鸭免疫重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5+Re-4)后抗体水平分析

陈桂英

(青海省西宁市城中区总寨兽医站,青海 西宁 810003)

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类传染病。根据致病性的不同将禽流感分为高致病性禽流感(HPAI)和低致病性禽流感(IPAI),HPAI被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病,我国将其列为一类动物疫病[1]。近几年来,禽流感在世界各地反复出现,我国养禽业也一直受到禽流感的威胁。疫苗免疫仍是预防禽流感的有效手段之一,有关禽流感疫苗的免疫效果及抗体消长规律国内学者做了一些研究工作[2-5],但作为我国现阶段使用的主要疫苗,重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)免疫鸭的抗体动态变化尚未见报道。本试验分析了禽流感二价苗免疫鸭后抗体消长规律,以期为该疫苗的推广使用提供科学的试验依据。

1 材料与方法

1.1 疫苗 重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)3批,批号分别为200807、200808、200809,哈药集团生物疫苗有限公司生产。

1.2 血凝抑制(HI)试验用抗原 禽流感病毒H5亚型HI试验Re-4株和Re-5株抗原由哈尔滨维科生物技术开发公司生产,批号分别为 200702和200801。

1.3 标准阳性血清 哈尔滨维科生物技术开发公司生产。

1.4 试验动物 购自北京平谷种鸭场的1周龄北京麻鸭。

1.5 分组和接种 将新购进的1周龄北京麻鸭分别随机分成4组,每组10只。待鸭禽流感母源抗体衰减到4log2以下时,将重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)按推荐剂量免疫接种(0.5 mL/只),每批次1组,颈部皮下注射,首免3周后加强免疫1次。免疫后每隔2周翅静脉采血(1 m L/只)并分离血清。

1.6 HI抗体效价测定 按照“重组禽流感病毒H5亚型双价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)制造及检验试行规程”中血凝抑制(HI)试验操作术式进行。

2 结果

疫苗免疫鸭后HI抗体消长情况 不同批次的重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)均能有效地刺激鸭产生HI抗体,而且HI抗体效价的消长规律一致。免疫后第2周HI抗体效价达到2.7 log2～4.0 log2,第 4周达到4.0 log2～5.6 log2,加强免疫(首次免疫后第3周)后,各免疫组鸭HI抗体效价迅速升高,在加强免疫后第3周(首次免疫后第6周)达到最高值9.9 log2～11.0 log2。HI抗体效价在8周以后开始下降。首次免疫后16周抗体水平5.2 log2～5.9 log2之间,首次免疫后20周以后抗体水平均在4log2以下。不同批次的疫苗免疫组各个采样点的抗体效价t检验差异不显著(P＞0.05)。

图1 禽流感二价苗免疫鸭后的抗体变化水平

3 分析和讨论

鸭首次免疫后第 2周 HI抗体效价达到2.7log2～4.0log2,第4周达到4.0log2～5.6 log2。加强免疫后,免疫组鸭HI抗体效价迅速升高,首次免疫后第6周(加强免疫后3周)达到最高值9.9 log2～11.0log2。HI抗体效价在首次免疫后8周开始下降,20周后抗体水平均降至4log2以下,此时不足以抵御外界病毒侵袭[3]。所以,鸭加强免疫后才能达到较高的抗体水平,而且下次免疫时间不能超过4个月。

同时期内相应免疫组的 HI抗体效价Re-4株均稍高于Re-5株,这可能与疫苗在制备过程中的抗原量配比有关。

本次试验表明,鸭免疫禽流感疫苗时,要在首免20 d后加强免疫1次,方可抵御禽流感病毒侵袭。许多人认为禽流感病毒不易引起水禽发病,有一些水禽养殖场对禽流感的预防不太重视,只是免疫1次甚至不免疫。刘超男等[6]的研究表明,禽流感病毒不仅对鸡具有高致病性,而且对鸭也具有高致病性。因此,水禽养殖场不能忽视对禽流感的防控,加强疫苗免疫注射。本试验表明,鸭1次免疫禽流感二价苗后,抗体水平难以达到有效保护范围,只有加强免疫后,抗体能够保持较高水平,对禽流感具有较强的抵抗力。

由于受国家有关涉及HPAI研究要求的限制,本试验未进一步做攻毒保护试验,有关重组禽流感病毒H5亚型双价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)对鸭HPAI的攻毒保护情况没有继续进行。关于这种疫苗对鸭的攻毒保护情况还有待进一步试验研究。

[1] 世界动物卫生组织.服乳动物、禽、蜜蜂 A和B类病诊断试验和疫苗标准手册[M].农业部畜牧兽医局,译.北京:中国农业科学技术出版社,2002:197-206.

[2] 靳月生,姚学军,见满振,等.蛋鸡重组告知并行禽流感H 5N1(Re-1+Re-4)二价灭活疫苗免疫效果的评价[J].中国畜牧兽医,2008,35(7):92-93.

[3] NY/T769-2004.高致病性禽流感免疫技术规范[S].

[4] 陈坤永,翁良树,张祥解,等.种鸽免疫禽流感疫苗HI抗体水平消长规律的研究[J].养禽与禽病防治,2004(7):12-13.

[5] 何长生,朱良强,郑举,等.对重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1)在家禽免疫效果方面的调研[J].中国兽药杂志,2008,42(7):30-32.

[6] 刘超男,刘明,张云,等.H5N1亚型禽流感病毒的亚致病性研究[J].中国农业科学,2006(2):412-417.