远志提取物对小鼠脑内多巴胺含量的影响

张淑萍,王昆祥,辛 华

(佳木斯大学附属第一医院,黑龙江 佳木斯 154003)

远志 Radix Polygalae为远志科植物远志 Polygala tenuifolia Willd.或卵叶远志 Polygala L.的干燥根,具有安神益智之功效。用于心肾不交引起的失眠多梦、健忘惊悸、神志恍惚、咳痰不爽等症的治疗[1]。远志主要含有远志皂苷元(tenuigenin)A、B、 细 叶 远 志 素 (tenuifolin)、 远 志 皂 苷(onjisaponin)A-G、远志糖苷 (tenuifolisde)A-E、远志寡糖(tenuifoliose)A-P[2]。多巴胺 (DA)是脑内的一种神经递质,近些年来科学家们研究推测脑内多巴胺含量增加可能造成帕金森氏综合征。历代医书记载远志有益智功效,临床常用于预防和治疗老年痴呆症。本研究对远志提取物对小鼠脑内多巴胺含量的影响进行研究,为远志的进一步开发及临床应用提供科学依据。

1 实验材料

地西泮注射液购于药都制药集团股份有限公司。远志提取物购于陕西冠宇医药科技有限公司。实验用昆明种小鼠购于佳木斯大学实验动物中心(黑动字:99101001)。

2 实验方法

2.1 动物分组及给药

昆明种小鼠40只,雌雄各半,随机分为4组:空白对照组,阳性对照组 ,样品低剂量组,样品高剂量组,每组 10只。适应性喂养 3d,第4天开始给药,每天1次,连续 7d。空白对照组:灌服蒸馏水0.4mL;阳性对照组:灌服地西泮 lmg˙kg-1;样品低剂量组:远志提取物9g˙kg-1;样品高剂量组:远志提取物18g ˙kg-1。

2.2 样品处理

2.2.1 组织样品处理

于末次给药后 lh,处死小鼠,取出小脑,用冷生理盐水冲洗,滤纸拭干,精密称重后置于含冰的酸化正丁醇中,置于带塞刻度离心管中,匀浆,用酸化正丁醇补足到4mL,振荡5min,离心5min(3000r˙min-1),取上清液 2.5mL置于另一带塞离心管内,加5mL正庚烷和 0.1N盐酸 1.2mL振荡5min,离心5min,溶液分为二层。取水相0.5mL,加入0.067M pH7.2磷酸盐缓冲液1.5mL,碘试剂0.1mL,静置2min,加碱性亚硫酸钠 0.5mL,静置2min,加 6N醋酸 0.6mL,沸水浴20min,冷却,加 45%磷酸0.lmL,沸水浴 20min,在 Ex:310nm,Em:370nm时测定 DA荧光强度。

2.2.2 标准品溶液处理

取标准液0.2mL置于带塞刻度离心管中,按“2.2.1项下”方法进行操作。

2.2.3 空白溶液处理

取重蒸馏水0.2mL,置于带塞刻度离心管中,按“2.2.1项下”方法进行操作。

2.2.4 计算公式

2.3 统计学处理

数据统计采用两样本 t检验,所有数据以均数±标准差± s)表示,P ＜0.05表示有显著性差异。

3 实验结果

对测定 DA结果与空白对照组比较,阳性对照组与样品高剂量组均能显著降低小鼠脑组织内 DA含量 (P＜0.05)。

表1 样品含量测定结果(±s,n=10)

表1 样品含量测定结果(±s,n=10)

组 别 DA平均含量(g˙kg-1)空白对照组 1.48±0.096阳性对照组 0.62±0.036低剂量组 1.27±0.070高剂量组 0.63±0.086*

4 讨论

远志中可以提取到一种多巴胺受体的配基-四氢非洲防已胺。此化合物在体外可抑制 [3H]SCH23390和 [3H]螺哌隆与大鼠纹状体膜的结合 ,它还能抑制 [3H]哌唑嗪和大鼠脑皮质细胞膜结合 ,但不能改变 [3H]QNB及 [3H]Muscimol对膜的结合,研究显示此抑制作用是通过竞争与非竞争混合机制而实现的。多巴胺是 NA的前体物质,是下丘脑和脑垂体腺中的一种关键神经递质,中枢神经系统中多巴胺的浓度受精神因素的影响,神经末梢的 GnRH和多巴胺间存在着轴突联系并相互作用。远志(Radix Polygalae)为常用中药,最早记载于《神农本草经》,列为上品,具有安神益智之功效。本研究发现远志提取物能够降低小鼠脑内多巴胺的含量,这可能与其发挥抑制安神作用有一定的关系,作用机理还有待于进一步研究。

[1] 张耀春,王立伟.远志提取物对小鼠学习记忆的影响 [J].中国新药杂志,2006,15(15):1254-1257

[2] 彭汶铎.远志皂苷的降压作用及机制 [J].中国药理学报,1995,17(5):29-642

[3] 张淑兰.失眠药物治疗研究进展 [J].中华中西医学杂志,2005,3(12):51-52

[4] 张敏.常见的几种睡眠障碍 [J].中国农村医学杂志,2008,6(5):12-13

[5] Inoue O,Ogihara Y,Yamasaki K.Application of13C nuclear magnetic resonance spectroscopy to the elucidation of the structure of a minor dammarane saponin from the seeds of Zizyphus jujuba[J].J Chem Res,1978,144-149