。从表3可见，阿德呋啉90 mg/kg组具有较好的平均增重率，其卵囊值和病变值为零，存活率为100%。而该药的低浓度(30 mg/kg)组的存活率较低，与感染不给药对照组差异不显著(P＞0.05)。磺胺喹噁啉药物对照组ACI仅为71.9，说明感染虫株对该药已产生耐药性［10］。

综合本次试验结果，阿德呋啉可完全控制球虫混合感染，有效对抗盲肠和小肠球虫。该药广谱高效，抗球虫机制独特，与其他抗球虫药不产生交叉耐药性，可用于耐药虫株的感染，是一种新型的抗球虫剂。该药首次进入临床，在我国尚无生产，开发该药有助于鸡球虫病的临床治疗，特别适用于换药方案给药。

［1］孔繁瑶.家畜寄生虫学［M］.北京:中国农业大学出版社，1997:328-334.

［2］ 汪 明.兽医寄生虫学［M］.北京:中国农业出版社，2003:284-288.

［3］ 彼得L朗.球虫生物学［M］.蒋金书，刘钟灵，陆信武，等.译.广西:广西科学技术出版社，1990:103-120.

［4］ 索 勋，李国清.鸡球虫病学［M］.北京:中国农业大学出版社，1998:238-268.

［5］Mcquistion T E，Mcdougald L R.Anticoccidial Activity of Halofuginone［J］.Veterinary Parasitology，1981，9:27-33.

［6］Levine P P.The Effect of Sulfanilamide on the Course of Expert Mental Avian Coccidiosis［J］.Comel1 Vet，1939，29:309-320.

［7］李云峰，曾振灵.抗球虫药研究进展(上)［J］.养禽与禽病防治，2001，(8):6-8.

［8］Chapman H D.Field Isolates of Eimeria Resistant to Sulfaquinoxalinum［J］.Veterinary Parasitology，1983，12:45-50.

［9］Chapman H D.Evaluation of the Efficacy of Anticoccidial Drugs against Eimeria Species in the Fowl［J］.International Journal for Parasitology，1998，28:1141-1144.

［10］ Chapman H D.Drug Resistance in Avian Coccidia(a Review)EJ3［J］.Vet Parasitol，1984，15:11-27.