回收试验与基质效应评价

张才成，陈 静，万腊根

(1、南昌大学第一附属医院检验科，江西 南昌 330006；2、江西护理职业技术学院，江西 南昌 330029)

基质效应是指检测系统检测样品中的分析物时，处于分析物周围的所有非分析物质对分析物参与反应的影响。产生基质效应的原因与以下四个主要因素的相互作用密切相关：仪器的设计、试剂的组成成分、测试方法的原理、质控材料的组成及处理技术等。通过回收实验[1]可以评估分析方法是否受基质效应的影响，但分析方法是否受基质效应的影响，一般是仪器生产厂家和试剂生产厂家所要考虑的，广大的用户更看重的是校准品、质控品等经过处理的样本带来的基质效应，因为它们直接影响着用户的日常工作，关系到检验报告的准确性。CLSI EP14A文件[2]介绍的方法可以评估经过物理或化学方法处理过的样本在分析过程中是否存在基质效应，但操作比较繁琐，尤其是对比方法较难选择，因此实际应用价值有限。那么能否用回收试验来评估校准品、质控品的基质效应呢？为此，本文以葡萄糖回收试验为例，观察相同测定条件(相同仪器、相同试剂、同批次测定等)下，新鲜人血清样本和商品化质控品、校准品回收率的差异。

1 材料与方法

1.1 试剂与材料

1.1 .1新鲜病人血清 取新鲜病人血清9份，浓度范围2.8～20mmol/L之间。

1.1 .2 朗道质控品 (批号：601UN和407UE)：5ml蒸馏水复溶。

1.1 .3 罗氏公司 Cfas校准品 (批号：10759350)：3ml蒸馏水复溶。

1.1 .4 卫生部室间质评标本(编号：201031、201032)：-20℃冻存。

1.1 .5 江西省室间质评标本 (编号：2010006和2010007)：-20℃冻存。

1.1 .6分析级无水葡萄糖标准品(上海试验试剂有限公司，批号：20090721)：准确称量，用双蒸水配制80mmol/L葡萄糖标准液，备用。

1.1 .7日立7180生化分析仪、葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法，浙江东鸥试剂公司)。

1.2方法

1.2 .1标本制备 按下表制备标本，每个样品分别加入蒸馏水或80mmol/L葡萄糖标准液，混匀。

1.2 .2检测 使用日立7180生化分析仪进行葡萄糖测定，每份标本重复测定三次，取平均值。

1.3 计算方法 按以下公式标准算回收率

2 结果

2.1 回收率 将标本分为新鲜血清组(标本号1-9)和非新鲜血清组(标本号10-16，包括商业化室内质控物、校准品以及室间质评标本)，两组回收率均值和变异系数分别为102%，2.5%和136%，12.5%，见表1。

表1 各组标本回收率

2.2 统计分析 使用SPSS 10.0统计软件，t检验结果为t＝-5.36，P＜0.05， 故认为两组回收率差异有显著性。

3 讨论

本文以葡萄糖回收试验为例，研究了经过物理或化学处理的样本如室内质控品、校准品及各级室间质控品与新鲜人血清样本葡萄糖回收率的差异，结果显示前者平均回收率为136%，新鲜人血清样本平均回收率为102%，经统计学分析两者之间有显著差异。在测定条件相同(相同仪器、相同试剂、同批次测定等)的情况下，我们认为这种差异主要是由于基质效应引起的，也就是说，商业化质控品、校准品由于与人血清基质的不同导致了回收试验回收率的不同，反过来讲就是回收率的差异反映了样本的基质效应。因此我们认为用回收试验来探讨经过物理或化学方法处理过的样本基质效应是一条可行的途径。

临床化学中基质效应的干扰，尤其是商品化质控品、校准品这些被物理或化学方法处理过的样本基质效应对检验结果的影响日益受到广大检验者的重视[3]，国内多位研究人员对此进行了探讨，如吕礼应[4]从化学反应时间进程曲线的角度分析了室间质评标本的基质效应；熊传银[5]等人探讨了校准品的基质效应对离子测定的影响；邹荣良[6]研究了不同质控物在不同检测系统中的基质效应。这些研究从不同侧面反映了校准品、质控品的基质效应，方法各异，有些需要多实验室合作，有些需要对仪器参数进行重新设定或调整，可能给日常工作带来不便。而CLSIEP14A文件介绍的方法在选取对比方法时要求最好是参考方法 (假定对比方法无基质效应)，故在临床实验室较难开展。本文以回收试验来评价质控品、校准品的基质效应，通过回收率的差异反映基质效应，操作比较简单，不需要更改仪器参数，单个实验室即可完成，因此是一种值得借鉴的方法。

[1]钱士匀.临床生物化学与检验实验指导[M].第3版,北京:人民卫生出版社,2007:48-49.

[2]Evaluation ofmatrix effects.Clinical and Laboratory Standards Institute[J].EP14-A,2001.

[3]阿拉法特,邢文革.制备样品基质效应的评估与控制[J].中国医药导刊,2007,9(2):158-159.

[4]吕礼应.质控材料的基质效应对三酰甘油测定的影响[J].临床检验杂志,2004,22(2):141.

[5]熊传银,朱秋玲,潘小平.基质效应对钾、钠、氯比色法测定结果的影响[J].长江大学学报(自然科学版),2009,6(2):57-58.

[6]邹荣良.基质效应在临床化学检测中的影响研究[J].中国误诊学杂志,2009,9(34):8491-8492.