2型糖尿病大鼠阴茎海绵体内 Hcy与 ADM A/DDAH的相关性研究

何 雷,秦文波,赵桂林,党永飞,何 娜

(1.佳木斯大学附属医院泌尿外科,黑龙江 佳木斯 154003;2.河北省任丘市人民医院,河北 任丘 062500)

糖尿病性勃起功能障碍的发病机制目前还不十分清楚,其研究主要集中在阴茎内皮细胞及平滑肌细胞结构功能损害、神经因素、内分泌因素及社会心理因素等,对糖尿病性勃起功能障碍的研究将有助于改善人们的生活质量。目前有关Hcy和 ADM A/DDAH通路的研究主要集中在循环,消化和中枢神经系统,而对泌尿生殖系统的研究还少有报道。本文旨在通过实验阐述 2型糖尿病伴随的高同型半胱氨酸血症与阴茎勃起功能之间的关系。

1 材料与方法

1.1 动物模型构建

取 2到 3个月龄雄性 Wistar大鼠 60只,随机取 10只为正常对照组,给予正常喂养。余 50只大鼠给予高糖高脂饮食,4周后,按 30mg/kg一次性于尾静脉注射链脲佐菌素(STZ),72h后割尾取血检测外周血血糖,血糖＞ 16.67mmol/L,并出现多饮、多食、多尿,体重减轻即确定 DM模型复制成功。正常喂养的 10只大鼠为正常对照组(A组),制造 DM模型后筛选出 40只 DM大鼠再随机分为 4组,每组10只,分别为糖尿病大鼠组(B组);糖尿病大鼠胰岛素治疗组 (C组);糖尿病大鼠叶酸、维生素 B12治疗组 (D组);糖尿病大鼠左旋精氨酸治疗组 (E组)。

1.2 给药方法

C组每日早餐前在大鼠颈部皮下注射中效胰岛素 10～20U/kg;D组每日叶酸 0.5mg/kg和维生素 B1250μ g/kg灌胃;E组每日左旋精氨酸 50mg/kg灌胃;对照组灌等量生理盐水干预。总给药时间为 8周。

1.3 检测方法

12周后用乙醚麻醉后采空腹大鼠尾静脉外周血,用氧化酶法测定血糖。同时进行 APO实验,在大鼠颈背部皮下注射阿朴吗啡 100μ g/kg,注射后观察 30min并记录阴茎勃起率,龟头充血及阴茎体增长,增粗为阴茎勃起 1次。相同时间点采用酶联免疫法测定血浆中 Hcy。处死大鼠后解剖阴茎组织剪碎、匀浆,离心后取上清液部分用试剂盒行 NOS,DDAH活性测定,用高效液相色谱测定 ADM A含量。

1.4 统计学方法

采用 SPSS13.0统计软件包,结果以均数标准差 (±s)表示,组间比较用t检验或F检验,P＜0.05为有显著差异。

2 结果

12周后试验各组大鼠血糖值及阴茎海绵体组织中 Hcy、NOS的含量、ADM A的含量及 DDAH的活性值分别与阴茎勃起率(X)之间的对照关系见表 1。

表 1 12周后各组大鼠检测指标的比较 (±s)

表 1 12周后各组大鼠检测指标的比较 (±s)

大鼠分组 A组 B组 C组 D组 E组血糖值 4.73± 0.54 24.12± 2.13 5.06± 0.47 5.25± 0.48 3.86± 0.34 Hcy含量 9.45± 1.21 23.41± 3.42 12.76± 1.54 9.98± 1.39 10.23± 1.67 NOS含量 11.33± 0.30 5.54± 0.53 9.28± 0.31 10.18± 0.29 10.52± 0.20 ADM A含量 0.32± 0.09 0.74± 0.05 0.28± 0.03 0.28± 0.04 0.31± 0.04 DDAH含量 162.3± 0.5 101.7± 0.5 141.8± 0.3 140.2± 0.4 143.3± 0.4勃起率 X(%) 100 28.6 75.0 71.4 75.0

(1)A组与 B组比较有显著性差异 (P＜0.05),提示 2型糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中 NOS和 DDAH活性下降,Hcy和 ADM A含量上升,勃起率下降 ,各测量值之间有显著性差异。(2)C、D、E组与 B组比较 (P＜0.05),提示经胰岛素,维生素 B12、叶酸及左旋精氨酸治疗的 2型糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中 NOS和 DDAH活性上升 ,Hcy和 ADM A含量下降,勃起率改善,各测量值之间有显著性差异。 (3)A组与 C、D、E组比较 (P＞ 0.05),提示经胰岛素,维生素 B12、叶酸及左旋精氨酸治疗的 2型糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中 NOS、Hcy、ADM A、DDAH和勃起率与正常对照组无显著性变化。

3 讨论

糖尿病性 ED是糖尿病常见的慢性并发症,有研究表明DM患者 ED的发生率在美国高达 50%,DM患者 ED的发生率比非 DM人群高 3倍[1]。糖尿病作为诱发阴茎勃起障碍流行病学上的重要危险因子,已越来越引起人们的重视。与一般人群相比,DM男性患者发生 ED年龄更早,发病率和患病率更高,治疗更困难[2]。通过本实验可以看出叶酸、V B12、左旋精氨酸、胰岛素在 Hcy代谢过程中都有积极的作用可改善勃起功能障碍,所以降低血浆中 Hcy水平对于减少 DM ED的发病率具有十分重要的意义。因此,临床上可以尝试通过补充叶酸、VB12、左旋精氨酸预防治疗高同型半胱氨酸血症,减少 DM ED的发病。同时可以看出胰岛素治疗组在降低 Hcy效果不如叶酸、V维生素 B12及 L-精氨酸治疗组的原因可能是 STZ诱导糖尿病大鼠在血糖升高的同时,体内胰岛素的作用或 /和胰岛素抵抗明显降低 ,或是 Hcy代谢的复杂调节性及研究对象中存在的影响血浆 Hcy水平的其它因素等。有研究认为,长期应用叶酸、VB12可明显降低血 Hcy浓度,而延缓高 Hcy血症[3]。尽管如此,目前尚无统一的治疗方案,而且对于降低 Hcy后能否降低 DMED危险性尚缺乏大规模的临床试验。国外已将补充饮食中的叶酸、VB12、L-精氨酸做为降低 Hcy血症以减少动脉硬化发生的一种手段[4],对糖尿病患者特别是 Hcy水平较高者有规律地补充叶酸、VB12、L-精氨酸可能会降低 Hcy水平,从而延缓糖尿病患者大血管并发症的发生,有助于治疗 DM ED,改善性功能,提高生活质量。因此,我们建议对 DM患者检测血浆 Hcy水平,以早期发现高危人群,及早干预并控制代谢异常,这可能对预防或延缓 DMED并发症的发生具有一定意义[5]。综上所述,2型糖尿病大鼠血浆中 Hcy显著升高,阴茎海绵体内 NOS、DDAH活性明显下降,ADM A含量显著升高,胰岛素和叶酸、维生素 B12及 L-精氨酸的干预治疗可以降低 Hcy,并使 NOS的活性提高,进而勃起功能改善。故可以推测高同型半胱氨酸血症可通过 ADM A/DDAH通路竞争性抑制 NOS的活性,使 NO含量降低最终导致勃起功能障碍,但其具体机制还有待于进一步深入的研究。

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