葛根芩连汤与其有效部位群对离体心脏的作用

谭 颖，史姚平，刘 琳，赵 瑛

(哈尔滨商业大学药学院，哈尔滨 150076)

葛根芩连汤出自张仲景《伤寒论·太阳篇》，由葛根、黄芩、黄连、甘草4味药组成，是中药治疗急性腹泻的经典方剂［1］.现代药理研究表明葛根芩连汤具有抗心律失常、抗缺氧、抑制代谢综合症等药理作用［2］.近年来有研究表明葛根芩连汤可以治疗肺源性心脏病［3］.大量研究表明当中药复方的物质基础发生变化时，其药理作用可能随之改变.本实验通过观察葛根芩连汤与其有效部位群对大鼠离体心脏的作用，探讨制备工艺不同方剂作用的差异.

1 实验材料

1.1 实验动物

健康成年SD大鼠，雌雄各半，体重300～350 g，由黑龙江中医药大学动物研究室提供(合格证号:00102006)

1.2 仪器

分析天平ALC－1104:德国赛多利斯集团;Langendorff离体心脏灌流实验仪LE 05.200:Panlab s.l.;生物机能实验系统 BL－420E:成都泰盟科技有限公司.

1.3 药品

葛根芩连汤与其有效部位群由哈尔滨商业大学药学院提供(其中有效部位群总黄酮、总生物碱含量大于 52%).K－H 液:NaCl 120、KCl 4.63、CaC121.25、KH2PO41.17、MgS041.20、NaHCO320、Glucose 8.用双蒸水分别完全溶解后，依次转移到1 L容量瓶中，定容，摇匀过滤备用.

1.4 试剂

肝素:北京奥博星生物技术有责任限公司，批号:20060831;水合氯醛:中国五联化工厂，批号:20020509;1，2－丙二醇:中国山海试剂总厂，批号:20030106;95%O2+5%CO2混合气:哈尔滨黎明气体有限公司.

2 实验方法

2.1 离体心脏模型的建立

参考《药理实验方法学》［4］制备 Langendorff离体心脏:实验动物称重后，10%水合氯醛3mL/kg麻醉.l 0min后仰卧固定于操作台.立即开胸，暴露心脏，破心包，游离左右肺叶，从主动脉弓处剪断主动脉，摘取心脏，用预先(体积分数95%O2+5%CO2)氧饱和的4℃的K－H液迅速冲洗后，立即移入装有氧饱和的4℃ K－H溶液的平皿中.修剪心脏周围组织，找出主动脉，沿主动脉向上1 cm处剪断主动脉，于液面下行主动脉插管，丝线结扎固定.80 cm水柱恒压、37℃灌注，当心脏示射血动作后，于肺动脉起始部与右室圆锥部之间剪一个小口.剪掉左心耳，将制备好的水囊插入左心室，充水调节压力至0.532～1.064 kPa.

2.2 分组与给药

将大鼠离体心脏模型随机分成K－H对照组、丙二醇对照组、葛根芩连汤(G)和葛根芩连汤有效部位群(GQ)组，G和GQ分设5个剂量组，分别为G50、GQ50(50 g生药/L 组)，G25、GQ25(25 g生药/L 组)，G12.5、GQ12.5(12.5 g生药/L 组)，G6.25、GQ6.25(6.25 g 生药/L 组)，G3.125、GQ3.125(3.125 g生药/L 组)，每组6只.

给药方法:将溶于体积分数1%丙二醇的药物按给药质量浓度稀释到K－H液中，80 cm水柱恒压灌流离体心脏.

2.3 统计方法

采用SPSS 16.0 For Windows统计软件进行处理.用平均值±标准差()表示，给药前后比较采用配对t检验，组间比较方差齐采用t值简法检验，方差不齐采用校正t值法.P＜0.05说明有显著性差异，P＜0.01说明有非常显著性差异.

3 实验结果

实验结果表明:K－H和丙二醇对照组HR、LVSP、+dp/dtm变化较给药前均无显著性差异(P＞0.05);GQ50 组给药后 HR、LVSP、+dp/dtm 显著降低(P ＜0.01，P ＜0.05);GQ25 组、GQ12.5 组和GQ6.25组给药后HR降低，LVSP、+dp/dtm升高，较给药前有显著性差异(P＜0.01，P＜0.05);G50组和G25组给药后HR降低，较给药前有显著性差异(P＜0.01，P＜0.05);G50组给药后 LVSP显著升高(P＜0.05).GQ50与 G50比较，对 HR、LVSP、+dp/dtm的作用更为显著(P＜0.05);其他同等剂量情况下，GQ对心脏的作用稍强于G，但无显著性差异(P ＞0.05).见表1.

表1 葛根芩连汤与其有效部位群对大鼠离体心脏HR、LVSP、+dp/dtm影响(次/min，n=6)

表1 葛根芩连汤与其有效部位群对大鼠离体心脏HR、LVSP、+dp/dtm影响(次/min，n=6)

注:*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01 与给药前比较;▲P ＜0.05，▲▲P ＜0.01与同等剂量葛根芩连汤组比较

实验结果表明，K－H和丙二醇对照组CF、LVEDP、－dp/dtm变化较给药前均无显著性差异(P＞0.05);GQ50组给药后CF、－dp/dtm显著降低，LVEDP显著升高(P＜0.01，P＜0.05);GQ25组、GQ12.5组和 GQ6.25 组给药后 LVEDP 降低，CF、－dp/dtm升高，较给药前有显著性差异(P＜0.01，P＜0.05);G50组和 G25组给药后 LVEDP降低，CF、－dp/dtm升高，较给药前有显著性差异(P＜0.01，P ＜0.05).GQ50 与 G50 比较，对 CF、LVEDP、－dp/dtm的作用更为显著(P＜0.05);其他同等剂量情况下，GQ对心脏的作用稍强于G，但无显著性差异(P ＞0.05).结果见表2.

表2 葛根芩连汤与其有效部位群对大鼠离体心脏CF、LVEDP、－dp/dtm影响(次/min，n=6)

表2 葛根芩连汤与其有效部位群对大鼠离体心脏CF、LVEDP、－dp/dtm影响(次/min，n=6)

注:*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01 与给药前比较;▲P ＜0.05，▲▲P ＜0.01与同等剂量葛根芩连汤组比较

4 讨论

1)溶媒的选取:丙二醇是无色澄明黏稠液体，与水、乙醇、甘油相混溶，但不能与脂肪相混溶.性质稳定，高温下(250℃以上)可被氧化.预实验发现体积分数10%、5%丙二醇K－H液对大鼠离体心脏有较明显的降低左心室内压作用，体积分数1%丙二醇K－H液虽也有弱的一过性降低左心室内压作用，但很快就恢复给药前的水平.故在实验中选取1%丙二醇溶解药物.实验结果显示，体积分数1%丙二醇对 HR、LVSP、LVEDP、+dpdtm、－dpdtm和CF的改变均无显著性(P＞0.05)，说明体积分数1%丙二醇的K－H液对大鼠离体心脏的血流动力学的改变不影响试验结果.

2)葛根芩连汤与其有效部位群对大鼠离体心脏的影响:心脏的泵血功能取决于心肌的收缩性能以及前负荷和后负荷等指标.葛根芩连汤和低剂量的葛根芩连汤有效部位群可以使+dp/dtm升高，提示葛根芩连汤可以增强心肌收缩性能.这与降低LVEDP结果相符，LVEDP降低说明左室收缩加强或回心血量减少.此结果提示葛根芩连汤及有效部位群可以增强心功能，具有正性肌力、负性频率作用，同时可能通过扩张冠脉和降低HR而增加舒张期时间、减少心肌收缩对冠脉的挤压而增加冠脉流量.

3)葛根芩连汤与其有效部位群作用的比较:葛根芩连汤有效部位群是经溶媒提取，大孔吸附树脂富集有效成分制得，而葛根芩连汤是传统煎煮而得.有研究表明方剂制备工艺不同，有效成分的含量和配比可能不同［5－6］，药理作用也必定存在差异.通过本实验研究可以看出葛根芩连汤有效部位群的药理作用要强于同等剂量葛根芩连汤组，其药理作用与葛根芩连汤高一剂量基本相当.

葛根芩连汤有效部位群最高剂量对心脏的作用与低剂量相反.导致这一结果的原因可能与葛根芩连汤的主要成分之一为小檗碱有关.有研究表明，小檗碱对心肌收缩力的影响具有小剂量增强、大剂量抑制的双向特征［7］.

［1］王 立.经典方剂葛根芩连汤研究现状［J］.黑龙江医药，2009，22(2):172－173.

［2］赵 瑛，李文亭，孟晓红，等.葛根芩连汤及有效部位群对代谢综合征大鼠作用的比较［J］.中药药理与临床，2009，25(4):7－10.

［3］徐忠正.葛根芩连汤辨治肺原性心脏病［J］.中医杂志，2001，42(10):636.

［4］徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学［M］.北京:人民卫生出版社，2006.

［5］UMBREIT J.Iron deficiency:a concise review［J］.Am J Hematol.，2005，78(3):225－31.

［6］任美容，赵 瑛，凌 勇.中药复方不同提取方法药效成分动态变化研究［J］.中医药学报，2010，38(3):80－84.

［7］张晓丹，任宏敏，刘 琳.小檗碱对DHF大鼠血流动力学和心肌细胞内钙离子质量浓度的影响［J］.中国中药杂志，2008.33(7):818－821.