颈康片挥发油的提取及其包合物的制备工艺研究

林向前

(福建省漳州市中医院，福建 漳州 363000)

表1 提取工艺因素水平表

颈康片由桑枝、马钱子、白芍、葛根、天麻、羌活、川芎等药材组方，具有解肌镇痛、舒筋通络、祛风除湿的功效，用于治疗颈椎病、颈背肌筋膜炎、肩周炎等。羌活、川芎为方中主要成分，其挥发油含量很高，是重要的药理活性成分。为了充分发挥挥发油的效用，增加其在制剂中的稳定性，减少不良气味，笔者将其挥发油提取后用β－环糊精包合，并对提取及包合的工艺条件进行研究，以得出最佳制备工艺。

1 仪器与试药

TG328B型电光分析天平(上海天平仪器厂)；SH21－1型磁力恒温搅拌器(上海梅颖浦仪器仪表制造有限公司)；FM101－2型鼓风干燥箱(长沙仪器厂)；挥发油测定器(上海玻璃仪器厂)。β－环糊精(陕西省佳县生物化学工业公司)；羌活、川芎(广州片仔癀医药有限公司，批号分别为091008，1006031)；无水乙醇、乙醚、无水硫酸钠均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 挥发油提取工艺研究

2.1.1 挥发油提取与分离

按处方比例称取羌活、川芎药材粉碎，过2号筛，置挥发油提取器中，加水浸泡后连续提取数小时，提取液冷却后，用乙醚萃取3次，合并乙醚液，40℃以下回收乙醚，加无水硫酸钠脱水，过滤，转移至称量瓶中，水浴加热挥干残存乙醚，得纯挥发油，密闭保存。

2.1.2 提取工艺优选[1－2]

因素水平设计：根据初步试验结果，考察混合挥发油提取工艺中影响较大的3种因素，即浸泡时间(因素A)、加水量(因素B)、回流时间(因素C)，每个因素取3个水平，详见表1。

正交试验设计与结果：本试验采用 L9(34)设计试验表安排试验，以挥发油总质量为考察指标，结果见表2，方差分析结果见表3。方差分析结果表明，影响因素排序为C＞B＞A。结合直观分析与生产实际，确定最优提取工艺条件为A1B1C3，即药材浸泡1 h、加6倍量水、加热回流提取7 h。

2.2 β－环糊精包合工艺研究

2.2.1 混合挥发油回收率测定[3]

精密量取混合挥发油1 mL，置500 mL烧杯中，加入蒸馏水200mL，按照2010年版《中国药典(一部)》附录挥发油测定项下甲法测定挥发油，用10mL乙醚洗涤挥发油测定器中残留挥发油，分取乙醚，并入挥发油中，室温放置4 h，使乙醚自然挥发，量取挥发油，计算回收率，重复操作3次。结果平均回收率为85.55%。

表2 提取工艺正交试验设计与结果

表3 提取工艺方差分析结果

2.2.2 包合物制备

采用饱和水溶液法，精密称取β－环糊精，置100mL具塞三角锥形瓶中，按1∶10的比例加入蒸馏水，加热使之完全溶解，制成饱和水溶液，冷却至所需温度，用恒温磁力搅拌器搅拌。精密移取混合挥发油1 mL置试管中，用无水乙醇稀释，使挥发油与无水乙醇之比为1∶1。将挥发油的醇溶液用注射器缓缓注入锥形瓶中，边加边搅拌至规定时间，混合液静置并冷藏24 h，抽滤并用乙醚洗涤3次，于40℃干燥至恒重，即得包合物。

2.2.3 包合率测定

取干燥至恒重的包合物精密称重，测定其挥发油含量。按下列公式计算包合物收率、挥发油包合率。包合物收得率=包合物质量/(β－环糊精加入量+挥发油加入量)×100%，挥发油包合率=包合物挥发油测得量/(挥发油加入量×空白回收率)×100%，包合物收得率评分=包合物收得率×30，挥发油包合率评分=挥发油包合率×70，综合评分=包合物收率评分+挥发油包合率评分。挥发油包合率权重系数定为0.7，包合物收得率作为次要筛选指标，权重系数定为0.3，用综合评分方法来确定最佳包合工艺。

2.2.4 包合工艺优选[2－3]

因素水平设计：根据预试验，对混合挥发油包合工艺影响较大的因素有3个，即挥发油与β－环糊精的比例(因素A)、包合温度(因素B)、搅拌时间(因素C)，每个因素取3个水平，详见表4。

表4 包合工艺因素水平表

正交试验设计与结果：采用 L9(34)设计试验表安排试验，以包合物收率、挥发油包合率为评价指标，结果见表5，方差分析结果见表6。方差分析结果表明，影响因素排序为A＞C＞B。结合直观分析与生产实际，确定最佳包合工艺条件是A3B1C2，即挥发油与β－环糊精比例为1∶10，包合温度为30℃，磁力搅拌时间为2 h。

表5 包合工艺正交试验设计与结果

表6 包合工艺方差分析结果

2.3 验证试验

按处方比例称取羌活、川芎，按最佳工艺条件进行3批验证试验。结果挥发油总质量分别为0.98g，1.13g，0.96g，β－环糊精包合物的综合评分分别为91.17，90.72，92.33分。结果表明，正交试验优选的最佳提取工艺及包合工艺在挥发油提取总质量和包合物的综合评分方面均优于试验中其他工艺。

3 讨论

中药制剂中多含挥发油与挥发性成分，由于挥发油对空气、日光及温度比较敏感，所以使用一般制剂方法难以对其进行有效的质量控制。β－环糊精是一种较新的药物包合材料，具有环状中空筒形和环外亲水、环内疏水的特殊结构，使其能与许多化学物质，特别是使挥发性成分形成较稳定的包合物，并在增加药物的溶解度和稳定性、防止挥发性成分挥散、减少刺激、降低毒副作用、掩盖药物臭味等方面有良好效果。本试验采用正交试验法对颈康片挥发油的提取及其包合物的制备工艺进行了研究，验证试验说明所选用的最佳工艺稳定、可行。

[1]刘 梅，王拥军，施 杞，等.复方芪麝片中川芎挥发油提取及包合工艺研究[J].上海中医药大学学报，2006(1)：66－68.

[2]郭爱国，李 伟，陈 兴.羌活、苍术混合提取挥发油的包合工艺研究[J].中国现代药物应用，2008，2(17)：9－10.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京：中国医药科技出版社，2010：附录63.