鹿鞭及其伪品鉴定方法的研究进展
2011-08-15张丽华
刘 洋 张丽华 薄 艳
1.吉林市中心医院药学部,吉林 132002;2.北华大学药学院,吉林 132013
鹿鞭(Testis et Penis Cervi)系鹿科动物梅花鹿(Cervus nippon Temm inck)、马鹿(C. elaphusL.)的干燥带睾的阴茎。其味甘、咸,性温,具有补肾、壮阳、益精的功能,临床可用于治疗劳损、腰膝酸痛、肾虚耳聋、耳鸣、阳痿、宫冷不孕等症。自古以来其组方很多,如金丹、鹿肾粥以及三鞭、三肾丸等。因其用药历史悠久,疗效确切,货源稀少,价格昂贵,为常用珍贵中药之一。
我国鹿的种类主要有梅花鹿、马鹿、白鹿、白唇鹿、水鹿等,《中华人民共和国卫生部药品标准》收载的正品来源多为鹿科动物梅花鹿和马鹿两种。故正品分为梅花鹿鞭、马鹿鞭两种,主产于吉林、辽宁、黑龙江及河北等地。在商品市场上各种充伪品屡见不鲜,本研究就鹿鞭的鉴定方面的研究进展综述如下。
1 性状鉴别
主要从整体性状、色泽、龟头、尿道、横环纹、包皮及锋毛形状等方面来鉴别。
1.1 正品
马鹿鞭阴茎呈两侧稍扁的长圆柱形,长45~60 cm,直径2~3 cm。表面灰黄色至黄棕色,呈半透明状。在阴茎体两侧中间,有纵沟槽,顶端包皮略呈囊状或卷曲成环套状隆起,包皮前端形成锋毛,在锋毛上呈现毛锋端色重、毛根部色浅的现象,也有呈现褐色、褐黑色毛梢;毛粗而扁,富弹性。龟头藏于包皮内或裸露,其先端钝圆,整个龟头似扁指状,可见纵棱及纵沟,表面具致密的短线状纹理。在阴茎全长靠基部端的1/3~1/2处附有睾丸1 对,睾丸呈长椭圆形,或鼓或瘪,棕褐色,有的具长的系带(输精管),质坚硬,不易折断,或切断面可见最外层为纤维体(俗称皮膜),厚约1~2 mm,中间大部分为疏松的海绵体,可见尿道口和血管孔。气腥,味微咸。
梅花鹿鞭与马鹿鞭的区别是前者较短小,长25~35 cm,直径1~2 cm。龟头长2.8~10 cm。先端渐尖,多皱缩,表面灰黄色、黄棕色。睾丸长椭圆形。
1.2 伪品
1.2.1 牛鞭 稍扁的长圆柱形,全长35~60 cm,直径2~3 cm,表面黄白色,不具光泽。腹部两侧的中间有一条纵沟槽,包皮一般无毛,个别夹有可脱落毛。龟头圆锥形,先端尖,尿道口在龟头先端尖部。一般无睾丸,带睾丸者形似茄苞状,较大,表面紫褐色或棕黄色。阴茎外层纤维体厚以致中间海绵体的环形肋纹不明显,热水泡后膻腥气极明显,味微咸。
1.2.2 驴鞭 长圆柱形,稍弯曲,表面黄棕色,不具光泽。背腹两侧的中间有一条纵沟槽,包皮一般无毛。龟头较大,呈黑色,多皱缩,有横向纹理。睾丸呈类圆形。
1.2.3 用猪皮制作的假鹿鞭
1.2.4 用动物的肠制作的假鹿鞭
1.2.5 用其他动物的腿筋伪造
1.3 真伪鹿鞭各有其不同特点
真鹿鞭特点明显,药用价值高 ,伪假鹿鞭无药理作用,不能药用,特别是粘接的鹿鞭,由于使用工业用胶还会对人体健康有害[1-2]。
2 理化鉴别
2.1 显微鉴别
利用动物残留兽毛对正品梅花鹿鞭、马鹿鞭及混淆品驯鹿鞭,伪品驴鞭、牛鞭进行显微鉴别,不同科动物兽毛显微结构差异较大,同科的则总体相同,其毛髓质细胞形态、发达程度均不相同。为鹿鞭以原粉存在于中成药中的鉴别提供了有力依据[3]。
2.2 光谱鉴别
比较氯仿浸出物的紫外光谱,鹿鞭与其伪品牛鞭略有区别。红外光谱和紫外光谱,特别是前者,对鹿鞭及其伪品牛鞭具有鉴别意义,但考虑到受样品来源、实验条件的局限,此种鉴别方法还需要深入研究。
2.3 薄层鉴别
利用薄层色谱法,在不同的展开剂系统中,分别对鹿鞭及其类似品貂鞭、驴肾、狗肾中的氨基酸、甾体类成分作了比较鉴别。结果发现,在与天门冬氨酸、甘氨酸及胆甾醇相应的位置上,鹿鞭及其类似品均有相同颜色的斑点。
2.4 电泳鉴别
根据电泳中蛋白质的迁移速率不同,可将电泳区带分为A、B、C三个区域。梅花鹿鞭和马鹿鞭各有两条区带,牛鞭有1条区带。梅花鹿鞭和马鹿鞭在A区和C区各有1条区带,在B区没有区带,并且各区带的迁移率相同[4]。
2.5 X线摄片影像技术
通过X线摄片,参与比较的鹿鞭除白唇鹿鞭外表及摄片均无斜肌纹理外,无论外表有无斜肌纹理,只有断面呈纤维状结构的,其摄片均可清晰见到斜肌纹理结构。牛鞭摄片大多为极密集的点状或短直线状细碎纹理,少数呈细短,稀疏的斜肌纹理。
3 生物学鉴别
3.1 免疫学鉴别
采用免疫学方法,即以大分子抗原物质免疫动物而获得抗血清,后者与免疫动物的抗原物质可发生免疫血清学反应,这种反应具有高效、专一的特点,从而达到用已知抗体鉴定未知抗原的目的。
3.2 DNA分子标记鉴别
近年来随着分子生物技术的发展,已广泛应用于中药材品种的鉴别。DNA分子作为遗传信息的直接载体,不受外界因素和生物体发育阶段及器官组织差异的影响,以DNA分子特征进行物种鉴别准确可靠。
用于中药材品种高特异性鉴别引物基础上的PCR鉴别技术,虽然也是以PCR反应为基础, 但在中药鉴定中是一个新的实验设计思路。通过对正品药材及其伪品的某些DNA片段的序列研究,设计出高度特异性的正品药材鉴别引物。当有样本需要鉴定时,提取DNA后,用鉴别引物对样本的DNA进行一次PCR反应,经电泳检测,可达到准确鉴别样本真伪的目的,检测时不需与已知正品药材作对照实验[5-6]。
中药材的鉴定最终是对其生物学本质进行鉴定,寻找有效的鉴定方法是实现中药现代化的迫切任务。DNA分子标记鉴定技术的优势是特异性强、稳定性好,结果直观、可靠,便于进一步分析。存在的问题:方法不够完善,资料不丰富,需专门仪器和专业人员,成本偏高,已涉及的中药品种和研究人员不够广泛,无法有效推广到生产第一线。
在今后的研究中,推动DNA分子标记技术对更多中药品种进行鉴定,比较各种方法的特点和适用范围,将更多的DNA分子标记技术应用到该领域;开发简便易行的新方法;降低成本提高效率。
相信DNA分子标记技术将会与传统鉴定方法并存发展,共同阐明中药材真伪优劣,成为中药材鉴定的有力工具,共同推进中药现代化进程。
[1]姚玉霞,李泽鸿.感官鉴别真伪鹿鞭[J].经济动物学报,2000,4(4):21-23.
[2]李慧珍,李水福.鹿鞭的真伪优劣鉴定[J].中国药业,2008,17(10):66-69.
[3]王远志,李锋,康廷国.鞭类药材电泳及显微鉴定研究[J].中药科技,2004,2(6):34-35.
[4]金跃明,李峰.鹿鞭药材及伪品的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别研究[J].辽宁中医学院学报,2005,7(6):623-625.
[5]Dooley JB,Kelly EP,Stephen DG,et al.Detection of meat[J].Animal Sciences,2007,31(3):159-163.
[6]崔雨新,王小明,梁云媚.在线粒体DNA细胞色素b基因序列水平上对鬣羚系统发育的研究[J].兽类学报,2001,21(4):251-258.