人绒毛膜促性腺激素酶联荧光分析法定量检测的方法学评价

王明富

（云南省镇沅县人民医院检验科，云南 镇沅 666500）

HCG是孕卵着床后由人体滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素，因此测定HCG的水平可用于诊断早孕及宫外孕，进行先兆流产的动态观察及判断预后，还可作为孕期的监护观察指标。此外，也可用于绒癌、恶性葡萄胎等作为辅助诊断及治疗后随访的观察指标。因为血中HCG变化较快，能及时反映出绒毛的分泌活动[1-6]。男性非精原细胞的睾丸肿瘤患者血中HCG值也很高。

HCG检测方法多种多样，常见的有放射免疫，化学发光等。MINI VIDAS检测HCG采用酶免竞争分析（夹心法）与荧光检测相结合的分析原理。我们参考NCCLS的EP10-A文件，有选择的对检测的精密度、批间差、回收率等指标进行评价。

1 材料与方法

1.1 材料

①仪器和试剂：法国bioMerieux,sa,生产的MINI VIDAS和与之配套的校准品，质控品（批号1000086750）；②选择5个样品，浓度分别为16.6mIU/mL、71.8mIU/mL、257.0mIU/mL、334.0mIU/mL、1211.0mIU/mL。选择3个样品做稀释回收率，浓度分别为168.18mIU/mL、564.56mIU/mL、1251.04mIU/mL。

1.2 方法

①按常规开机，预热后用试剂配套的校准品做校准，按仪器要求做质控，质控合格后准备开始测定准备好的样品；②测定方法，按5个样品的浓度梯度每次同时测定，每仓一批，依次测试20次，剔除超过±2SD的测试，将结果用于分析评价；③回收率测试，将3个浓度的样品用HCG专用稀释液分别作1/1、1/8、1/32稀释。分3次进行测定，测量的平均浓度与预期浓度之比作为评价回收率。

2 结 果

2.1 5个样品同批号检测20次结果

见表1。

表1 5个样品同批号检测20次结果

2.2 5个样品做批间测定结果

见表2。

表2 5个样品做批间测定结果

2.3 3个样品稀释后分3次分别进行测试，把测量的平均浓度与预期浓度之比定义为平均回收率。见表3。

表3 平均回收率

2.4 线性

ELFA检测HCG的线性为2～1500mIU/mL，超过线性需要用试剂盒配送的稀释液稀释后测定，通过对以上3个表的分析，MINI VIDAS的测定能满足临床需要。

2.5 回收率

3个样品稀释后分3次分别进行测试，把测量的平均浓度与预期浓度之比定义为平均回收率，测得回收率为88.3%～106.1%，通过回归分析，ELFA法测定HCG的回归方程为Y=0.95X-18，相关系数为0.99，表明相关良好。

2.6 干扰试验

在含HCG1251mIU/mL的血清中加入促黄体生成激素（LH）和促卵泡成熟激素（FSH）进行测定，对结果没有影响，有学者研究表明，LH10000mIU/mL或FSH12500mIU/mL对HCG的测定没有影响。

3 讨 论

3.1 MINI VIDAS采用酶联免疫竞争法与荧光检测相结合的分析原理，所有试剂都已经预先分装在独立的试剂条中，测定过程完全由仪器自动完成，该方法具有较高的灵敏度和特异性，可单个或多个标本多个项目同时测定，比较适合小型实验室或大型实验室的急诊检测。试剂封闭式式独立分装，减少了交叉污染和干扰，同时对操作者是较好的保护，特别是高危标本。

3.2 血中HCG变化较快，检测HCG能及时反映出绒毛的分泌活动，我们参考NCCLS的EP10-A文件，根据现有条件，对MINI VIDAS检测HCG的几个重要指标进行验证分析，准确度，灵敏度，线性，回收率，干扰试验等均达到了标准，符合临床应用要求。

[1] 卫生部临床检验中心.临床实验室室间质评的要求(草案).2000年.全国临床化学室间质评资料汇编[S].2000:1-3.

[2] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[S].2版.南京:东南大学出版社,1997:519-521.

[3] 滕万忠.应用NCCLS EP10-T评价国产电解质分析仪[J].宁夏医学杂志,1999,21(10):601-604.

[4] Pierce JG.Glycoprotein hormones: stucture and function[J].Annu Rev Biochem,1981,50(1):465-495.

[5] Ruffie A,Ruedas E.Sous-unites:interet clinique.Contracept[J].Fertil Sex.,1995,23(2):97-100.

[6] Feinstein MC..hCG et ses sous-unites comme marqueurs tumoraux[J].J Steroid Biochem,1989,33(6):771-775.