国槐槐枝及槐叶中芦丁含量比较

熊维政 ，金燕飞 ，姜家书 ，石 磊 ，张春霞

(1.河南羚锐制药股份有限公司，河南 信阳 465550;2.河南中医学院，河南 郑州 450008)

槐枝为豆科植物中槐 Sophora japonica L.的干燥嫩枝，其叶为槐叶。槐枝最早收载于《名医别录》，槐叶最早收载于《食疗本草》，二者在《本草纲目》等一些本草文献中均有论述[1]。近年来民间用槐枝治疗烧伤有较好的疗效，也是治疗烧伤药紫槐烧伤膏的主要药物组成之一;适量地食用槐叶及其制剂，对人体保健能起到积极的作用[2]。槐枝、槐叶均含有较多的黄酮类化合物，其中以芦丁为主[3－4]。芦丁又名芸香苷，有镇痛作用[5]，还具有抗癌、抗感染、抗过敏、抗菌、抗病毒、抗糖尿病、抗骨质疏松、抗血栓、抗辐射、抑制增生、保护肝脏和心血管等多种生理活性，因而在药品及食品的开发应用中越来越受到关注。为获得优质药材，更好地开发和利用芦丁资源，笔者对槐枝、槐叶中的芦丁含量进行了考察，现报道如下。

1 仪器和材料

岛津LC－2010AHT型高效液相色谱系统，包括四元泵、在线真空脱气机、自动进样器柱温箱、LC－Solution色谱工作站(日本Shimadzu公司);KQ－250DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。芦丁对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号为100080－200707);甲醇为色谱纯(天津市四友精细化学品有限公司)，冰醋酸为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)，水为娃哈哈纯净水。槐枝为采集在同一植株、同为春季、不同生长年限的枝条，同一植株、嫩枝的枝条木质部，同为春季、不同植株的嫩枝;槐叶，采集时间为槐叶中芦丁含量高的五月[2]。将所采集的槐枝(切段)、槐叶低温干燥，粉碎，过三号筛备用。采集地点为河南省信阳市新县城郊，原植物经河南省信阳市药品检验所潘永峰教授鉴定均为豆科植物中槐 Sophora japonica L.。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[6]与系统适用性试验

色谱柱:Agilent C18柱 (250 mm × 4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇 －1%冰醋酸(32 ∶68);检测波长:257 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;进样量:10 μL。在此条件下，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品10 mg，加甲醇100 mL，制成每1 mL含0.1 mg的溶液，摇匀，即得对照品溶液。取各样品粉末0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称定质量，超声处理(功率250 W，频率25 kHz)30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，滤过，精密量取续滤液2 mL，置 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，0.45 μm 滤膜滤过，作为供试品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察:精密吸取对照品溶液 2，4，6，8，10，14，16，20 μL，按拟订的色谱条件测定，以峰面积(Y)为纵坐标、进样量(X)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=4.010X－3.567，r=0.999(n=8)。结果表明，芦丁质量浓度在 0.2210～2.210 g/L范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验:精密吸取对照品溶液10 μL，按2.1项下色谱条件重复进样6次，测定槐枝中芦丁的峰面积。结果峰面积的 RSD为1.06%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:精密吸取供试品溶液 10 μL，分别在 0，3，6，8，12，24 h时测定槐枝中芦丁的峰面积。结果峰面积的 RSD为1.21%(n=6)，表明供试品溶液在24 h内稳定。

重复性试验:取槐枝药材粉末，按2.2项下方法同时制备6份供试品溶液，测定峰面积。结果峰面积的 RSD为1.18%(n=6)，表明该方法重复性较好。

加样回收试验:精密称取已知含量的槐枝药材粉末0.25 g，共9 份，分别精密加入对照品贮备液 2，2，2，3，3，3，5，5，5 mL，按照供试品溶液制备方法制备溶液并测定芦丁峰面积，计算回收率。结果见表1。

表1 芦丁加样回收试验结果(n=9)

2.4 样品含量测定

分别精密量取各供试品溶液 10 μL，按拟订的色谱条件测定槐枝、槐叶中芦丁的峰面积，计算芦丁含量。结果见表2。

表2 槐枝与槐叶中芦丁含量比较结果

3 讨论

试验结果显示，同一植株、不同生长年限的槐枝中芦丁的含量不同，嫩枝中芦丁含量最高，2年生枝条次之，3年生枝条中芦丁含量最低。说明槐枝中芦丁的含量随着其生长年限的增加而减少，这为寻找芦丁含量高、优质的镇痛药物槐枝提供了依据。不同槐树植株中嫩枝的芦丁含量也不相同，这说明槐树嫩枝中芦丁含量的高低与槐树生长环境、植株的大小有关，提示在寻找中药材槐枝时要注意这一问题。而在同一植株嫩枝的不同部位中，槐枝枝皮中芦丁的含量最高，木质部中也含有芦丁。虽然木质部中芦丁含量较低，但为了扩大芦丁来源，提高槐枝各部位的利用率，木质部也具有利用价值。

本试验还对不同植株的槐叶中芦丁含量进行了测定，有些植株的槐叶中芦丁含量比枝条中含量还要高，说明槐叶也可作为芦丁提取的一个重要来源，这为进一步扩大芦丁的天然来源提供了参考，同时也为进一步开发槐叶制剂奠定了基础。

[1]明·李时珍.本草纲目(校订本)·下册[M].北京:人民卫生出版社，1982:2005－2006.

[2]王 憬，刘景东，勾凌燕，等.国槐槐叶中芦丁含量与生长时间关系的研究[J].现代中药研究与实践，2010，24(3):65.

[3]王春桃，唐于平，周 玲，等.槐枝皮中黄酮类成分研究[J].江苏中医药，2008，48(7):65.

[4]张治军，饶伟文.槐枝不同部位中芦丁含量的比较[J].海峡药学，2009，21(9):69.

[5]宋必卫，马传庚，田 薇，等.芦丁的镇痛作用[J].安徽医科大学学报，1995，30(3):177.

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国中医药科技出版社，2010:333－334.