糖槭叶抗氧化活性研究
2011-08-11赵宏张宇舒尊鹏
赵宏,张宇,舒尊鹏
(1.黑龙江省教育厅生物药制剂重点实验室,佳木斯大学,黑龙江 佳木斯 154002;2.黑龙江中医药大学,黑龙江 哈尔滨 150040)
糖槭(Acer saccharum),槭树科槭属落叶乔木。原产北美洲,据资料记载,在我国糖槭为引进栽培种[1-2]。目前,国内关于糖槭的药用研究少见,初步证实其中含有黄酮、皂苷、多糖、鞣质等[3]。本实验在糖槭叶有效成分的系统预试结果基础上,分别对其醇提液和多糖进行体内、体外的抗氧化研究,均取得理想效果。
1 材料与方法
1.1 材料
糖槭叶采自黑龙江省佳木斯市。
KQ-500DE型数控超声波提取器(昆山);RE-52系列旋转蒸发仪(上海);SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州);UV757CRT紫外可见分光光度计(上海);DZF-150型数显小型真空干燥箱(郑州);80-2离心机(上海);电子自旋共振谱仪(日本);SOD活性测定试剂盒(南京);MDA含量测定试剂盒(南京);生理盐水;冰醋酸;95%乙醇;无水乙醇;乙醚;正丁醇。
1.2 体内抗氧化实验供试液的制备
取500g阴干糖槭叶粉碎并置于5 000ml的锥形瓶中,90%乙醇溶液浸泡过夜,60℃超声提取2次,30min/次,合并提取液,减压浓缩成浸膏。用蒸馏水制得小剂量供试液(2g/mL)和大剂量供试液(4g/mL),4℃保存备用。
1.3 氧化模型造模
1.4 糖槭叶对血清中SOD活性的测定
按试剂盒说明程序进行,用紫外可见分光光度计在550nm波长下测定吸光度并记录,按下式计算SOD活力,用t检验进行统计学处理。
1.5 糖槭叶对血清中MDA含量测定
按试剂盒说明程序进行,用紫外可见分光光度计在535nm波长下测定吸光度并记录,按下式计算MDA含量,用t检验进行统计学处理。
1.6 糖槭叶多糖的提取
1.7 抗氧化活性测定
送样于日本高知大学,采用SOD Assay Kit-WST(Dojindo Molecular Technologies,INC)测定SOD活性;Griess法在540nm下测定溶液中的NO-2和NO-3的总量;ESR法测定DPPH消去能力,同时与黄芪和女贞子的多糖抗氧化活性进行比较。
2 结果
2.1 糖槭叶体内抗氧化活性
糖槭叶提取液能够明显增强D-半乳糖致衰老模型小鼠血清中SOD活性(P<0.01)和MDA含量(P<0.05),结果见表1、表2。
表1 糖槭叶对小鼠血清中SOD活性的影响(s)
表1 糖槭叶对小鼠血清中SOD活性的影响(s)
序号 组别 n SOD(U/ml)1 空白对照组12 16.20 ±3.00 2 模型组 12 9.72±0.69 3 小剂量给药组 11 39.70±8.57 4 大剂量给药组10 22.56 ±3.08
表2 糖槭叶对小鼠血清中MDA含量的影响(s)
表2 糖槭叶对小鼠血清中MDA含量的影响(s)
序号 组别 n MDA(nmol/ml)1 空白对照组12 27.43 ±2.28 2 模型组 12 35.96±5.08 3 小剂量给药组 11 15.29±4.02 4 大剂量给药组10 17.70 ±8.14
2.2 糖槭叶多糖体外抗氧化能力
在日本高知大学检测糖槭叶中多糖的SOD活性、对NO和DPPH的消去能力,结果详见图1、图2、图3。
图1 SOD样活性作用
图2 NO消去率
图3 DPPH消去性
3 讨论
大剂量给药组和小剂量给药组小鼠血液中的MDA的含量均低于空白对照组中的含量,但其中小剂量给药组的测定情况好于大剂量给药组;大剂量组和小剂量组小鼠血清中SOD活性均显著上升,其中仍是小剂量给药组的抗氧化能力强于大剂量给药组,分析原因是糖槭叶中含有大量的香豆素等毒性成分,大剂量给药组的剂量较大,造成小鼠慢性中毒反应而导致加速衰老。糖槭叶多糖的体外抗氧化活性低于黄芪多糖,却高于女贞子多糖。
糖槭因含有大量的糖类化合物而得名,其中单糖可用于食品生产,多糖则是近年天然药物化学界研究的热点活性成分,本研究发现,其具有明显的抗氧化活性,所以糖槭可以作为药用资源加以利用,具有一定开发价值。
[1]张宏达.种子植物系统学[M].北京:科学出版社,2004:317-318.
[2]周以良.黑龙江省树木志[M].哈尔滨:黑龙江科学技术出版社,1986:406.
[3]张宇,赵宏.糖槭夏果与越冬果的化学成分比较[J].黑龙江医药科学,2006,29(6):21 -22.