青春期乳房肥大症和小乳症乳腺组织中芳香化酶的表达

张芾男，张卓男，滕 利，卢建建，胡国栋，靳小雷，归 来

(1河北省人民医院，石家庄050051;2河北医科大学第二医院;3中国医学科学院整形外科医院)

乳房肥大症又称巨乳症，多在青春期和妊娠期女性中发病，其病因及发生机制尚不完全清楚，有关其病因学的研究很少。雌激素在乳腺的生长发育过程中起着重要作用。芳香化酶是催化雄激素转化为雌激素的限速酶，能促进雌激素的合成，从而使局部组织中雌激素的浓度升高。为明确芳香化酶在乳房肥大症发生过程中的作用，2004年9月～2010年12月，我们采用免疫组化法检测青春期乳房肥大症和小乳症患者乳腺组织中的芳香化酶。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 18例青春期乳房肥大症患者(患者在青春期时发病，出现乳房过度发育，异常增大)，为乳房肥大症组。患者均为女性，年龄18～25岁，平均21.94岁。病程3～9年。所有病例手术日期均为月经期后的第2～3周。每侧切除乳腺重量368～836 g，平均516 g。排除以下患者:①有乳腺纤维腺瘤病史;②月经周期不规律;③2个月内有服用雌激素类药物史;④有妊娠史;⑤有乳腺癌家族史或病史;⑥乳头溢液;⑦穿刺针吸或切除组织标本中有囊肿、积液或积乳;⑧组织病理学检查有非典型增生。手术日期均为月经期后的第2～3周。另取12例原发性小乳症患者为小乳症组。患者均为女性，年龄21～26岁，平均23.4岁。排除标准与乳房肥大症组相同，手术日期同样均为月经期后的第2～3周。

1.2 芳香化酶的检测及结果判定方法 将两组患者手术切取的乳腺组织标本用10%中性甲醛固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，采用免疫组化法SP法检测芳香化酶。操作按试剂盒说明书进行。用已知阳性的组织做阳性对照，用PBS缓冲液代替一抗做空白对照。由两位病理科医生在不知患者分组结果的情况下用光学显微镜分别观察每张切片，有争议的切片再请其他病理科医生重新判定。芳香化酶的阳性反应为细胞质内出现棕黄色颗粒。每例标本选取5个高倍镜视野进行细胞计数，计算染色阳性的细胞占所计数细胞的百分比，取平均值。按阳性染色细胞的比例半定量分级:阳性细胞比例＜5%为阴性，～25%为弱阳性，＞26%为强阳性。

2 结果

小乳症组患者乳腺组织中芳香化酶表达均为阴性，乳房肥大症组患者乳腺小叶内导管上皮细胞中中均有芳香化酶的表达，其中8例强阳性。

3 讨论

乳腺作为性激素的靶器官，其生长发育和功能均依赖于性激素的支持，其中雌激素尤为重要，乳腺的发育与其密切相关，如雌激素可以促进青春期乳腺导管的生长和妊娠期小叶腺泡的生长，刺激促甲状腺素、泌乳素等其他激素间接作用于乳腺。芳香化酶又称雌激素合成酶，是催化雄激素转化为雌激素的限速酶，在许多雌激素敏感组织中表达，如芳香化酶的表达对于青春期乳房的发育是必需的［1］。雌激素在女性绝经前主要由卵巢颗粒细胞合成，绝经后随着卵巢合成雌激素功能的的下降，性腺外组织合成的雌激素成为血循环中雌激素的主要来源［2，3］。绝经后的女性，芳香化酶可在乳房、骨、脉管系统、脑组织局部产生高水平的雌激素，而不影响血循环中的雌激素水平。研究证实在雌激素依赖性肿瘤，如乳腺癌、子宫内膜癌中都有芳香化酶的过度表达。乳腺癌组织局部表达的芳香化酶能促进雌激素的合成，使乳腺癌组织局部雌激素的浓度升高［4，5］。

芳香化酶属于细胞色素P450家族，在人体见于卵巢、胎盘、睾丸、脑、乳腺、脂肪组织、骨与皮肤及某些病理组织如乳腺癌组织、子宫内膜肿瘤组织、异位的子宫内膜组织、子宫平滑肌瘤组织，正常无病的成年肝、肾上腺和子宫组织没有芳香化酶的表达［6］。芳香化酶在这些组织中分别以不同的作用机制发挥其生理或病理功能，并受其他多种因素的影响。芳香化酶的数量和活性直接决定正常或异常组织中雌激素的水平，从而维持正常组织中与雌激素相关的生理功能，以及影响雌激素依赖性疾病的发生、发展和预后。

目前在乳腺疾病的研究中，由于健康人正常的乳腺组织难以获取，故不得不选取良性或恶性乳腺肿瘤病灶周围的乳腺组织作为对照，但严格地讲这并不是绝对正常的组织，因为经证实这种组织中甾体激素受体的含量常常增加。因此本研究没有采用这种对照方法，而是选择与乳房肥大症相对应的小乳症患者作为对照。本研究结果显示，青春期乳房肥大症乳腺组织中芳香化酶的阳性表达明显高于原发性小乳症，由此提示青春期乳房肥大症的发生可能与乳腺组织中芳香化酶的表达情况有一定关系。笔者推测乳腺组织中芳香化酶的表达增加促进了性腺外雌激素的生物合成，使乳腺组织局部雌激素的浓度升高，从而导致了乳腺的过度发育。有学者通过检测青春期乳房肥大症乳腺组织中芳香化酶mRNA的表达情况，发现乳房肥大症患者患者乳腺组织中香化酶mRNA的表达明显高于正常乳腺组，这从基因水平支持了我们的设想。

由于本研究以小乳症作为对照，因此本研究结果仅能证明青春期乳房肥大症患者乳腺组织中芳香化酶的阳性表达明显高于原发性小乳症患者乳腺组织中芳香化酶的阳性表达，尚不能得出青春期乳房肥大症患者乳腺组织中芳香化酶表达高于正常水平的结论。我们在以后的研究中仍需设法选取正常乳腺组织作为对照，以进一步证实青春期乳房肥大症乳腺组织中是否存在芳香化酶的高水平表达。

［1］Simpson ER，Clyne C，Rubin G，et al.Aromatase-a brief overview［J］.Annu Rev Physiol，2002，64(4):93-127.

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［3］Pauley RJ，Santner SJ，Tait LR，et al.Regulated CYP19 aromatase transcription in breast stromal fibroblasts［J］.J Clin Endocrinol Metab，2000，85(2):837-846.

［4］Yue W，Wang JP，Hamilton CJ，et al.In situ aromatization enhances breast tumor estradiol levels and cellular proliferation［J］.Cancer Res，1998，58(5):927-932.

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［6］Hinshelwood MM，Mendelson CR.Tissue-specific expression of the human CYP19(aromatase)gene in ovary and adipose tissue of transgenic mice［J］.J Steroid Biochem Mol Biol，2001，79(1-5):193-201.