公猪异味控制疫苗效力试验

刘志南,杨汉春

(中国农业大学动物医学院,北京 海淀 100193)

公猪异味(boar taint)是未去势公猪肉中存在的一种令人讨厌的异味、骚味、膻气。未去势公猪约有50%的几率出现异味,而母猪和去势过的公猪也有1%～3%存在异味[1]。产生公猪异味的成分,主要是两种化合物,即雄酮(androstenone)和粪臭素(skatole)。雄酮是由睾丸分泌的一种甾类化合物,粪臭素是小肠中色氨酸分解后的产物。这两种化合物具有高度的亲脂性,在猪的脂肪组织中优先累积,在猪肉烹制过程中释放出来[2]。

传统控制公猪异味的方法是手术去势。目前,手术去势仍是消除公猪异味十分有效的途径。然而,手术去势给仔猪带来巨大的应激和痛苦,增加感染和死亡几率,并剥夺了公猪的自然合成代谢因子。与公猪相比,去势猪要消耗更多的饲料,并且会导致猪的生长性能明显下降和过度的脂肪沉积[3-7]。

异普克(improvac)是一种公猪异味控制疫苗,可通过两次免疫替代传统的手术去势来达到控制公猪异味的目的,同时发挥公猪巨大的生产优势来获得更大利益。

本试验通过异普克免疫猪与手术去势公猪和完整公猪进行的对比,测定脂肪样本中的雄酮和粪臭素的含量,血清中的睾酮和免疫抗体水平,睾丸的宽度等来评价异普克的免疫效力,探讨在我国通过免疫来替代手术去势、进而提高养猪生产性能的可行性。

1 材料与方法

1.1 试验猪 广西某大型猪场,品种为杜长大三元杂交猪。

1.2 异普克 辉瑞澳大利亚Parkville生产厂提供,经农业部批准进口到中国。100 mL塑料瓶包装,2℃～8℃冷藏、避光保存。批号和有效期见表1。

表1 异普克疫苗和有效期

1.3 动物挑选、分组、分栏 试验中所有公猪的日龄差异最大1周,将每窝健康公猪随机分配到各试验组,使平均体重差异达到最小化。试验猪总数为400头,分成5组:手术去势组(T 01)80头,异普克组240头(3批疫苗 ×80头,T 02、T 03、T 04),对照组(不去势不免疫公猪,T 05)80头。生理盐水注射和异普克免疫均分别在15周龄和19周龄。23周龄时试验结束,屠宰所有试验猪。试验设计见表2。

表2 试验设计

所有试验猪在断奶时称重,根据同栏中体重差异最小化的原则按体重进行分栏。栏位是随机分配的。试验过程中可以变换各栏的分布位置,但栏内的试验动物不变。

1.4 异普克免疫 耳后皮下注射,两次免疫至少间隔4周。首免在15周龄,二免在19周龄。使用

0.5 英寸(12 mm)、16号针头和N J Philips Secure Plus 注射器。

1.5 样本采集和检测

1.5.1 血液样品 检测血清中睾酮和Gn RF(促性腺激素释放因子)抗体的水平。分别在首免前1 d和屠宰前1 d,从颈静脉采集血样约10 mL,分离血清。上海Frontage实验室,应用ELISA测定血清中Gn RF抗体水平,以液相色谱-串联质谱色谱法(LC-MS/MS)检测血清中睾酮的含量,检出限量LOQ为0.10 ng/m L。

1.5.2 脂肪样品 检测粪臭素和雄酮含量。屠宰时,分别采集所有试验猪的皮下脂肪20 g,标记后冷冻保存。上海 Frontage实验室,雄酮浓度以 LCMS方法检测(LOQ=0.20μg/g),用高效液相色谱荧光法检测粪臭素含量(LOQ=0.0187μg/g)。粪臭素感观阈值是0.200μg/g,雄酮为1.000μg/g。

1.6 睾丸宽度测量 在屠宰前采血时,用游标卡尺测量每头猪两个睾丸最宽处的宽度。

1.7 数据分析 首要效力变量是公猪异味参数(粪臭素、雄酮)和睾酮。次要效力变量是睾丸大小。所有的假设检验按照0.05的显著水平进行检验(双侧检验)。

2 结果与分析

2.1 脂肪样品

2.1.1 雄酮 T 05与其他处理组相比,雄酮浓度的最小均方(least square meat,LSM)显著高于其他处理组。T03免疫组中有1头猪(T 3386)雄酮浓度为0.604μg/g,此浓度值仍然低于感观异味阈值(1.000μg/g)。T 02,T 03和T04及 T 01,雄酮浓度均低于1.000μg/g的阈值(见表3)。

表3 脂肪样本中雄酮的最小均方 (μg/g)

2.1.2 粪臭素 粪臭素最小均方值(表4),T 05的粪臭素浓度显著高于其他各处理组。免疫组与T 01组相比,没有显著差异。

表4 脂肪样本中粪臭素的最小均方 (μg/g)

2.2 血清样品

2.2.1 睾酮 免疫前,T 01组显著低于其他各处理组(表5)。屠宰时,T 01和免疫各组睾酮浓度没有显著差异,重要的是疫苗免疫各组与 T 05组相比,睾酮水平显著下降(表6)。

表5 首免前血清中睾酮最小均方值 (ng/m L)

2.2.2 Gn RF抗体 T 01或T 05与其他任何处理组比较,血清中Gn RF的抗体滴度在免疫前没有显著差异(表7)。但屠宰前,免疫动物与非免疫动物相比,各免疫组Gn RF的抗体滴度显著高于T 01组和 T 05组(表8)。

表6 屠宰前血清中睾酮的最小均方值 (ng/m L)

2.3 睾丸宽度 屠宰前测量T 05和各免疫组猪的睾丸宽度(表 9)。免疫猪平均睾丸宽度减少约30%。在T 02、T 04组中各有1头猪,T 03组中有2头猪睾丸最宽处大于110 mm,T 05组73头猪中有36头大于110 mm。

表7 首免前GnRF抗体滴度的几何平均数

表8 屠宰前GnRF抗体滴度的几何平均数

注:T01 vs T02,T 03,T 04,P≤0.0001;T 05 vs T02,T03,T04,P≤0.0001

表9 屠宰时测量睾丸宽度 (mm)

3 结语

决定异普克效力的主要参数是公猪异味(粪臭素和雄酮)和睾酮。通过手术去势组(T 01)与3个免疫组(T 02,T 03和T 04)中的任意一组比较,脂肪中雄酮和粪臭素以及血清中睾酮浓度均无显著差异,3批异普克中任何一批均有效。因此,在国内现行的养猪生产条件下,异普克能够替代手术去势达到有效控制公猪异味的目的。

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