民族药物河谷地不容的生物碱成分研究

左爱学,李 莉,饶高雄

(云南中医学院云南省高校民族药现代研究重点实验室,云南昆明 650500)

民族药物河谷地不容的生物碱成分研究

左爱学,李 莉,饶高雄

(云南中医学院云南省高校民族药现代研究重点实验室,云南昆明 650500)

研究了民族药河谷地不容 (Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.)的生物碱成分,用色谱法从其块根提取物中分离得到 7个生物碱,经波谱分析鉴定为千金藤碱 (Stephanine,1)、克班宁(Crebanine,2)、异可利定 (Isocorydine,3)、千金藤宁碱 (Stepharanine,4)、药根碱 (Jatrorrhizine,5)、巴马汀 (Palmatine,6)和四氢巴马汀 (Tetrahydropa lmatine,7).其中化合物 1～3是首次从河谷地不容中分离得到.研究结果表明,河谷地不容生物碱的结构类型和地不容正品 (Stephania epigaeaH.S.Lo)类似,但具体成分有明显区别,为保证药品安全,河谷地不容不宜作为药材地不容混用、代用.

河谷地不容;化学成分;生物碱

地不容是云南各地中草药以及各少数民族医药中广泛使用的一类天然药物,中草药习称地不容、山乌龟、一文钱[1].彝族医药称为必伍告 (Bi-Wu-Gao)[2],傣医药称为波波罕 (Bo-Bo-Han)[3].《云南省中药材标准》(2005年版)收载其正品来源为防己科千金藤属植物地不容 (Stephania epigaeaH.S.Lo)的干燥块根[4].但在实际应用中,由于物种和资源的地理分布、民族区域分布的不同,有多种同属近缘植物也在各地被当作地不容使用.如何评价这些代用、混用的地不容类似品种,除了植物亲缘关系的联系以外,从其所含化学物质基础的比较,以及相关药理活性的验证等多个方面来寻求科学依据,均是具有重要意义的工作,为此,我们比较系统地对云南各地各民族应用的地不容类药材进行了化学成分的研究与比较.

河谷地不容主产于云南省红河州和文山州,当地草医和彝医、苗医等均当作地不容药用.有关河谷地不容的化学成分和生物活性,陈嬿等[5]从采自云南省红河州个旧市的药材样品中分离鉴定了 10个生物碱成分,马养民等[6-11]总结千金藤属植物化学成分的主要特征是富含原小檗碱型和阿扑啡型生物碱,多具有抗心律失常、降血压、细胞毒活性等作用,以四氢巴马亭为原料开发的颅痛定等已应用于临床.为了进一步阐明河谷地不容的化学物质基础,我们对产于云南省文山州西畴县的河谷地不容的生物碱成分进行了研究.

1 实验部分

1.1 仪器与材料

熔点用 YANACO显微熔点仪测定 (温度未校正);MS用 Finnigan MAT-95质谱仪测定;NMR用BrukerAM-400核磁共振仪测定,T MS内标.柱色谱硅胶及薄层色谱硅胶板均为青岛海洋化工厂生产,柱色谱氧化铝为上海陆都化学试剂厂生产,葡聚糖凝胶 LH-20为 Phar macia公司生产;乙醇、丙酮、环己烷等试剂均用普通工业级溶剂或化学纯溶剂;薄层色谱显色剂用改良碘化铋钾试液或 10%硫酸-乙醇溶液.

河谷地不容药材 (块根)采于云南省文山州西畴县,植物标本经云南中医学院药用植物教研室钱子刚教授鉴定为防己科千金藤属植物河谷地不容Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.,标本保存于云南中医学院标本馆(DBR-00137-M).

1.2 提取与分离

新鲜的河谷地不容块根 9 kg,刮去粗皮,切成碎块,用搅拌机磨成糊状,再以 2%的稀硫酸于室温下浸泡提取 2次,每次 3 d,不时搅拌以促进溶出.合并2次酸水提取液,用 20%氢氧化钠调节至 pH=9,依次用氯仿、正丁醇萃取,得到脂溶性生物碱部分 (Fr-A,18 g)和水溶性生物碱部分 (Fr-B,78 g).

Fr-A部分用氧化铝柱色谱分离,以环己烷 -丙酮 -三乙胺系统梯度洗脱 (80∶20∶1～60∶40∶1)分为 4个流份段,再分别以硅胶柱色谱反复分离,用氯仿 -丙酮 -三乙氨 (100∶5∶0.5～100∶25∶1)梯度洗脱,以及葡聚糖凝胶 LH-20柱色谱 (丙酮洗脱)反复纯化得到化合物 1(1 140 mg)、2(960 mg)、3(17 mg)、7(37mg).

Fr-B部分用氧化铝柱色谱分离,以氯仿 -甲醇 -三乙胺系统梯度洗脱 (100∶10∶1～100∶100∶1)分为 3个流份段,再分别以葡聚糖凝胶 LH-20柱色谱 (甲醇洗脱)反复纯化得到化合物 4(12mg)、5(71mg)、6(231mg).

2 结构鉴定

化合物 1:浅黄色片晶 (丙酮),m.p.154～155℃,MS m/z 309(M+,C19H19NO3),1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:2.55(3H,s,N-CH3),3.90(3H,s,8-OCH3),2.21(1H,td,J=14.5、3.1 Hz,5-Ha),3.05(3H,m,5-Hb和7-H2),2.52(2H,m,4-H2),3.69(1H,dd,J=14.9、4.6 Hz,6a-H),5.90、6.01(各 1H,d,J=1.4 Hz,-OCH2O-),6.55(1H,s,3-H),6.82(1H,br.d,J=8.0 Hz,9-H),7.30(1H,br.t,J=8.0 Hz,10-H),7.78(1H,br.d,J=8.0 Hz,11-H);上述1H NMR数据与文献报道基本一致[12],故鉴定为千金藤碱 (Stephanine).

化合物 2:浅黄色柱晶 (甲醇),m.p.109～110℃.MSm/z339(M+,C20H21O4N).其1HNMR和13CNMR数据与文献报道一致[13],故鉴定为克班宁(Crebanine).

化合物 3:无色柱晶 (甲醇),m.p.181～183℃.MSm/z341(M+,C20H23O4N).其1H NMR和13C NMR数据与文献报道一致[14],故鉴定为异可利定 (Isocorydine).

化合物 4:红色针晶 (甲醇),m.p.＞200℃.MS m/z324(M+,C18H15NO4).1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:3.96(3H,s,3-OCH3),4.07(3H,s,9-OCH3),7.50(1H,s,1-H),6.90(1H,s,4-H),3.31(2H,m,5-H2),4.86(2H,m,6-H2),9.40(1H,s,8-H),7.66(1H,d,J=9.0Hz,11-H),7.74(1H,d,J=9.0 Hz,12-H),8.41(1H,s,13-H).上述波谱数据与文献报道基本一致[12,15],故鉴定为千金藤宁碱 (Stepharanine).

化合物 5:橘红色针晶 (甲醇),m.p.202～205℃.MS m/z 338(M+,C19H17NO4).其1H NMR和13CNMR数据与文献报道一致[16],故鉴定为药根碱(Jatrorrhizine).

化合物 6:黄色针晶 (甲醇),m.p.205～207℃.MSm/z 352(M+,C20H19NO4).其1H NMR和13C NMR数据与文献报道一致[17],故鉴定为巴马汀 (Palmatine).

化合物 7:无色片晶 (甲醇),m.p.140～142℃.MSm/z 355(M+,C21H25NO4).其1H NMR和13C NMR与文献报道一致[15,18],故鉴定为四氢巴马汀 (Tetrahydropalmatine).

4 结果与讨论

从河谷地不容中分离得到 7个生物碱成分,分别鉴定为千金藤碱 (1)、克班宁 (2)、异可利定 (3),千金藤宁碱 (4)、药根碱 (5)、巴马汀 (6)和四氢巴马汀 (7).其中,化合物 1～3为首次从该种植物中分离得到.研究结果丰富了对民族药物河谷地不容化学成分的认识,也为从内在物质基础的角度评价其药用价值提供了一些分析比较的线索和依据.

河谷地不容的生物碱成分主要属阿朴菲型 (化合物 1～3)、小檗碱型 (化合物 4～7),且阿朴菲型生物碱含量较高.从生物碱的结构类型看,河谷地不容和《云南省中药材标准》收载的地不容正品(Stephania epigaeaH.S.Lo)有相似性[6-8],但所含的具体化合物,尤其是高含量生物碱成分有明显区别,因此,从内在物质基础的比较来分析,河谷地不容当作地不容药材使用是否可行,还有待进一步的深入研究和探索.在目前的临床使用中,为保证药品安全,河谷地不容 (Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.)应视为药材地不容伪品,不得混用代用.

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(责任编辑王 琳)

Studies on the Alkaloids from the Ethno-Remedy Plants Stephania Intermedia H.S.Losp.Nov.

ZUO Ai-xue,LILi,RAO Gao-xiong
(KeyLaboratory of Ethnic-Pha rmacy of Yunnan Higher School,Yunnan University of Traditional ChineseMedicine,Kunming 650500,China)

This research is an analysis of the chemical constituents ofStephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.,an ethno-medicine,in which seven alkaloids were isolated and characterized as(1)Stephanine,(2)Crebanine,(3)isocorydine,(4)Stepharanine,(5)Jatrorrhizine,(6)Palmatine and(7)Tetrahydro-pa lmatine.Among them,compounds 1—3 were isolated from this plant for the first t ime.The results showed that the structures of alkaloids inS.inter m ediaandS.epigaeawere similar,but the major componentswere quite different.Thus,it is no good to replaceS.epigaeawithS.inter m ediafor the sake of safety.

Stephania inter m ediaH.S.Lo sp.Nov.;chemical constituents;alkaloids

Q 946.88

A

1672-8513(2011)01-0017-03

10.3969/j.issn.1672-8513.2011.01.004

2010-10-26.

左爱学 (1978-),男,博士.主要研究方向:中草药、民族药的化学成分及质量标准.

饶高雄 (1965-),男,教授.主要研究方向:天然药物化学.