待宰猪盐酸克伦特罗残留的检测实践

曹禄松 李海金

江苏省金湖县动物检疫站,江苏金湖 211600

待宰猪盐酸克伦特罗残留的检测实践

曹禄松 李海金

江苏省金湖县动物检疫站,江苏金湖 211600

通过对金湖县2009年11、12月份的待宰猪盐酸克伦特罗的检测与结果分析,阐述了金湖县主要工作方法、经验、以及对当前盐酸克伦特罗检测工作的建议。

生猪;盐酸克伦特罗;检测

曹禄松,男,1965年生,大专,兽医师。

瘦肉精是一类动物用药,有数种药物被称为瘦肉精,例如莱克多巴胺(Ractopamine)、克伦特罗(Clenbuterol)等。在我国,通常所说的“瘦肉精”则是指克伦特罗,将瘦肉精添加于饲料中,可以增加动物的瘦肉量,减少饲料使用,使肉品提早上市,降低成本。从1997年开始,农业部就禁止在畜禽生产中使用“瘦肉精”,《饲料和饲料添加剂管理条例》和《兽药管理条例》中明确规定,不准在饲料中添加“瘦肉精”。近年来,部分生猪养殖场(户)为提高养猪经济效益,在生猪饲料中添加“瘦肉精”,添加“瘦肉精”后能够促进猪在代谢过程中蛋白质的合成,加速脂肪的转化和分解,提高猪的瘦肉率,在目前所添加的违禁药品中以盐酸克伦特罗的应用最为广泛。由于生猪中盐酸克伦特罗的添加具有用量大、使用时间较长、代谢慢等特点,所以当猪屠宰上市后残留量一般都会很大,含有盐酸克伦特罗的猪肉和内脏﹙特别是肝脏、肺脏﹚,人食用后会出现恶心、头晕、四肢无力、肌肉颤抖、心悸等中毒症状。盐酸克伦特罗特别对心脏病、高血压的患者以及老年人危害更大。含有盐酸克伦特罗的生猪产品不断流向市场,导致盐酸克伦特罗中毒事故频繁发生,严重威胁到消费者的身体健康。

猪肉是我国人民的主要肉食消费品,同时生猪生产又是当前添加盐酸克伦特罗的重灾区,因此加大与普及对生猪(特别是商品猪)盐酸克伦特罗的检测力度刻不容缓。国家兽医卫生行政监督机构为确保人民的肉食品安全工作,加大了以生猪为重点的盐酸克伦特罗检测工作的检测力度和普及程度。2009年底江苏省金湖县动物检疫站就在全县范围内开展了针对盐酸克伦特罗的检测工作,取得了较好的效果,现将笔者在实际工作中取得的一些经验与体会介绍如下。

1 检测过程

金湖县是猪肉消费大县,全县约37万人,年消费生猪达11万头。金湖县生猪饲养并不发达,主要为1家1户生产的一种当地黑毛猪,全县土种猪生产量不足4万头,其余主要依靠从山东、河南、安徽等省调运。本地猪大部分是使用剩饭菜和农作物副产品作为饲料土法饲养,很少存在“瘦肉精”的问题,因此,检测的重点主要集中在外调生猪上。全县共有1个县级生猪定点屠宰点和4个生猪交易市场,生猪交易较发达,特别是4个生猪交易市场已经逐步形成为江苏省黑毛猪交易的集散地,从此中转发往南京等地,因此对外调生猪的盐酸克伦特罗检测工作尤为重要。

目前应用于盐酸克伦特罗的检测方法主要有以下3种。一是金标检测卡定性检测,主要用于对可疑生猪的初步检测,该方法成本较低、检测速度快、操作简便,但结果不易保存。二是酶联免疫法定量检测,用于金标卡测试后的确认,该方法检测灵敏度高,可保存结果,但易受到交叉反映干扰。三是气相色谱-质谱联用法定量确证检测,该方法用于终审,但投入大,检测成本高,适用于专业实验室。笔者所在的基层动物检疫检验单位主要采用按一定比例随机抽检和根据经验定向抽检相结合的方法选择测试生猪,主要采用盐酸克伦特罗快速检测卡(广州景同生物科技有限公司)进行检测,该检测方法具有简单快速、无需特殊仪器设备的特点,既可在实验室进行,也可在生猪交易市场、屠宰场、养猪场等进行实地检测,适用于对大量检测生猪的初步抽检。

1.1 样本的采集

1)宰前采集。当外调生猪抵达交易市场或屠宰场后,先让生猪下车并休息20～30min后。通过仔细观察,一般饲喂盐酸克伦特罗的生猪都具有皮毛异常光亮、皮肤白里透红、被毛少而松软,后臀部饱满突出,背部体表驱打后容易留下持久伤痕,呼吸急促,个别会出现腿抽搐、站立不稳、爬坡困难、行走不灵活、容易发生蹄损伤和跛行或非外因倒地不起等特征,根据以上特征可以对可疑猪设法采集尿液作为样本进行检测,采尿的方法主要有蹲守接尿法(比较适合母猪)和使用简易的接尿器接尿法(比较适合公猪)。

2)宰后采集。根据对宰后生猪的感官检验选择可疑生猪,含有盐酸克伦特罗的猪肉色泽比普通猪肉深,肌肉特别鲜红,后臀较大且肌肉饱满,肌纤维比较松软,瘦肉与脂肪间有黄色液体流出,脂肪非常薄,腹股沟的脂肪层内毛细血管分布较密,甚至呈充血状态。对可疑猪在其开膛后,用一次性注射器从膀胱中抽取尿液作为样本,组织的采样一般以无菌采取肝组织较好。

1.2 抽取样品

1)抽样数量的确定。在抽样前,要准备好接尿用具、一次性注射器、采样瓶、以及抽样文书等。样本量一般按照10%的比例采取,对出现肌肉震颤、站立不稳、异常丰满的可疑生猪,要加大抽检比例;每头猪采取尿液量约100mL,平均分成3份,每份约30mL,分别装入采样瓶并编号后密封,抽样用具在每次使用前要彻底清洗;组织样品一般以采取肝组织为好。

2)抽样记录。抽样时,要如实填写抽样单,注明生猪来源、抽样时间、同群数量等内容,并由抽样人和畜主共同签名确认,一式三联分别贴在3个重复的样品瓶上。3份抽样样品中,2份由抽样人员带回用于检验和留样用,另1份封存于被抽检单位,作为对检验结果有争议时复检用。

3)样品贮运。取样后,样品应立即在0～4℃条件下冷冻保存。运输过程中,样品温度不得超过4℃,时间不超过24h。

1.3 样本处理

样品必须收集在洁净、干燥不含任何防腐剂的塑料杯或玻璃容器内。有条件的可将尿液在4℃、3000r/min以上离心,取上清液备用。肉样或组织样品可将样品剪碎,装入1.5mL离心管中,盖紧管盖,放在100℃水中加热5min以上,使有液体浸出,取出离心管放至室温,取上清液备用;也可称5克样品剪碎,加入25 、50mmol盐酸溶液,振荡3min并静置5min后取上清液1mL,加入氢氧化钠溶液,再振荡3min并静置5min后取上清液备用。

1.4 样本的检验方法

取出试剂板(在室温高于30℃,在高度潮湿的环境中应尽快使用),将试剂板置于平坦的台面上,用塑料吸管垂直滴加3滴尿样或处理过的样品(约120μL)于加样孔内,等待紫红色条带的出现,测试结果应在3～5min时读取。超过时间结果无效。

1.5 结果判定

阳性(+):仅质控区(C)出现1条紫红色带,在测试区(T)内无紫红色条带出现。此阳性结果表明尿液中含有克伦特罗残留物。阴性(-):2条紫红色条带出现。1条位于测试区(T)内,另1条位于质控区(C)内。阴性结果表明尿液中不含有克伦特罗残留物。无效:质控区(C)不出现紫红色条带,表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。具体示意图见图1。

图1 盐酸克伦特罗快速检测卡结果判断

1.6 检后处理

将检测结果及时通知货主及相关人员,对经检测合格(阴性)的生猪允许屠宰或交易,开具盐酸克伦特罗检测合格的报告单;对经检测不合格(阳性)的生猪禁止屠宰,并就地封存,及时上报上级主管部门,按有关规定处理。

2 检测结果

按照以上检测方法笔者于2009年11月和12月在全县范围内的1个县级生猪定点屠宰点和4个生猪交易市场按照不同场所、不同产地、以整车为单位按照10%的比例共计检测生猪227头。检测结果见下表1,通过共计30个批次的检测结果汇总情况来看,其检测结果都为阴性,阴性率为100%,没有出现盐酸克伦特罗残留问题猪。

表1 金湖县2009年11月和 12月份生猪盐酸克伦特罗残留检测结果

3 讨 论

在基层的盐酸克伦特罗实际检测中,多数检测单位会选择猪尿作为样本,因为使用盐酸克伦特罗快速检测卡检测尿样的方法比较简单方便。一般对猪的盐酸克伦特罗检测工作首先是在宰前进行,即与宰前检疫同步实施,对每批进场生猪随机进行抽检,没有问题的生猪才能待宰或交易;但是生猪宰前尿样的采集有一定的难度,一般可在猪下车后10～20min或当猪进圈后休息一段时间后人为驱赶,检测人员在一旁仔细观察,当发现猪有排尿倾向后,及时用长柄集尿盆收集(此法比较适合母猪),而公猪的生殖器在腹下,一旦伸出长柄集尿盆它就会发现,立即会停止排尿,因此对待宰前公猪尿的收集,一般使用自制的简易接尿器接尿法,有条件的可对猪进行卧式保定,还可将猪关到小的自制隔离框(2m×2m)中进行采尿。一般生猪经过长途运输后,体内的尿量已经很少,条件许可的话,可在猪卸车后适当补水,这样有助于猪增加排尿次数以及宰后膀胱中的存尿量。

常用的盐酸克伦特罗检测方法多是使用快速检测试纸检测尿液。国内生产盐酸克伦特罗检测卡的厂家很多,各个厂家的检出量和判定标准都不太一样,在检测试剂的选择上应尽量选择权威部门推荐的生产厂家。测试前要将未开封的检测卡恢复到室温,检测卡包装袋打开后要立即使用,当发现有疑似阳性结果的标本时,应对同头样本进行重复检测,以增加检测的准确性。现在盐酸克伦特罗抽检率一般为10%,在特殊时期可提高到20%,如果发现某批次生猪有问题,则需要进行100%的检验。尿液中的杂质会导致假阳性结果,有条件的,应离心后使用。

金湖县的盐酸克伦特罗检测工作具有一定的长期性和艰巨性,因为金湖县的生猪来源主要是外调生猪,原产地的情况笔者不了解,也不能控制,因此只有依靠加大本地的检测力度,紧抓不懈,同时应提高检疫手段、加强法规宣传以及加大对违法人员的处罚力度来加强金湖县的瘦肉精检测工作。目前盐酸克伦特罗检测的成本还很高。如果按照上级要求进行抽检,还存在检测经费上的困难,还需要地方政府的大力支持。

在盐酸克伦特罗作为一种畜牧业生产的违禁药品遭到严厉查处的同时,就会出现部分盐酸克伦特罗的替代品,目前发现的替代品有“盐酸莱克多巴胺”、“沙丁胺醇”等,金湖县在紧抓常见盐酸克伦特罗检测的同时,应密切关注替代品的检测。从检测结果看没有发现盐酸克伦特罗问题猪,但是此结果并不能说明在金湖县在检测期间没有出现或今后不会出现盐酸克伦特罗问题生猪,这一结果准确性有可能受到试剂或仪器的选择、检测水平、抽检比例等因素的影响,下一步金湖县应加强检疫人员的业务培训,提高业务水平,并添置必要的检疫设备。同时要提高抽检率,保证采样送检质量,增加检测内容,选用不同厂家、不同类型的快速检测卡进行配合检测,如选用盐酸克伦特罗、莱克多巴胺二合一快速检测卡,以提高检测的准确性,同时应加强对生猪重点产地的监控,对相关部门通报的阳性高发地区的生猪应重点加以监控,并及时加大检测力度,提高检测频率和抽检率。

2010-11-21

(责任编辑:

陆文昌)