三棵针质量标准研究＊

2011-06-27孙志国高国峰

中国药业 2011年15期

孙志国，高国峰

三棵针为小檗科植物拟豪猪刺 Berberissoulieana Schneid.、小黄连刺 Berberis wilsonae Hemsl.、细叶小檗 Berberis poiretii Schneid.或匙叶小檗 Berberisvernae Schneid.等同属数种植物的干燥根[1]，味苦、性寒，归肺、脾、胃、大肠经，具清热燥湿、泻火解毒功效，主要用于痢疾、肠炎、黄疸、上呼吸道感染、急性中耳炎等症[1]。为控制药材质量，笔者对三棵针的质量标准进行了研究，现报道如下。

1 仪器与试药

Waters高效液相色谱仪;Waters 2487型紫外检测器。样品均为市售品，经鉴定均为正品;盐酸小檗碱对照品(批号为110713－200609，中国药品生物制品检定所);乙腈为色谱纯，水为娃哈哈超纯水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 性状

本品呈类圆柱形，稍扭曲，有少数分枝，长10～15 cm，直径1～3 cm。根头粗大，向下渐细。外皮灰棕色，有细皱纹，易剥落。质坚硬，不易折断，切面鲜黄色，稍显放射状纹理，髓部棕黄色。气微，味苦。

2.2 薄层色谱鉴别

取样品粉末1.0 g，加甲醇 20 mL，超声处理 20 min，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照2005年版《中国药典(一部)》附录ⅥB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇－醋酸－水(2∶0.5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点。薄层色谱图见图1。

图1 薄层色谱图

2.3 含量测定

2.3.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:Agilent C18柱(250 mm ×4.6 mm，5μm);流动相:乙腈－0.02 mol/L 磷酸二氢钾(24∶76);检测波长:265 nm;进样量:10μL。在此条件下，色谱图见图2。

2.3.2 溶液制备

取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含20μg的溶液，即得对照品溶液。取样品粉末(过四号筛)约0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 50 mL，密塞，称定质量，超声处理(功率250 W，频率40 kHz)60 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.3.3 方法学考察

线性关系考察:分别精密吸取对照品溶液(0.010 006 g/L)5，10，15，20，25 μL，注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样量为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=251 109X－33 442，r=1.000 0(n=5)。结果表明，盐酸小檗碱进样量在0.050 03～0.250 15μg范围内与峰面积呈良好线性关系。

精密度试验:取盐酸小檗碱对照品溶液，连续进样5次。结果峰面积值的 RSD=0.5%(n=5)，表明方法精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，室温放置，分别在0，2.5，5.0，7.5，10.0，12.5，15.0，17.5，20.0，22.5 h 时进样测定。结果的RSD为1.6%(n=10)，表明供试品溶液在22.5 h内基本稳定。

重复性试验:取同一编号(编号1)的样品6份，依法制备供试品溶液并测定含量。结果的 RSD为0.5%(n=6)，表明方法重复性良好。