4种炙甘草样品的质量分析＊

高燕菁，林佳佳，张剑平，刘宝河

(首都医科大学附属北京地坛医院药剂科，北京 100015)

炙甘草又名蜜甘草、蜜炙甘草，为甘草片用蜂蜜拌匀，按照2005年版《中国药典(一部)》蜜炙法(附录ⅡD)，炒至黄色或深黄色，不粘手时取出摊晾，入药。甘草有健脾益气、清热解毒、润肺止咳、缓急止痛、调和诸药等功效，而炙甘草性甘温，偏于润肺和中、补脾和胃、益气复脉。目前，炙甘草的制作多采用药典方法，操作中难以掌握火候，太过易焦，不及则不能达到炮制要求，质量稳定性较差。生甘草炮制后，甘草酸含量会明显降低[1]。而《中国药典》对甘草以甘草酸和甘草苷的含量为质量检测指标，却没有给出炙甘草的质量评价标准。为了保证临床用药的安全性和稳定性，笔者对医院2008年4种炙甘草样品进行质量鉴定，希望探索出炙甘草饮片规范化的科学质量检测方法，以提高中药房的质量管理水平。

1 仪器与试药

Agilend 1100型系列液相色谱仪，配有G1314A紫外检测器、1314B DAD检测器、G1311A四元剃度泵、G1322A在线脱气装置、G1316A注温箱;Agilent 1100化学工作站;Sartorius BS110S1/万、BP211D1/十万型电子分析天平;KL3120D型超声清洗机、1200型自动进样器。傅立叶变换红外光谱仪(美国PE公司Spectrum one型)，中红外 DTGS检测器，测定范围4000～400 cm－1，分辨率 4 cm－1。4种炙甘草样品分别为炙甘草A(批号为101506401)、炙甘草B(批号为101507401)、炙甘草C(批号为101508401)、炙甘草D(批号为101509401)，产地均为内蒙古，由卫仁饮片厂炮制，各批次饮片的大小、色泽均有差异;溴化钾碎状晶体(干燥器内保存);炙甘草标准品由北京康仁堂药业有限公司提供。甘草酸铵对照品(批号为110731)和甘草苷对照品(批号为11610)由中国药品生物制品检定所提供;乙腈为色谱纯，甲醇、甲酸、磷酸、冰醋酸为分析纯，醋酸铵为化学纯，水为双蒸水。

2 方法与结果

2.1 含量测定

按照2005年版《中国药典(一部)》高效液相色谱法(附录ⅦD)进行测定。色谱条件与系统适用性试验、对照品溶液制备、供试品溶液制备，均按药典甘草含量测定项下规定执行[2]。结果见表1。可见，4种炙甘草样品的甘草酸及甘草苷含量均有差异。

表1 样品含量测定结果(%)

2.2 红外光谱指纹图谱测定

2.2.1 样品制备

将炙甘草药材低温干燥，粉碎，过200目筛。压片时取1～2 mg，加入约200 mg溴化钾碎状晶体的干燥粉末，置玛瑙研钵中。在红外烤灯下研匀，置模具中，压力为10 kg×1000，约20 s后取下模具，即可得到1～2 mm厚的样品片。

2.2.2 红外光谱测定

将样品片置红外光谱仪样品舱内，扫描16次，扫描时扣除水及二氧化碳的干扰。

2.2.3 数据处理

采用Perkin Elmer公司的Spec－tnnn for Windows软件，基线自动校正，13点平滑，吸光度归一化法，对检测图谱数据进行处理。

2.2.4 结果

在4000～400 cm－1范围内，4种炙甘草药材未见有明显的区别，红外光谱图见图1。对4种炙甘草饮片与标准甘草药材的相关性进行比较，相关系数分别为 0.9734，0.9669，0.9670，0.9565。结果表明，4种炙甘草样品的整体红外指纹图谱的峰形、峰位、相对峰高基本相同，具有的明显指纹特征，在3411，1023，1636，2927，1415，1077，578 cm－1等处均有特征吸收峰。4 种药材红外指纹图谱特征基本相同，且与标准样品的相关系数均大于0.9，相关性良好。

3 讨论

中药是天然产物，产地分散，具有内在不稳定性，加之受采收、炮制等多因素影响，药材质量差异很大。目前，中药房仍然采取眼看、手摸、鼻闻、口尝等方式鉴别药品真伪，缺乏科学严谨的检测标准;而以单一或几种活性成分(指标成分)来监控质量，由于活性成分并不一定是有效成分，亦难以此保证中药的药效。

图1 红外光谱图

含量测定方法是目前常用的质量控制手段，但需要仪器多、操作复杂、花费高，目前我国绝大多数中药房都没有条件应用。中药的药用功效由其药性及炮制方法等综合因素决定，单纯以一种成分的含量为指标比较片面。炙甘草在临床上广泛应用于脾胃虚弱、倦怠乏力、心动悸等疾病的治疗，说明其药理作用的物质基础是多样的，相应的质量评价指标也应该是多种指标的综合。采用红外光谱指纹图谱法，不但可以对炙甘草进行有效的鉴别，还可以判别各批次之间质量的稳定性，整个操作过程不过10 min。红外光谱指纹图谱法是中药质量宏观控制的一个快速、科学的检测手段。

目前中药质量控制和评价已由单一指标成分鉴别及含量测定方法，向以多组分相互依存的化学分布整体模式——指纹图谱模式递进，即由“点”向“面”递进。其中红外光谱指纹图谱反映的是中药整体质量信息，体现了中药功效的整体性和模糊性。药材自身外界因素(种质、地域、加工方法、贮存等)的差异，也能够从红外光谱上反映出来。而中药内各种化学成分(内在因素)只要质和量相对稳定，样品处理按统一要求进行，其红外光谱也是相对稳定的。因此，不同种中药材所含化学成分不同，在红外光区分子振动特征峰的峰位、峰形和峰强也就不同，故具有“指纹”特性，能够提供完整的特征图像。目前，美国食品和药物管理局、英国草药典、印度草药典、德国药用植物学会、加拿大药用植物学会均使用指纹图谱的质量控制方法[3]，表明中药指纹图谱技术已得到国际社会的认可。

基于此，尝试应用红外光谱指纹图谱对4个甘草样品进行分析，认为其能够提供完整特征的图像，准确形象地鉴别药材的真伪优劣。目前红外光谱指纹图谱法已被应用于中药材真伪鉴别、道地性识别和指纹图谱制定等领域，可以作为中药材鉴定和质量控制的依据和标准，应尽快将其引入实际工作中，并与基源鉴别和性状鉴别相结合，从而提升中药房药材质量鉴定的水平。

[1]王静竹，陈定一，赵现红.甘草及其炮制品中甘草酸含量的测定[J].中国中药杂志，1995，20(9):535.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:59.

[3]谢 青.现代色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用[J].海峡药学杂志，2007，19(11):96.