血清中sHLA-G水平与自然流产的关系

范 倩，汪 泓，朱雄峰，王 萍

(皖南医学院 1.医学一系;2.微生物学与免疫学教研室，安徽 芜湖 241002)

妊娠过程中，胎儿对于母体来说作为一种特殊的同种异体移植物，妊娠成功与否主要取决于母体对胎儿产生保护性免疫应答即母胎免疫耐受。有研究显示，sHLA-G分子在抑制胎儿同种异体排斥过程中可能有决定性的作用，被认为可能是妊娠期一种特异性免疫抑制分子［1］，在维持正常妊娠中起着重要的免疫调节作用［2］。鉴于此，我们通过定量测定正常妊娠与自然流产患者血清中sHLA-G的水平，比较并探讨血清中sHLA-G的表达水平与正常妊娠的关系。

1 资料和方法

1.1 研究资料 随机选择2010年3～6月在皖南医学院门诊部体检并确诊为妊娠的正常妊娠妇女16 例，平均年龄为(28.1 ±4.1)岁，平均孕周为(8.9±7.1)周;自然流产患者 16 例，平均年龄为(29.1±5.8)岁，平均孕周为(8.3 ±3.0)周。所有研究对象经超声以及妇科检查显示子宫增大符合孕周，夫妻双方染色体正常，内分泌检查无异常，排除全身或感染性疾病，排除遗传疾病，同时经抗心磷脂抗体(ACL)等自身抗体筛查，均为阴性者，双方免疫状态检查正常。

1.2 方法 正常妊娠妇女与自然流产患者于体检时抽取肘静脉血3～5 ml，经离心(4 000 r/min，10 min)，留取血清，置于－20℃冻存。采用双抗夹心ELISA法(试剂盒购自史瑞可公司)，检测可溶性HLA-G(sHLA-G)的水平，具体操作严格按照试剂盒的说明书进行。本实验测定的为总的sHLA-G水平。选用酶标仪(Anthos Lucy 2)测定吸光度(A)值，波长为450 nm。

1.3 统计学分析 采用ELISA Calc回归/拟合计算程序V 0.1和SPSS 13.0进行统计学分析，结果以±s表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

经检测16例正常妊娠妇女血清sHLA-G的水平为(1.37±1.44)IU ∕ ml，16 例自然流产患者血清 sHLA-G 的水平为(0.57 ±0.27)IU/ml，后者血清中的sHLA-G水平明显低于前者，两组之间比较有统计学意义(t=2.166，P ＜0.05)，表明血清中的sHLA-G水平与妊娠的成功与否相关。

3 讨论

人类白细胞G抗原(HLA-G)作为一种新发现的非经典HLA-I类分子，在母-胎免疫耐受及维持正常妊娠中起重要的免疫调节作用［2］。HLA-G分子主要存在于绒毛远端的细胞滋养层。其通过与免疫活性细胞(如杀伤性T细胞、NK细胞等)和有关因子如IL-2等发生作用，阻断母体对胎儿的免疫应答，保护妊娠顺利进行。

最早发现HLA-G在体内的分布仅限于母胎界面的绒毛膜滋养层细胞上，但随着有效检测水平的发展，发现如血清、血浆、羊水等体液和培养的滋养细胞上清液中均可检测到sHLA-G［3］。sHLA-G主要由胎盘组织分泌，通过母-胎屏障而进入母体血液循环，有3种形式存在，即 sHLA-G1、G2、G3。其通过体液循环遍布全身各组织器官，对机体起系统化免疫调节作用，保护胎儿免受母体免疫系统的攻击而维持正常的妊娠［4］。

在胚胎着床期间，子宫蜕膜有大量浸润的免疫活性细胞，其中70% ～80%是NK细胞，sHLA-G能抑制NK细胞的杀伤活性。其通过与多种NK细胞抑制性受体结合，下调蜕膜NK细胞对胎儿的杀伤，此外，sHLA-G还可促使CD8+T细胞表达并分泌Fas配体，导致CD8+T细胞发生Fas/FasL程序性死亡，从而杀伤同种异体反应性T细胞，抑制其对胎儿的细胞毒作用［5］;又可诱导Th2型细胞因子IL-4、IL-10等的产生，抑制 TNF-α的分泌，使Th1/Th2平衡向Th2型方向移动，减少了Th1介导的母体对胎儿的免疫排斥［6］，因此，HLA-G的减少可能使滋养细胞易受母体免疫系统攻击，影响着床和妊娠维持，从而导致妊娠的失败。

本组通过定量测定显示，正常妊娠组血清中sHLA-G水平显著高于自然流产组，提示sHLA-G对妊娠成功有重要影响。Fuzzi等［4］通过检测285份体外受精(IVF)早期胚胎期培养液中的sHLA-G，发现胚胎植入成功的仅见于培养液中有sHLA-G表达者，提示HLA-G在早期胚胎的表达是获得妊娠成功的基本和必要条件。Yie等［7］回顾性研究亦发现分泌sHLA-G的胚胎卵裂率活产率显著高于sHLA-G缺乏者，并指出sHLA-G不足使得胚胎植入过程中容易被母体的免疫细胞攻击，血液中sHLA-G是胚胎早期成功植入的重要因素，此外还认为胚胎sHLA-G水平和卵裂率对妊娠结局具一定预测价值。Athanassakis等［8］也发现，反复自然流产(RSA)患者血清中，sHLA-G水平较同期正常妊娠下降42%，而可溶性人类白细胞DR抗原(sHLA-DR)则上升63%，提示排斥反应增强。综上所述，sHLA-G对维持正常妊娠可能有重要作用，sHLA-G不足可能使得胚胎在发育过程中受母体的免疫细胞攻击，而导致妊娠失败和流产的发生。但关于sHLA-G的生物学作用及其机制在很多方面还存在众多疑问，仍需要进一步地研究探讨。

［1］HUNT JS，JADHAV L，CHU W，et al.Soluble HLA-G circulates in maternal blood during pregnancy［J］.Am J Obstet Gynecol，2000，183(3):682 －688.

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