乙肝病毒感染或携带产妇检测乳汁乙肝病毒DNA结果分析

黄莲芬

广西壮族自治区北海市第二人民医院，广西北海 536000

慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染是严重影响健康的公共卫生问题，在我国HBV感染者约有1.3亿[1]。母婴传播是我国HBV感染的一个重要途径，也是乙肝高发的重要原因。有研究指出，30%～50%的HBV慢性携带者是由母婴传播引起的[2]。母婴传播主要有宫内感染、产道传播和产后传播3种传播方式。虽然，母乳喂养能够提供多种丰富的营养和免疫物质，但当前关于慢性乙型肝炎病毒感染的产妇是否应母乳喂养存在争议[3]。为此，笔者对86例HBV感染或携带的产妇进行乳汁乙肝病毒DNA检测，将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院妇产科住院分娩的乙肝病毒感染或携带的86例产妇作为研究对象，产妇年龄26～42岁。所有产妇均经血乙肝病毒检测，根据2000年全国病毒性肝炎学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》中乙肝的诊断标准确诊[4]。患者的肝功能丙氨酸氨基转移酶（ALT）均正常，无其他并发症。其中，84例足月产，2例早产。

1.2 研究分组

根据产妇HBV血清标志物分为大三阳组（A组）、小三阳组（B组）和双抗阳性组（C组）三组：A组23例患者（26.7%），患者血液检测显示 HBsAg、HBeAg和 HBcAb三者均为阳性；B组34例患者（39.5%），患者血液检测显示HBsAg、HBeAb和HBcAb三者均为阳性；C组29例患者（33.7%），患者血液检测显示HBeAb和HBcAb阳性。

1.3 方法

1.3.1 标本采集方法

1.3.1.1 产妇外周血的收集 抽取3 ml的产妇静脉血注入试管，静置60 min。之后，以3000 r/min的速率进行离心，约20 min后分离血清。将分离后的血清直接或保存在≥-20℃的冰箱内，待HBV-M和HBV-DNA检测。

1.3.1.2 乳汁的收集 产妇分娩3～5 d分泌初乳后，嘱产妇用清水或肥皂水清洗干净乳头，并对乳头进行消毒处理。对产妇乳房进行轻柔按摩，待乳腺管畅通后轻压乳晕，使乳汁流出。用清洁干燥的试管收集3～5 ml乳汁。以3000 r/min的速率进行离心，约10 min后取中层乳清，直接或保存在≥-20℃的冰箱内，待HBV-M和HBV-DNA检测。

1.3.2 标本检测方法

HBV-DNA采用杭州博日科技有限公司生产的Line-Gene荧光定量PCR检测系统和上海安亭GL-20G-Ⅱ高速冷冻离心机，HBV-DNA试剂为广州中山医科大学达安基因诊断中心提供，严格按说明书操作。母体乙肝五项均采用 ELISA方法，安图PHOMO全自动酶标仪，试剂由珠海丽珠试剂股份有限公司生产。

1.4 统计学方法

采用SPSS 13.0进行统计分析，计数资料采用百分率表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 孕妇血清免疫学指标与乳汁HBV-DNA阳性的关系

对三组HBV携带产妇乳汁中HBV-DNA检测结果进行分析，可知A组产妇乳汁中HBV-DNA阳性率最高，达78.3%，B组产妇乳汁中HBV-DNA阳性率为29.4%，C组产妇乳汁中HBV-DNA阳性率为10.3%。3组产妇乳汁中HBV-DNA阳性率比较，差异有高度统计学意义（χ2=26.74，P<0.001）。见表1。

表1 三组HBV携带产妇乳汁中HBV-DNA检测结果比较[n（%）]

2.2 产妇血清HBV-DNA病毒载量与乳汁HBV-DNA阳性的关系

本研究中，86例产妇血清的HBV-DNA病毒载量≤500copies/ml 25例，占29.1%；HBV-DNA病毒载量介于500～106copies/ml 18例，占20.9%，HBV-DNA病毒载量≥106copies/ml 43例，占50.0%。

对三组产妇血清HBV-DNA病毒载量中HBV-DNA检测结果进行分析，可知HBV-DNA≥106copies/ml时产妇乳汁中HBV-DNA阳性率最高，达18.6%。三组产妇乳汁中HBV-DNA阳性率比较，差异有高度统计学意义（χ2=8.82，P<0.01）。见表2。

3 讨论

母乳是婴儿获取营养成分和免疫物质的重要方法，是婴儿的天然食品。但是，对于感染HBV的乳母来说，母乳喂养是增加婴儿感染HBV的一种途径。乙型肝炎是一种严重危害人类健康的世界性传染病，母婴传播是我国乙型肝炎病毒传播的一个重要途径，也是我国乙肝高发的重要原因。

表2 孕妇血清HBV-DNA病毒载量与乳汁HBV-DNA阳性的关系[n（%）]

HBV母婴传播主要有宫内感染、产道感染和产后感染3个途径，其中，产后感染的主要介质是母乳[5]。有研究指出，HBV携带的产妇的乳汁中能够检出HBV-DNA，表明母乳喂养可能是HBV传播的重要途径[6]。有研究[7]通过乳母血清HBV指标进行判定，指出HBsAg阳性与HBeAg、抗-HBcIgM或HBcAg并存时，乳汁有一定的传染性，不宜哺乳。另外，早期的母乳中含有大量的淋巴细胞，存在HBV-DNA在母乳中整合和复制为HBV的可能性。当婴儿口腔、咽、食道、胃、肠道等任何一处消化道黏膜发生炎性水肿、渗出时，母乳中的HBV则能够通过毛细血管网进入婴儿血液循环，引起HBV感染。

HBV-DNA是HBV基因组成和复制的模板，因此，乳汁中检出HBV-DNA阳性直接地反映了乳汁中病毒存在的状态，是HBV感染的直接依据，也是衡量其传染性的重要依据[8]。有研究称[9]，乳汁中HBV-DNA的检出与血清HBeAg阳性并不完全一致，部分HBeAg阴性产妇乳汁中仍能检出HBVDNA。HBsAg和HBeAg双阳性的母亲通过母婴垂直传播感染新生儿的可能性高达90%；仅HBsAg阳性的母亲，新生儿有40%～70%为慢性乙肝病毒携带者[10]。

本文对孕妇血清免疫学指标与产妇乳汁中HBV-DNA阳性的关系进行分析，发现大三阳组的HBV-DNA阳性率最高，双抗阳性组的HBV-DNA阳性率最低，经检验大三阳组的产妇乳汁中HBV-DNA阳性率显著高于小三阳组和双抗阳性组。可见，乳母血清中乙肝感染程度与乳汁中HBVDNA水平呈正相关关系，即乳母血清中乙肝感染程度越高则乳汁中HBV-DNA阳性率越高。

通过对产妇血清中HBV-DNA病毒载量水平与乳汁HBV-DNA阳性率的关系进行分析发现，HBV-DNA≥106copies/ml时，乳汁HBV-DNA才有阳性检出。这与相关研究结果是一致的[8]。有学者采用ELISA法测定产妇血清和乳汁中的HBsAg和HBeAg滴度，指出高滴度HBeAg携带者母乳含有HBV-DNA，而低滴度含量很小[11]。

但也有研究认为母乳中HBV-DNA的含量显著低于血清中的浓度，胎儿宫内和产时感染病毒的数量和机会显著高于乳汁传播[12]。且一般在乳母的乳头皲裂出血或婴儿有消化道黏膜破损时，HBV阳性乳母才能将HBV病毒通过乳汁传染给婴儿[1]。

通过以上分析，笔者发现产妇血清中HBV水平的高低与乳汁中HBV成正相关关系。通过对母乳中HBV-DNA检测，决定是否采取母乳喂养是当前比较一致的观点。对于血清中HBV-DNA检测结果＜106copies/ml时，乳汁中没有检测出HBV-DNA阳性，这种情况下，建议对婴儿采取一定的免疫预防措施，继续母乳喂养。这与相关研究报道[2]结果相似。若乙肝病毒感染的母亲乳汁中检测出HBV-DNA，或乙肝病毒感染的母亲乳头有溃疡、出血，或母亲为乙肝大三阳伴有肝功能异常，则不建议进行母乳喂养，防止HBV通过乳汁传播。

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[3]Hill JB,Sheffield JS,Kim MJ,et al.Risk of hepatitis B transmission in breast-fed infants of chronic hepatitis B carriers[J].Obstel Gynecol,2002,99(6):1049

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[7]罗志粦,郑逊.HBsAg阳性产妇母乳喂养与乙肝病毒母婴传播的相关性研究[J].福建医药杂志,2010,32(5):45-47.

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