干扰素α-2a治疗慢性乙肝患者血清Th1/Th2亚群细胞因子的水平变化及意义

谷斌

湖南省郴州市第二人民医院，湖南郴州 423000

慢性病毒性肝炎的发生机制相当复杂，研究证实，T淋巴细胞亚群及细胞因子功能失调与慢性肝病发生、发展密切相关[1]，慢性病毒性肝炎目前治疗效果不理想。本文中笔者对90例慢性乙型肝炎患者应用大剂量干扰素α（IFN-α）治疗前后 T淋巴细胞亚群及 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的变化进行了观察，旨在探讨干扰素疗效与机体免疫状态的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2008年4月～2010年10月收治入院的慢性乙型肝炎患者90例，均符合2005年慢性乙型肝炎防治指南的临床诊断分型标准[2]，其中，男68例，女22例；年龄24～48岁，平均（45.6±5.3）岁。随机将90例患者设为HBeAg阳性组，给予IFN-α治疗。选择我院同期健康献血者90例作为HBeAg阴性组，其中，男61例，女29例；年龄24～63岁，平均（42.6±6.7）岁。两组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治疗方法

干扰素α-2a（北京凯因生物技术有限公司生产，批号：20080301-13），剂量是 3～5 MU/次，治疗初 2～4 周每日 1 次，以后隔日1次，疗程1年。干扰素α-2a治疗5～8周，有应答的患者常出现ALT升高，一般在治疗后3～4个月ALT即恢复正常，不提倡给予降酶药。但如果出现黄疸，应停用，予以对症处理，待黄疸消退后可继续使用。干扰素治疗达到完全应答后，继续治疗3个月，可巩固疗效，防止复发。如果疗程结束时仍处于部分应答的病例可延长疗程，或改用其他抗病毒药物。

1.3 观察指标

血清 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10 水平检测采集 IFN-α 治疗前，治疗第3、6、9和12个月患者血清和健康献血者的血清，-80℃冻存。采用西门子IMMULITE.1000化学发光检测仪， 化学发光法检测血清 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平，ELISA试剂盒是美国Genzyme公司产品，晶美生物有限公司分装。检测结果以pg/ml为单位。具体步骤按说明书进行，肝功能、血常规送检验科常规检查。

1.4 统计学方法

采用SPSS13.0软件包进行统计学处理，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料采用 χ2检验，以 P＜0.05 为差异有统计学意义。IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10与HBV-DNA含量变化相关性以直线相关性分析评价。

2 结果

2.1 两组患者检测结果比较

见表1、2。90例慢性乙型肝炎患者血清中治疗前后的IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10含量不断变化趋势与HBV-DNA 拷贝数相关，其相关系数 r=-0.851、-0.732、0.817、0.835，均 P＜0.05。 由表2可知，治疗第3、6、9、12个月时与HBeAg阴性组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 治疗前后Th1/Th2平衡检测结果比较

治疗后Th1/Th2有逐渐升高的趋势，在第6、9个月时接近1，但治疗第12个月时又有下降趋势，总体上仍以Th2优势反应为主，而HBeAg阳性完全应答组则由治疗前的Th2优势应答转为Th1优势应答（图1）。

表1 90例患者治疗前后ALT、HBV-DNA含量、Th1细胞因子IL-2、IFN-γ及Th2细胞因子IL-4、IL-10血清浓度变化（x±s）

表 2 治疗前后血清 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10 水平检测结果（x±s，ng/ml）

3 讨论

病毒性肝炎是一种肝细胞破坏的过程也是病毒清除的过程，由于病毒的特性和机体在漫长感染过程中的反复自身感染和免疫耐受，因此清除过程大多不力，导致了病程迁延[3-4]。干扰素可以说是目前在国际上公认对乙肝、丙肝病毒复制有抑制作用的药物[5-6]。干扰素对免疫的调控作用有助于这种免疫清除过程过程，但必须在机体自身有免疫清除反应时干扰素的作用才较为理想[7]。干扰素α治疗乙型肝炎可明显提高外周血CD4+数量，并使CD8+细胞大量进入肝内，以增强细胞毒活性；亦可通过调节T细胞，抗原递呈细胞功能和细胞因子产生，维持细胞因子网络的平衡来发挥其抗病毒作用[8]。本文中笔者者还观察了干扰素α治疗有效组治疗前后Th细胞因子的变化，Th活化后可释放细胞因子，调节T、B细胞、单核细胞和其他免疫细胞活性，机体对细胞内与细胞外抗原的免疫应答主要受Th1和Th2调节。活化的Th1产生IL-2和IFN-γ；活化的Th2释放IL-4及IL-10等细胞因子。Th1与Th2参与调节炎症反应以及器官功能的自我稳定，细胞因子介导的免疫应答在肝细胞炎症坏死、病毒清除及病毒持续存在等方面的免疫机制中均起着中心作用。经干扰素α治疗后Th1/Th2平衡检测结果治疗后Th1/Th2有逐渐升高的趋势，在第6、9个月时接近1，但治疗第12个月时又有下降趋势，总体上仍以Th2优势反应为主，而HBeAg阳性完全应答组则由治疗前的Th2优势应答转为Th1优势应答。表明干扰素既能抑制HBV-DNA复制又能调节Th1/Th2细胞因子比例平衡，使免疫反应由Th2型向Th1型逆转。其作用机制可能是干扰素可以促进Th1细胞发育，抑制Th2细胞发育，进而促进IFN-γ等Th1型细胞因子的分泌，抑制IL-4等Th2型细胞因子的分泌，提高细胞免疫反应，抑制体液免疫反应，从而增强CD8 T细胞的活性，清除细胞内病毒，降低血清HBV-DNA的含量[9-10]。

由此可见，干扰素应用的目的应该包括抑制病毒复制和清除复制病毒的“机器”。慢性病毒性肝炎是由于乙肝、丙肝病毒感染肝细胞而导致的疾病。因此，如果干扰素能够彻底清除或减少肝炎病毒的数量，那么肝脏就可以行使自身的免疫功能使肝脏炎症消退，并通过其极强的再生代谢能力逐渐康复[11-12]。研究认为，乙肝病毒水平感染的时间少于2年者，用干扰素制剂后，HBsAg、HBeAg及乙肝病毒脱氧核糖核酸的消失比较容易；患者肝脏活检病理改变轻者，没有或稍有肝脏纤维化者的效果较好；同时根据治疗后HBV-DNA复制指标阴转及HBeAg/HBeAb转换情况。由此可见，干扰素治疗慢性乙型肝炎患者是通过调节Th1/Th2细胞的平衡，提高Th1细胞免疫反应，抑制Th2体液免疫反应，从而抑制HBVDNA复制。

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