丹参注射液与丹参素钠对小鼠急性毒性的比较

王 娟， 洪宗元， 宋建国 (皖南医学院药理教研室定量药理研究所中药药理国家三级实验室， 芜湖 241000)

丹参为经典活血化瘀中药，临床多以单方或复方煎剂口服用药。丹参注射液为丹参的水溶性提取物制剂，可静脉或肌注给药，为治疗心血管疾病常用药物，并于2009年入选《国家基本药物目录》。

由于中药成分复杂，难以区分有效成分与毒性成分，尤其注射剂型改变了传统中药服药方式，导致医生、患者对中药注射剂的应用存有顾虑。加之近年中药注射剂的不良反应事件发生率上升［1］，中药制剂的安全性受到日益关注。丹参素是丹参水溶性成分中含量较高的组分，且为丹参注射液主要药理活性成分，但是否即为注射液的毒性成分尚不确定。本研究通过比较丹参注射液与丹参素钠对小鼠急性毒性，初步探讨其毒性作用和毒效成分，为临床安全用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 试药与动物 丹参素钠(含量＞98%)，南京泽朗医药科技有限公司，批号:ZL200806010。丹参注射液浓缩液(含生药6.4 g/ml，经本室测定含丹参素51 mg/ml)由安徽华源制药有限公司提供。

昆明小鼠，体重18－22 g，雌雄兼用，南京青龙山动物繁殖中心(许可证号:SCXK(苏)2007－0001)。给药前禁食12 h，自由饮水，按20 ml/kg体重给药。

1.2 方法 40只小鼠随机分为4组，给药体积均为20 ml/kg，所用药量均含丹参素(0.28 g/kg)。其中丹参素钠2组，分别腹腔或尾静脉给药;丹参注射液2组，含生药1.78 g/ml，给药方法同前。观察并记录7 d内小鼠存活情况。死亡后立即尸检。

丹参注射液腹腔注射组死亡后立即取心、肝、脾、肺、肾、肠等脏器，10%福尔马林溶液固定，HE染色，进行组织病理学检查。丹参素钠腹腔注射组动物若无死亡，7 d后处死做病理学检查。

2 结果

各组动物死亡结果见表1。

丹参素钠静脉或腹腔注射后，2组动物全部存活，行为活动与给药前无明显改变。组织切片检查基本正常。

表1 丹参素钠与丹参注射液给药后各组小鼠死亡率Tab 1 Mortality of mice in each group after infusion of sodium danshensu or Salvia miltiorrhiza injection

丹参注射液静脉注射后5 min内动物全部死亡;腹腔用药后小鼠活动明显减少，毛发蓬松，多数有腹泻，肛门处有褐色黏性分泌物，部分动物死亡。尸检，肉眼可见肺部瘀斑，个别动物腹腔有未凝血液。病理学检查，光镜下可见肺、肝、肾及肠等组织结构完整，血管广泛扩张，充血明显，尤以肺、肝、肾、肠明显(图1)。与丹参素钠组相比，丹参注射液组肺泡隔增厚，充血，部分肺泡内可见血细胞，肺内血管扩张;肝细胞肿胀，肝血窦缩小，血窦充血;肾小球体积增大，充血，肾小囊腔变小，肾小管上皮细胞浊肿，管腔变窄，肾间质水肿，血管充血;小肠绒毛肿胀，固有层毛细血管充血。

图1 腹腔注射给药后小鼠内脏组织病理(HE染色)Fig 1 Pathological examinations of viscera and organs of mice after intraperitoneal infusion(HE staining)

3 讨论

中药成分众多，杂质难以去除，加之注射液制作提取工艺十分复杂，目前中药包括丹参制剂多以生药量表示规格，并不能保证其中各种成分含量，中药质量较为混乱［2］。鉴于丹参注射液的浓缩品为混悬状态，笔者对其稀释前后进行HPLC检测以确保丹参素含量，具体检测方法详见相关报道［3］。

传统医学认为，丹参无毒。但丹参注射液的临床不良反应并不少见［4］，其急慢毒性的相关研究已有报道［5，6］。分析其原因，可能与丹参经过提纯后有效成分提高，毒效成分也相应浓缩集中，药效增强的同时毒性也有增加。再者，也可能与注射剂型改变了传统口服方式直接注入体内有关，缺乏胃肠道天然保护屏障，加上制剂中所含蛋白质或其他成分引起不良反应发生。本研究中丹参注射液静脉注射组因为动物5 min内即死亡，故没有做病理检查，而丹参注射液腹腔注射组死亡小鼠的病理结果提示，大剂量丹参注射液可引起脏器出血或充血，肺、肝、肾等处为靶器官，可能与丹参“活血化瘀”药效增强有关。实验所用剂量为生药量35.60 g/kg，相当于文献报道［5］的丹参注射液尾静脉注射小鼠的LD100，相当于临床用量的104－208倍(按成人70 kg，临床常用量12－24 g折算)。尽管丹参注射液临床剂量下较为安全，但仍需注意，不可盲目加量，以免过量导致出血等。

与丹参注射液组引起小鼠死亡相比，丹参素钠组无一例小鼠死亡。研究结果初步提示丹参注射液急性毒性大于丹参素钠。在相同的丹参素剂量下，两者死亡率有显著差异，提示丹参素可能不是丹参注射液的主要毒效成分。丹参注射液中成分主要为酚酸类化合物，可能还有一些提取时有机溶剂的残留物和未去除的杂质等等，至于是何种成分引起毒性尚有待进一步证实。

药理研究表明，丹参素可扩张血管、抑制血小板聚集、降血脂，防治肝纤维化、抗炎以及抗肿瘤等［7］。丹参素在水溶性成分中含量较高，易于提纯，故丹参素钠作为更为安全有效的药物，有着广泛开发及应用的前景。

［1］ 黄振伟.临床常用中药注射液引起的不良反应及预防［J］.中国药事，2010，24(2):200 －202.

［2］ 李贻奎，李连达.从复方丹参制剂的混乱看中药标准化的迫切性与必要性［J］.中国中药杂志，2008，33(4):349 －352.

［3］ 王娟，马张庆，汪五三，等.丹参素钠及丹参注射液在大鼠体内的药动学比较［J］.中国中药杂志，2009，34(22):2943 －2945.

［4］ 赵梅莲.丹参注射液不良反应临床分析［J］.临床合理用药，2010，3(4):81 －82.

［5］ 杨解人，桂常青，熊莺，等.丹参葡萄糖注射液的急性毒性和局部用药毒性的比较［J］.皖南医学院学报，2007，26(1):11－14.

［6］ 杨解人，丁伯平，陈国祥，等.丹参葡萄糖注射液对Beagle犬的长期毒性研究［J］.皖南医学院学报，2005，24(1):14 －19.

［7］ 袁恒杰.丹参素药理作用研究新进展［J］.中国医院药学杂志，2006，26(5):604 －606.