结膜松弛症的组织病理学及超微结构变化研究

陈祎祎 彭建军

(武汉市普仁医院眼科 武汉 430081)

结膜松弛症(conjunctivochalasis)是老年患者临床中较为常见的眼科疾病,主要是因为球结膜出现松弛过度和下睑缘张力明显增高所引起,最终导致眼表泪液学出现明显异常现象,同时还伴有眼部干涩,眼内异物感觉及溢泪等多种不适症状[1～2]。本研究拟观察结膜松弛症的组织病理学及超微结构变化情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料

30例结膜松弛症患者均为本院2007年10月至2008年3月期间行手术治疗病例,同期选择30例正常对照组。结膜松弛症组：男性12例,女性18例,平均年龄为(71.3±6.4)岁,Ⅰ级15眼,Ⅱ级20眼,Ⅲ级20眼,Ⅳ级5眼;对照组：男性14例,女性16例,平均年龄为(70.7±6.6)岁。采集10例结膜松弛症例患者的组织标本,其中男性4例,女性6例,平均年龄为(70.8±6.2)岁,Ⅰ级2例,Ⅱ级3例,Ⅲ级4例,Ⅳ级1例;同期选择本院非结膜松弛症患者10例为对照组,其中男性4例,女性6例,平均年龄为(70.2±5.7)岁。2组在年龄、性别等各方面无显著性差异(P>0.05),具有可比性。

1.2 组织标本采集具体方法

松弛结膜症患者及对照组切除部位均为双眼鼻下方的区域,组织标本应做到相同部位,相同切除面积和相同采集方法。

1.3 泪液羊齿状试验

泪液羊齿状试验时间应为每日10:00～12:00am,利用玻璃毛细管在患者下睑结膜囊泪阜部位处通过吸取泪液组织标本,操作过程中避免接触眼球表面,将泪液组织标本放置在载玻片上,经处理后在显微镜下观察分析并作出具体评级,根据泪液羊齿状结晶的完整性,均匀性和分支状态等方面分为四个等级。Ⅰ级:羊齿状分支结晶图表现为均匀且致密,空间间隔相对很小;Ⅱ级:羊齿状结晶图表现为分支数量较少,且形态表现也较小,空间间隔相对较大;Ⅲ级:羊齿状结晶图表现为分支数量明显减少,空间间隔显著增大;Ⅳ级:很难发现有羊齿状结晶图,结晶呈不定型表现。其中Ⅰ、Ⅱ级均为正常表现,而Ⅲ、Ⅳ级为异常表现。

表1 TFT的分级比例比较[例(%)]

1.4 组织标本染色

组织标本经处理后采用PAS和AB等染色方法显示杯状细胞,同时制作电镜标本进行观察。

2 结果

2.1 TFT测定

结膜松弛症组与对照组经TFT检测后发现,与对照组比较结膜松弛症组患眼泪液中羊齿状结晶明显减少(P<0.05),随着患者病情程度出现加重趋势,泪液中羊齿状结晶明显减少(P<0.05),见表1。

2.2 球结膜杯状细胞形态结构

结膜松弛症组球结膜杯状细胞形态表现：球结膜鳞状上皮呈厚薄不均匀的现象,一般为4～7层,上皮层中杯状细胞的数量多少不等,但细胞的大小及组织形态相一致,各上皮细胞层中均可发现有杯状细胞的存在,经统计和分析发现100个上皮细胞内约有2.74%为杯状细胞,其细胞形态与脂肪细胞极为相似,杯状细胞经AB染色处理后表现为蓝色,经PAS染色处理后则表现为红色,此外还可以发现有少数基底细胞色素沉着的现象。正常对照组球结膜杯状细胞形态表现：球结膜上皮厚度较薄,仅有4～5层,且上皮层中杯状细胞的数量多少不等,形态与结膜松弛症的球结膜杯状细胞形态表现相类似,经统计和分析发现100个上皮细胞内约有4.63%的杯状细胞。

2.3 球结膜杯状细胞数量比较

结膜松弛症组杯状细胞平均密度为(2.74±1.98)/100个上皮细胞,对照组为(4.63±2.35)/100个上皮细胞,2组间无显著性差异(P>0.05)。根据临床分级为Ⅰ～Ⅳ级,Ⅰ级3.9%,Ⅱ级2.96%,Ⅲ级2.05%,Ⅳ级1.33%,结果显示随着结膜松弛症病情程度的加重趋势,杯状细胞密度也明显出现下降。

2.4 球结膜杯状细胞超微结构电镜观察

结膜松弛症组电镜观察:可见杯状细胞顶面胞质内堆积有大量浆液性分泌颗粒,颗粒呈不规则形状,内含有特殊的条纹样物质,细胞基底面处含有大量的粗面内质网,内有少量的线粒体,细胞核常位于细胞质的一侧。正常对照组电镜观察:可见杯状细胞胞质中存在大量电子密度较高,形态大小不等的黏液小滴状物质;内含有丰富的粗面内质网,邻近细胞核的上部有一较大的高尔基体,黏液小滴可形成巨大团块。

3 讨论

3.1 结膜松弛症的组织病理学特点[3～4]

(1)结膜表面呈弯曲和皱褶等现象：在眼球与下睑缘之间堆积松弛结膜,从而导致结膜表面出现弯曲和皱褶等现象,随着结膜松弛程度的逐渐加重,弯曲和皱褶等现象的程度也逐渐加重,Ⅱ级未出现明显的皱褶现象,Ⅲ级大多数出现皱褶现象,Ⅳ级均出现皱褶现象;(2)结膜鳞状上皮增生明显,且出现角化不全现象：结膜表面形成的弯曲皱褶要明显突出于患者的眼球表面,使得泪河变的明显狭窄不全,故在眼球结膜上难以形成正常的泪膜,进而导致结膜异常干燥、充血水肿,失去原有的光泽现象,鳞状上皮增生现象明显;(3)基底细胞有明显的色素沉着现象：Ⅰ、Ⅱ级基底细胞色素表现为局灶性沉着现象,Ⅲ级部分基底细胞中呈现疏密程度不同的色素沉着现象,Ⅳ级局部基底细胞呈现色素沉着的现象;(4)固有层中的血管出现明显扩张,瘀血、水肿及慢性炎症反应现象明显：由于长期反复的炎症刺激以及眼睑的摩擦损害,松弛结膜症患者皱褶内血管极易脆性变,眼睑压迫松弛的球结膜则易导致血管出现破裂现象,进而发生结膜下出血现象;(5)弹力纤维出现异常变性和减少等现象,且胶原纤维也出现异常变性：各等级患者结膜内弹力纤维出现程度不一的变性现象,而Ⅲ、Ⅳ级弹力纤维则显著下降。既往大量研究结果表明：结膜松弛症患者组织病理检查结果可发现弹性纤维出现明显的断裂现象,而胶原纤维减少异常,弹力纤维减少这种现象的出现可导致球结膜弹性功能显著下降,张力大小降低明显,易产生结膜的松弛现象,故应认为是结膜自身生理改变的主要发病原因。

3.3 结膜松弛症患者的超微组织结构改变情况[5]

结膜松弛症患者成纤维细胞的细胞胞质中存在着较多扩张的粗面内质网和游离核糖体物质,而细胞胞质外周围区则有较多衣小泡的吞饮泡组织结构,结膜成纤维细胞生理功能发生显著性改变,必然会引起细胞外上述各种组织成分的显著变化,从而影响外基质各种成分的平衡状态和稳定性,最终发生结膜松弛症。

本研究结果显示：结膜松弛症患者的泪液分泌量明显减少,泪膜的稳定性状态显著下降,泪液中羊齿状结晶形成异常减少等现象,均可以间接证实患者泪液中的黏蛋白成分异常减少。故可知,随着结膜松弛症程度加重,结膜松弛症球结膜杯状细胞组织形态和超微结构有异常改变。

[1]张兴儒,许琰,李青松,等.结膜松弛症临床与基础研究[J].中国实用眼科杂志,2005,23(1):83～87.

[2]钱志刚,柯敏.结膜松弛症的临床及病理研究[J].临床眼科杂志,2010,18(1):17～19.

[3]李轶捷,李青松,张兴儒.结膜松弛症研究新进展[J].国际眼科杂志,2009,9(5):938～940.

[4]刘秋月,陶海,贺冰,等.结膜松弛症的病理学研究进展[J].国际眼科杂志,2007,7(5):1420～1422.

[5]张兴儒,蔡瑞霞,王宝华,等.结膜松弛症的组织病理学观察[J].中华眼科杂志,2004,40(1):37～39.