210例新生儿溶血病卡式法与试管法3项试验结果的比较分析

刘和平，宋春萍

(1、江西省宜春市人民医院；2、江西省宜春市中心血站 336000)

目前临床上认为引起新生儿溶血病(HDN)的原因较多，其中母婴ABO血型不合是常见因素。早期诊断、早期治疗对避免造成严重后果具有重要意义，在实验诊断HDN中，传统试管酶试验(TCT)检测法操作步骤多、时间长、重复性较差，易出现假阴性，难以广泛应用。近年来，微柱凝胶卡式检测法(MGCT)因其灵敏度高，特异性好，结果准确可靠而被应用于实验室，成为常规实验诊断的重要手段，为红细胞疾病诊断、治疗监测、预后判断等提供了准确依据。我们比较了TCT和MGCT在ABO血型不合HDN检测中的应用结果，报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2008年1月至2010年10月本院临床送检的拟诊母婴ABO血型不合HDN的血标本210例，其中190名患儿出生后1～5d皮肤巩膜黄染，血清胆红素高于正常值，Hb降低，伴有HDN的临床症状、体征，初步诊断为HDN。

1.2 仪器与试剂 长春博德微柱凝胶卡，多特异性抗球蛋白、单抗-IgG、单抗-C3(上海血液中心，批号20080101)标准A、B血清试剂和标准5%A、B、O红细胞悬液(上海血液生物公司，批号20080106)，专用离心机、孵育器由长春博德提供。

1.3 方法 1)首先分别用母亲及新生儿抗凝血作ABO及Rh血型鉴定，再进行ABO和HDN检测。抗球蛋白试验进行的HDN 3项试验按照《临床输血技术规程》操作。微柱凝胶卡式法的3项试验按说明书操作。对抗球蛋白试验和MGCT进行HDN 3项试验时，同时设立阴、阳性对照。2)同时比较两种方法在所需时间、灵敏度、操作要求和室间上的差异。其中计算灵敏度时，假定以MGCT法检测放散液阳性的标本为真实阳性，计算其他方法的相对灵敏度。

1.4 结果判断 3项试验同时阳性可确诊阳性，否则以释放试验阳性为诊断标准，而且直抗及游离试验1项或2项阳性者判定为HDN可疑阳性，若DAT和/或游离抗体阴性，结合临床具体分析。TCT以肉眼/或显微镜下可见的凝集为阳性反应；MGCT以红细胞聚集在凝胶带上部或凝胶中为阳性。

1.5 统计学处理 MGCT和TCT检测结果的阳性率比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2种方法检测结果的比较(见表1)。

表1 MGCT和TCT的方法学比较

2.2 MGCT和TCT的方法学比较(见表2)。

表2 MGCT和TCT的方法学比较

2.3 两种方法凝集强度的比较 TCT直抗试验、游离试验及释放试验阳性血样，采用MGCT法全部检出为阳性。MGCT同时检出31例TCT直抗阴性；30例TCT游离试验阴性，30例TCT释放试验阴性血样，结果判断时MGCT比TCT检测的凝集强度普遍要高 1+～2+。

3 讨论

ABO-HDN是临床最为常见的一类母婴血型不合溶血病，可引起高胆红素血症、贫血等临床症状，虽然通常ABO-HDN的临床后果没有RhD-HDN那么严重，但其发生率远高于后者，若不及时治疗，严重者也可引起核黄疸，对新生造成不良影响[1]。我们检测的210例临床标本中，经跟踪调查，排除其它可能引起HDN的疾病，再结合母婴血型、实验诊断和临床症状发展，最终可确诊为ABO-HDN的标本为190例。以TCT法最终确诊的ABO-HDN例数为160例，与临床符合率仅76.2%，而MGCT法确诊结果与临床诊断符合率则达90.5%。以往传统TCT法检测HDN，能较敏感地检出红细胞上的不完全抗体和补体，但操作步骤繁杂，耗时久，对技术人员操作要求高，难度大，重复性较差，且在操作过程易出现假阴性结果，对临床治疗造成延误，难于广泛推广应用。MGCT技术省略了洗涤的步骤，操作相对简单，并且具有血清用量少，反应灵敏度高，结果可以长期保存，能够反复观察等优点，其各梯度的凝集强度一目了然，结果比较客观，不同操作人员在结果的判断上相对TCT差异较小[2]。在灵敏度方面，MGCT所检测的效价比TCT提高2～4倍。从这两项试验结果可知，采用不同的检测方法对同一名患者进行检测，所得到的结果会有较大的差异，对疾病的判断和治疗会造成不利影响。因而采用高灵敏度的方法对ABO-HDN进行准确的检测对疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。

[1]李 勇,马学严.实用血液免疫学[M].北京:科学出版社,2006:411-414.

[2]赵祥胜.柱凝技术检测孕妇血清IgG抗体水平[J].临床输血与检验,2000,2(3):32-33.