新辅助化疗对胃癌组织 COX-2和 Survivin蛋白表达的影响

王耿泽 ,厉 冰,任 武

南阳市中心医院普外科南阳 473000

(2010-05-24收稿 责任编辑 李沛寰)

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,在我国其病死总数占全部恶性肿瘤死亡总数的 23.93%,且预后较差[1]。随着治疗模式的转变,新辅助化疗(neoadjuvant chemotherapy,NC)已成为目前综合治疗研究的热点。如何在选择药物前判断其敏感程度从而真正实现个体化治疗是目前胃癌综合治疗面临的重要问题。该研究以进展期胃癌为研究对象,比较患者胃癌组织 cyclooxygenae-2(COX-2)、Survivin在进展期胃癌新辅助化疗前后的变化及在新辅助化疗敏感组、不敏感组表达的差异,探讨 COX-2、Survivin 2种蛋白表达对预测新辅助化疗敏感性的作用,为个体化治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集 2006年 10月至 2008年 11月南阳中心医院普外科收治的胃癌患者 96例,均经胃镜活检明确诊断。其中男 61例,女 35例,年龄35～82岁,中位年龄 63.5岁。96例患者分为 2组,实验组 42例,接受新辅助化疗 +手术;对照组 54例,常规手术治疗。

1.2 分组与处理 实验组患者应用 FOLFOX 4新辅助化疗方案即奥沙利铂(OXA)85 mg/m2静脉滴注,第 1天;亚叶酸钙(LV)200 mg/m2静脉滴注,2 h后推注 5-氟尿嘧啶(5-Fu)400 mg/m2,后续 5-Fu 600 mg/m2,持续 22 h,恒速静脉输入,第 1、2天;每 2周为 1周期,共 4个周期[2]。结束后 3周手术,留取手术标本;无法手术者化疗后重新取胃组织活检。对照组常规手术前后分别留取相应标本。根据术前术后 CT、内镜超声、胃镜等检查结果,应用实体瘤疗效评价标准 RECIST评估化疗疗效[3],将实验组患者分为敏感和不敏感 2组。

1.3 胃癌组织中COX-2和Survivin蛋白的表达常规免疫组织化学 SP法检测。COX-2单抗(工作浓度 1∶200)、Survivin多抗 (工作浓度 1∶200)和SP免疫组化试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司,阳性强度判断采用半定量积分法。COX-2以胞质、Survivin以细胞核和(或)细胞质出现棕黄颗粒为阳性细胞。选择 5个高倍视野(×400),每个视野计数 100个肿瘤细胞,采用半定量积分法[4]判断结果:阳性细胞数 ～5%为 0分,～25%为 1分,～50%为 2分,～75%为 3分,＞75%为 4分;阳性强度以多数细胞的呈色反应为准,淡黄色为 1分,棕黄色为 2分,棕褐色为 3分。2者之积为最后评分。

1.4 统计学处理 采用 SPSS 12.0分析,2组患者处理前后胃癌组织 COX-2和 Survivin蛋白的表达和实验组不同疗效患者处理前后胃癌组织 COX-2、Survivin蛋白表达差值的比较,采用两独立样本 t检验,检验水准 α=0.05。

2 结果

2.1 2 组患者胃组织 COX-2和 Survivin蛋白的表达 见图 1和表 1。

图 1 实验组患者胃癌组织中COX-2和Survivin蛋白的表达(SP,×400)A:处理前 COX-2;B:处理前 Survivin;C:处理后 COX-2;D:处理后 Survivin。

表 1 2组患者处理前后胃组织COX-2和 Survivin差值的比较

2.2 实验组胃癌组织 COX-2、Survivin的表达见表 2。

表 2 实验组不同疗效患者处理前后胃癌组织 COX-2和Survivin差值的比较

3 讨论

目前,进展期胃癌的治疗已进入一个理性阶段,向“手术 +围手术期化疗”的模式转变[5]。新辅助化疗作为一种较为有效的方法越来越受到人们的重视。近年来的研究[6]表明 COX-2不仅可以在细胞因子、激素、致癌物质的多种诱导因子的刺激下快速表达参与多种病理生理过程,而且与肿瘤的发生发展也有密切的联系。Survivin蛋白是一种新近发现的凋亡抑制蛋白成员,是一种癌基因,参与肿瘤的发生发展,是一种具有潜在价值的肿瘤标记物。因此作者研究新辅助化疗对 COX-2、Survivin蛋白表达的影响,探讨两种蛋白能否作为进展期胃癌新辅助化疗的敏感性指标,为胃癌的个体化治疗提供理论依据和参考。

胃癌的新辅助化疗是在治疗头颈、乳腺、膀胱、前列腺等部位恶性肿瘤取得成功的基础上开展起来的,作为进展期胃癌综合治疗的辅助手段越来越得到人们的接受和认可[7-8]。资料[9]显示,在宫颈癌研究中 COX-2表达增加能降低宫颈浸润癌患者的生存率,COX-2高表达是接受新辅助化疗及手术治疗的宫颈癌患者预后不良的一个标志物。该研究结果显示,新辅助化疗后胃癌组织中 COX-2的表达显著下降,对照组未经新辅助化疗,术前术后表达的变化不明显。提示新辅助化疗后胃癌肿瘤细胞增殖活性出现明显下降,从而有可能使其恶性潜能得以下降。新辅助化疗后胃癌组织中 Survivin的表达显著上升,对照组未经新辅助化疗,术前术后表达的变化不明显。目前具体原因不甚明确。推测这种表达的增加有两种可能,一种是化疗对 Survivin表达较高的癌细胞不敏感,在杀伤了大部分敏感细胞后,剩下的是不敏感的 Survivin表达较高的癌细胞;另一种情况是化疗本身可能诱发了 Survivin的表达,增加了肿瘤细胞的生存力。各种外在因素如化疗对肿瘤组织的破坏有可能引起肿瘤细胞继发性的自身保护,Survivin表达的升高可能就是这种保护的一种。Survivin的表达可能参与了细胞化疗耐受,抑制 Survivin表达,有可能逆转化疗抵抗,为化学药物治疗肿瘤提供了一个新的途径。Survivin可作为胃癌耐药性的标志之一。

化疗耐受是化疗的主要障碍之一。由于不同个体肿瘤细胞对化疗药物的敏感性不同及临床的经验用药等原因使化疗效果并不尽如人意,目前化疗方案的有效率多在 50%左右,约一半患者对初次化疗方案并不敏感(原发耐药),也有一部分会出现继发耐药[10]。该研究结果表明 COX-2新辅助化疗前后表达的变化在敏感组不敏感组两组之间无明显差异,而 Survivin新辅助化疗前后表达的变化在敏感组不敏感组两组之间有显著性差异。Survivin的表达在敏感组化疗前呈相对低表达,在不敏感组呈相对高表达。由此可见 Survivin的表达与胃癌新辅助化疗的敏感性存在一定联系,Survivin蛋白低表达者对新辅助化疗相对敏感,可将 Survivin低表达作为胃癌新辅助化疗的一种筛选指标,为胃癌的临床化疗提供个体化用药的实验资料和依据。

总之,Survivin蛋白低表达可作为胃癌新辅助化疗的一种筛选指标和评判标准。

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