2型糖尿病肾病患者血清白介素18、脂联素检测的临床意义

唐 灵 陈春莲 苏桂兰 甄瑞峰

(广西桂林医学院附属医院，广西省桂林市乐群路95号，541001)

糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy，DN)是2型糖尿病(Type2 Diabetic Mellitus，T2DM)严重的并发症和患者主要的死亡原因之一，DN发病是多种机制共同作用的结果，大量研究表明，免疫和炎症反应机制在DN的发生发展机制中起着重要的作用［1-2］。白介素18(Interleukin-18，IL-18)是活化的单核细胞/巨噬细胞分泌的一种前炎症因子，与其他炎症因子一起参与炎症级联反应［3］，且是心血管事件的一个预测因子［4-5］，有临床研究表明其与糖尿病并发症有关［6］，脂联素作为新近发现的一种与慢性炎症有关的脂肪因子，参与了糖尿病及其血管并发症的发生［7-8］。本研究旨在探讨DN不同发展阶段血清IL-18和脂联素水平变化，为DN的早期诊断及临床防治提供一定的理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 按1999年WHO糖尿病诊断标准选择2009年10月-2010年5月在我院住院的T2DM患者97例。其中男48例，女49例;年龄(56.8±8.7)岁。根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为3组:正常蛋白尿组(A组，UAER＜20μg/min)35例，微量蛋白尿组(B组，UAER 20～200μg/min)30例，大量白蛋白尿组(C组，UAER＞200μg/min)32例，全部病例均除外恶性肿瘤、急慢性感染、糖尿病急性并发症、长期口服噻唑烷二酮类药物及调脂药、泌尿系感染、除糖尿病以外的继发性肾脏疾病。并选择我院同期健康体检者35例作为对照组。其中男19例，女16例;年龄(55.7±11.4)岁。各组年龄、性别比较差异无统计学意义(均P＞0.05)。所有受试者均签署知情同意书。

1.2 标本采集 所有受试者均过夜空腹8～12h，晨起抽静脉血送生化室测定血糖、血脂、肾功、糖化血红蛋白。另取静脉血2～3mL静置1h后，3000r/min离心5min分离血清，标记后贮存于-76℃低温冰箱，同时测定血清脂联素和IL-18。连续3天收集24h尿，记录尿量，完成尿微量白蛋白检测。

1.3 检测方法

1.3.1 一般临床资料 所有受试者测量血压，以体重、身高计算体重指数(BMI)。次日晨空腹采静脉血，采用氧化酶法测定FPG，胶体滤过法测定HbA1C，应用全自动生化分析仪测定 TG、TC、HDL-C、LDL-C、Scr、BUN;尿微量白蛋白采用高效免疫比浊法检测，根据24h尿量计算UAER，3次取平均值。

1.3.2 血清脂联素和IL-18 用ELISA方法检测血清脂联素和IL-18水平，ELISA试剂盒购自R＆D公司，实验步骤按试剂盒说明书进行操作。根据所测标本的吸光度值，计算出各标本相应的脂联素和IL-18浓度。

1.4 统计学方法 采用SPSS17.0软件包进行统计学处理。计量资料以均数±标准差(¯x±s)表示，各组指标比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD和SNK检验;计数资料比较用卡方检验;相关性采用Pearson相关分析和多元逐步回归分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料比较 各组年龄、性别、体重指数(BMI)及舒张压(DBP)比较差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性;大量蛋白尿组与正常蛋白尿组、微量蛋白尿组比较病程、收缩压(SBP)差异有统计学意义(P ＜0.01)，见表1。

2.2 实验室结果比较

2.2.1 各组 FPG、HbA1C、TG、TC、HDL-C、LDL-C、BUN、Scr、UAER 比较 糖尿病 3组 FPG、HbA1C、TC、TG、LDL-C水平显著高于正常蛋白尿组(P＜0.01)，而HDL-C低于正常对照组(P＜0.01);而大量白蛋白尿组BUN、Scr、UAER水平显著高于其他3组(P＜0.01);微量蛋白尿组UAER高于正常蛋白尿组及正常对照组(P＜0.01)，见表2。

2.2.2 各组血清脂联素及IL-18水平比较 3组患者血清IL-18水平明显高于正常对照组(P＜0.05)，组间比较显示随着尿白蛋白排泄率的增加两者水平增高，差异有统计学意义(P＜0.01)。正常蛋白尿组血清脂联素低于对照组，微量蛋白尿组、大量蛋白尿组血清脂联素高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)，见表2。

2.3 单因素相关分析 IL-18与病程、SBP、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、BUN、Scr、UAER 呈不同程度正相关(P＜0.01)，与HDL-C呈负相关(P＜0.01)，且两者互呈正相关(P＜0.01)。脂联素与病程、SBP、BUN、Scr、UAER 呈正相关(P ＜0.01)，见表3、4。

表1 各组患者一般资料比较

表2 各组生化指标比较(¯x±s)

表3 血清IL-18与观察指标的相关性分析

表4 血清脂联素与观察指标的相关性分析

2.4 多元线性逐步回归分析结果 分别以IL-18和脂联素为应变量，年龄、病程、BMI、SBP、DBP、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、HDL-C、BUN、Scr、UAER 为自变量进行多元线性逐步回归分析。结果显示:病程、TG、LDL-C、Scr、UAER、IL-18 是脂联素的独立危险因素，见表5;脂联素、HbA1c和Scr是IL-18的独立危险因素，见表6。

表5 脂联素的多元线性逐步回归分析结果

表6 IL-18的多元线性逐步回归分析结果

3 讨论

糖尿病肾病是糖尿病的一个重要的微血管并发症，已成为终末期肾病的最主要的原因之一。近年来，炎症因子和脂肪细胞因子在糖尿病肾病发生、发展中的作用受到重视。

IL-18是1995年Okalnura等［9］首次从诱发的中毒性休克小鼠肝脏提取液中获得的一种蛋白。该蛋白有着与白介素-12(Interleukin1-12，IL-12)相似的生物学活性，主要由活化的单核/巨噬细胞产生。本研究显示:糖尿病患者血清IL-18水平高于正常对照组，且与病程、SBP、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、BUN、Scr、UAER呈不同程度正相关，与HDL-C呈负相关，这些变量均是胰岛素抵抗的指示，可见IL-18与糖尿病的发生及胰岛素抵抗有关。本研究还显示:IL-18随着尿白蛋白排泄率的增加逐渐增高，提示IL-18与2型糖尿病肾病的发生、发展有关。IL-18可能通过以下机制参与DN的发展:1)IL-18可促进近曲小管上皮细胞转分化，可通过核因子-κB(NF-κB)胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化［10］;2)IL-18能调节肾小球系膜细胞的有丝分裂，促进其产生和释放前列腺素，进一步引起肾小球微血管改变，在早期肾小球滤过率增高中起非常重要作用［11］;3)IL-18还可通过巨噬细胞的渗入和活化的另一途径加重肾小球的损伤［12］;4)Nakamura A 等［13］报道:肾小管间质损伤的指标之一尿β-2微球蛋白的排泄量亦与IL-18有明确相关;提示糖尿病肾病患者IL-18的升高可引起小管间质的损伤;5)IL-18可导致IL-8，IL-1β，肿瘤坏死因子-a和细胞间粘附分子 -1等其他前炎症因子的产生［3，14］，且 IL-18可上调细胞间粘附分子-1及内皮细胞的凋亡，提示炎症反应可促进糖尿病肾病的发展［15］。IL-18水平可作为糖尿病肾病进展的一预测因子。

脂联素是由脂肪细胞分泌的一种特异性蛋白质。与肥胖、2型糖尿病、胰岛素抵抗、抗炎、抗动脉硬化、调节血脂密切相关。正常蛋白尿组脂联素水平低于对照组，当有DN时，随着UAER的增加脂联素水平逐渐增高，且与病程、SBP、Scr、UAER均呈正相关。提示脂联素与DN的发生、发展相关。作用机制可能与炎症反应密切相关。综上所述，本实验通过对2型糖尿病肾病血清IL-18及脂联素水平的研究，显示两者通过促进炎症反应，加速糖尿病肾病的发展。可通过两者的联合检测，反映早期糖尿病肾损害及肾功能损害进展情况，为进一步明确2型糖尿病肾病发病机制提供依据。

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