破伤风疫苗免疫供血浆者抗-TT血浆效价观察与分析

黄涛 蒋玲

破伤风是由破伤风杆菌侵入人体伤口的一种特异性感染，是致死性传染病，其高毒力的痉挛毒素可阻断中枢神经系统的抑制性神经递质，引起肌肉强直和典型的全身痉挛，目前仍是全球众多地区的一个重要公共卫生问题，尤其是热带发展中国家最贫穷地区，母亲和新生儿破伤风的发病率较高，发作后病死率高达20%以上。如果采取了主动免疫和被动免疫措施，只要使机体血清的破伤风抗体含量达到 0.1IU/ml，即可获得免疫保护作用［1］。预防破伤风有自动免疫和被动免疫两种方法。自动免疫是通过免疫接种含破伤风类毒素(tetanus toxoid，TT)的疫苗来预防，破伤风疫苗与百日咳、白喉疫苗一起作为联合疫苗(DTP)早已纳入我国儿童计划免疫。然而，在国家免疫计划低覆盖率，尤其是计划免疫实施前出生的人群中会有破伤风的发生，许多育龄期妇女不能预防分娩相关的破伤风。另外，尽管已接受过基础免疫，为了获得持久的免疫力，还须加强免疫。被动免疫是注射马血清破伤风毒素(tetanus antitoxin，TAT)和人破伤风免疫球蛋白(human tetanus immunglobulin，TIG)，由于前者系马血清制品，常常引起过敏反应，为此，20世纪60年代欧美各国相继研制出 TIG 用于临床，并逐渐取代 TAT［2］。TIG 系由供血浆者经吸附破伤风疫苗免疫后采集抗-TT效价高的原料血浆制备。为了分析破伤风疫苗免疫对不同性别和年龄段供血浆者抗-TT效价变化，为提高抗-TT高效价血浆采集量提供参考依据。笔者采用相同剂量和免疫程序分别免疫符合要求的三个年龄段的供血浆者，并以ELISA检测方法筛查合格的血浆样品。

材料与方法

1.材料:吸附破伤风疫苗(0.5 ml，含破伤风类毒素效价≥40 IU，批号:20070901-1，20100401-1)由成都生物研究所提供，ELISA定量检测破伤风抗体诊断试剂(批号 201002011，201007011，201010011，201103011)由上海科华生物工程股份有限公司提供，人破伤风免疫球蛋白标准品(自配)，XJC-2000型全自动血浆采集机(四川南格尔生物医学股份有限公司)，MK3酶标仪，洗板机(WELLWASHY MK2)。

2.分组方法:将144名志愿供血浆者分成三组(21～35岁组，36～45岁组，45～55岁组)，每组按相同疫苗剂量和免疫程序进行免疫。对那些无应答或抗-TT效价＜8IU/ml的供血浆者于次年实施一次强化免疫。

3.原料血浆采集:按《中华人民共和国药典》2010年版(三部)“血液制品原料血浆规程”要求采集［3］。

4.检测方法:采用ELISA定量测定法，按诊断试剂盒说明书进行操作［3］。

5.判定标准:检测结果达到0.1IU/ml以上的血样被认为对供血浆者具有保护作用;≥8IU/ml的血样为高效价抗-TT原料血浆的供血浆者［3］。

结 果

1.不同性别供血浆者，相同疫苗剂量和程序免疫获得的抗-TT效价分布。从表1可以看出，男女性别中抗-TT效价分布百分比率无明显差异。见表1。

2.供血浆者持续供血浆后抗-TT效价变化:由表2可以看出，供血浆者随着采浆次数的增加，其血浆抗-TT效价下降呈平稳趋势，供血浆者在进行第8次供血浆时抗-TT≥8IU/ml的人数比例下降至50.91%，到第10次时下降至36.36%;到第6个月时下降至18.1%，一年后降至14.55%。见表2。

3.分三个年龄段供血浆者接受破伤风疫苗免疫效果的比较 从表3可以看出，21～35岁组产生抗-TT高效价比例最高，36～45岁组其次，46～55岁组最低。见表3。

表1 不同性别相同疫苗剂量(40IU)和免疫程序免疫供血浆者抗体效价分布

表2 供血浆者持续献血浆后抗-TT高效价变化

表3 分3个年龄段供血浆者免疫抗-TT效价比较

讨 论

144名志愿供血浆者经破伤风疫苗(40IU)基础免疫后，血浆抗-TT均能转阳，其中38%供血浆者的血浆抗-TT效价能达到8IU/ml以上，男女性别中抗-TT效价分布百分比例无明显差异。供血浆者随着采浆次数的增加，其血浆抗-TT效价下降呈平稳趋势，在高效价供血浆者中，近50%供血浆者在第8次献浆后效价高于8IU/ml，18%供血浆者在采浆6个月后效价高于8IU/ml，14%供血浆者在采浆1年后效价持续高于8IU/ml。不同年龄段供血浆者接受破伤风疫苗免疫效果差异明显，21～35岁组产生抗-TT高效价比例最高，36～45岁组其次，46～55岁组最低。结果表明，选择45岁以下的合格供血浆者进行破伤风免疫，并对基础免疫供血浆者宣传，全程免疫后按国家规定的最短采浆间隔时间持续献浆6个月以上，可提高抗-TT高效价血浆的比例和采集量。

与此同时，绝大多数志愿供血浆者在完成全程免疫的过程中无严重的副反应发生，只有极少数供血浆者局部出现红肿，1～2天后自行消失;按40IU剂量疫苗，对抗-TT＜8IU/ml的供血浆者适时进行强化免疫也能获得较好的效果，这一结果与有关文献报道的情况基本一致［4］，符合制备人破伤风免疫球蛋白的标准。

如WHO最近关于破伤风疫苗的意见书中指出的那样，“保护性抗体浓度”并不能保证在各种情况下都具有免疫力，目标应是终身维持高水平的抗体浓度［5］。为使体内的抗-TT水平达到上述要求的浓度，必须按规定的要求不间断地进行破伤风疫苗免疫;其二是为了采集更多的高效价原料血浆制备出安全有效的人破伤风免疫球蛋白(TIG)制品［4-6］，使其取之于民，用之于民，减少或降低因注射马血清制品(TAT)带来的过敏反应。

1 严有望，李少安.WHO关于破伤风疫苗的意见书［J］.国际生物制品学杂志，2007，30(1):12-14.

2 罗时定.人破伤风免疫球蛋白及其应用［J］.中华急诊医学杂志，2002，11(4):285-286.

3 国家药典委员会编.中华人民共和国药典2010年版三部［M］.北京:中国医药科技出版社，2010年.

4 郭中平.特异性人免疫球蛋白及其应用和开发前景［J］.国际生物制品学杂志，2006，29(1):19-22.

5 杨明，葛少华，刘美佳，等.获得高效价人破伤风抗体原料血浆免疫方法的探讨［J］.中国输血杂志，2005，18(3):217-218.

6 周海云，江丽君.人破伤风免疫球蛋白及其应用［J］.微生物学免疫学进展，2006，34(2):84-86.