多发性骨髓瘤患者血清骨桥蛋白及TNF-α检测的临床意义

周 健，柳小平

(南通大学附属东台医院，江苏南通224200)

多发性骨髓瘤(MM)是一种骨髓浆细胞恶性肿瘤，其发病机理尚不十分明确，至今仍无有效的治愈手段。MM临床特征以患者骨髓中大量浆细胞的克隆性增生最为显著，并激活破骨细胞引起骨质破坏。研究显示，MM的病程受多种细胞因子的调控。为此本研究通过检测MM患者血清骨桥蛋白(OPN)和TNF-α水平，探讨OPN和TNF-α在MM的辅助诊断及预后判断中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2008年1月～2009年8月南通大学附属东台医院和苏州大学附属第一人民医院收治MM患者33例，其诊断均符合张之南等［1］主编的《血液病诊断及疗效标准》。男22例、女11例，年龄39～70(57.78±5.09)岁。33例患者中，初诊10例，复发16例，缓解7例。临床分期Ⅰ期3例、Ⅱa期7例、Ⅱb期8例、Ⅲa期10例、Ⅲb期5例。对照组30例为同期南通大学附属东台医院体检中心的健康体检志愿者，男20例、女10例，年龄35～65(54.23±4.22)岁。所有受试者除外严重感染、心肝肾脏功能损害、自身免疫性疾病及其他恶性肿瘤。

1.2 方法 所有受试者于清晨空腹抽取静脉血3 m l，3 000 g离心5 min后分离血清置-70℃冰箱保存待用。血清OPN测定采用ELISA法，用武汉博士德公司的人OPN检测试剂盒，使用RAD550酶标仪(BIO-RAD公司)在450 nm测定吸光度值。TNF-α检测采用放射免疫分析法，试剂为科美生物工程公司产品，仪器为中科院上海日环仪器厂的SN-695B放免仪。所有操作由专人严格按试剂说明书进行。

1.3 统计学方法 采用SPSS16.0软件;检测数据用±s表示，组间比较采用t检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同病程MM患者OPN和TNF-α检测结果初诊和复发MM患者血清OPN水平低于对照组，TNF-α水平高于对照组(P均＜0.05);MM缓解患者OPN和TNF-α水平与对照组相比差异无统计学意义(P ＞0.05)。见表1。

表1 不同病程MM患者OPN和TNF-α检测结果(±s)

表1 不同病程MM患者OPN和TNF-α检测结果(±s)

注:与对照组比较，*P ＜0.05

组别 n OPN(pg/m l) TNF-α(ng/ml)MM 组初诊 10 132.0 ±56.8* 9.45 ±1.09*复发 16 143.6 ±51.0* 9.12 ±1.12*缓解 7 387.0 ±113.7 1.98 ±0.23对照组30 412.0 ±109.9 2.32 ±0.33

2.2 不同临床分期MM患者血清OPN和TNF-α水平 Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清OPN水平依次降低(P均＜0.05)，Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之间无统计学差异(P＞0.05)。Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清TNF-α水平逐渐升高(P均＜0.05)，Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之间无差异(P＞0.05)。见表2。

表2 不同临床分期MM患者血清OPN、TNF-α水平(±s)

表2 不同临床分期MM患者血清OPN、TNF-α水平(±s)

注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期间 OPN、TNF-α 水平比较，P ＜0.05

临床分期 n OPN(pg/m l) TNF-α(ng/ml)3 207.7 ±78.9 4.87 ±0.66Ⅱa 7 120.9 ±56.8 6.01 ±0.78Ⅱb 8 124.7 ±67.3 7.86 ±0.71Ⅲa 10 67.8 ±24.1 9.58 ±1.01ⅢⅠb 5 64.1 ±20.8 9.89 ±1.08

3 讨论

MM是一种常见的恶性血液系统肿瘤，以产生M蛋白单克隆浆细胞恶性增生为特点，骨髓中克隆性增生的浆细胞浸润骨骼和软组织引起骨骼破坏、贫血、肾功能损害等表现，目前仍是一种不能治愈的疾病［2］。MM发病机制十分复杂，其临床特点之一就是进行性骨质破坏而导致的MM骨病。MM患者分化得到的B细胞和浆细胞浸润骨髓，分泌破骨细胞活性因子，从而导致骨损伤。骨髓微环境作为一个具有多重功能、复杂的网络结构，由基质细胞及其他复杂的细胞外基质分泌的细胞因子对骨髓瘤细胞增殖和分化起到一定的调控作用［3］。

OPN是一种由多种细胞(成骨细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等)分泌的细胞外基质蛋白，OPN能调节骨骼的矿物化，参与肿瘤细胞的浸润和转移，影响细胞间的信号传递。有研究认为，OPN能阻止RANKL与RANK结合，抑制破骨细胞活性，减少破骨细胞数量［4］。Lipton等发现，与霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤患者OPN水平升高相比，MM患者OPN水平反而降低［2］。本研究结果也显示，MM初诊和复发的患者血清OPN水平显著低于对照组，而缓解组患者OPN水平和对照组比较无差异。本研究还发现，OPN与MM病程进展也有着密切的关系。Ⅰ期患者的OPN水平明显高于Ⅱ、Ⅲ期患者，但Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之间无差异;说明随着患者肾功能损害、骨损害病程的进展，OPN水平会进一步下降。国外文献也报道，没有骨损害患者血清OPN水平高于有骨损害患者，OPN血清水平降低与骨病严重程度密切相关［5］。因此，我们认为OPN可作为MM预后诊断的一个重要的指标。

TNF-α是由骨髓基质细胞分泌的一种细胞因子，属肿瘤坏死因子超家族成员，具有广泛的生物学活性。细胞因子的分泌异常会影响B细胞的激活、发育及分化。有文献［6］报道，TNF-α通过直接刺激骨髓瘤前体细胞分化、发生，促使B细胞增殖分化，在MM患者溶骨性损害中发挥重要作用。本研究结果显示，MM初诊和复发的患者血清TNF-α显著高于缓解组和对照组，Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清TNF-α水平逐渐升高，与国外报道相似［7］。说明TNF-α与MM的发生和发展均有着密切的关系。

［1］张之南，沈娣.血液病诊断及疗效标准［M］.2版.北京:科学出版社，1998:168-373.

［2］Lipton A，Alis M，Leitze K，et al.Serum osteoprotegerin levels in healthy controls and cancer patients［J］.Clin Cancer Res，2002，8(12):2306-2310.

［3］Preston SL，Alison MR，Forbes SJ，etal.The new stem cellbiology something for everyone［J］.JClin Pathol Molpathol，2003，56(9):86.

［4］SimonetWS，Lacey DL，Dunstancr，et al.Osteoprotegerin:a novel secreted protein involved in the regulation of bone density［J］.Cell，1997，89(2):309-319.

［5］Seidel C，H jertner Y，AbildgaardN，et al.Suerum osteoprotegerin levels are reduced in patientswith multiple myeloma with lytic bone disease［J］.Blood，2001，98(6):2269-2271.

［6］Balaille R.Ncw insight in theclinical biology ofmultiple myeloma［J］.Semin Haematol，1997，34(Suppl1):23.

［7］Singhal S，Mehta J，Desikan R，etal.Antitumor activity of thalidomide in refractorymultiple myeloma［J］.New End JMed，1999，341(21):1565.