胆红素对不同方法测定血清钙的影响
2011-03-28席文华黄新根
席文华,黄新根
(江西省丰城市人民医院检验科,江西 丰城 331100峡江县人民医院检验科)
高胆红素血症是新生儿时期的常见病,临床上常对患高胆红素血症的患儿测血清钙。我们发现用荧光滴定法测定血清总钙时其值明显降低,但患儿并无低血钙的临床症状及体征,推测可能为高胆红素血症对血清总钙测定的影响。为此本实验分别用荧光滴定法、比色法测血清总钙,并同时测其游离钙以探讨胆红素的干扰。
1 材料和方法
1.1 混合血清 取健康新生儿血清10份,总量10ml,混合摇匀。
1.2 标准胆红素液 Sigma产品,选用既能完全溶解胆红素,又不影响血钙测定的0.01mol/L的NaOH液配成855μmol/L胆红素,然后将其稀释成不同梯度的标准液。
1.3 实验仪器 荧光滴定法测血清总钙用CORING公司Callcium Analyzer940,比色法测血清总钙用CORING400E型自动生化分析仪,试剂盒由台湾BGH生化公司提供。血清游离钙测定用CORING Ca2+/pH Analyzer 634。
实验所用的试剂用去离子水配制:所用的试管、滴管均经洗液浸泡,去离子水冲洗。
2 结果
将一份混合血清分成7管,分别加入同一体积不同浓度的胆红素标准液,每管所含胆红素的浓度分别为 0、171、257、342、428、513、684μmol/L。 每管分别用三种方法测血清总钙或游离钙2次取均值,其结果见表1。
表1 不同方法测定血清钙的比较
结果显示血清游离钙测定和比色法测定总钙不受胆红素的干扰。而荧光滴定法测总钙受胆红素浓度影响较大[1]。荧光滴定法所测总钙均值与胆红素浓度呈显著负相关,回归方程式y=1.5259-0.0007x,相关系数 γ=-0.93,P<0.01。
3 讨论
荧光滴定法测定总钙简便、所需样品量少,重复性也较好。但胆红素对荧光滴定法测定总钙存在明显干扰。故测高胆红素患儿的总钙时,应选用比色法测定或直接测定血游离钙。大量的研究表明,在许多病理情况下,总钙并不能很好地反映机体内钙
平衡状态,有31%的病例,总钙和游离钙的变化不相平行[2]。在我们的临床观察中也发现,以总钙值判断新生儿血钙状态很易出现“假性低钙”现象,这是因为新生儿的总钙值受胆红素或血清白蛋白的影响,因此国外有专家提出,低钙血症应以血游离钙值进行定义。
[1]谭 为,周卫东.标本溶血对干化学生化分析仪测定结果的影响[J].实验与检验医学,2010,28(2):34.
[2]郑铁生.钙、磷、镁的代谢及调节[M].见周 新,府伟灵主编:临床生物化学检验,北京:人民卫生出版社,2007,7:288-294.