白芍与柴胡不同比例配伍白芍总苷及苯甲酸水煎出量的比较

朱永智，陈鸿英，张桂贤，赵秀梅，胡人杰

（天津市医药科学研究所制剂中心，天津 300020）

白芍与柴胡不同比例配伍白芍总苷及苯甲酸水煎出量的比较

朱永智，陈鸿英，张桂贤，赵秀梅，胡人杰

（天津市医药科学研究所制剂中心，天津 300020）

[目的]考察白芍与柴胡不同比例配伍共煎芍药总苷及苯甲酸的煎出量，以探讨传统药对白芍配伍柴胡对有效成分及有害成分煎出的影响。[方法]单味白芍、白芍与柴胡配伍（1∶2，1∶1，2∶1），水煎提取，分别直接分离和水解后再分离测定游离苯甲酸及芍药总苷，采用高效液相色谱法（HPLC）测定。[结果]白芍配伍柴胡，游离苯甲酸煎出量均比白芍单煎明显降低，芍药总苷煎出量与白芍单煎比变化不大。[结论]白芍配伍柴胡合煎与白芍单煎相比，可显著降低有害成分苯甲酸的煎出量。

白芍；柴胡；配伍；芍药总苷；苯甲酸；高效液相色谱法。

白芍为毛茛科植物芍药（Paeonia lactifLora PaL1.），常和柴胡配伍，无论是古方还是现代新方都是一对常用的配伍。考察药对配伍对化学成分的影响，可以为阐释和完善复方配伍理论提供参考。白芍总苷是由一类结构相近的单萜苷类化合物组成的混合物，因此与单测芍药苷[1]相比，进行白芍总苷的测定更重要[2]。该类化合物的共同特征是分子内均含有一个苯甲酸酯键结构，碱水解产生苯甲酸。可由公式：白芍总苷含量=苯甲酸含量×480.27/122.12，计算出白芍总苷的含量。笔者首次采用碱水解法测定白芍-柴胡药对的白芍总苷的含量。苯甲酸是白芍中的有害成分，探讨配伍对苯甲酸的影响意义也很大[3]。

1 仪器与试药

1.1 仪器 岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器。

1.2 试药 柴胡、白芍药材购自天津达仁堂药店，经天津中医药大学马琳教授鉴定为北柴胡BupLeurum chinense DC.、白芍 Paeonia lactifLora PaL1.；苯甲酸对照品（批号：100419－200301）由中国药品生物制品检定所提供。

2 方法与结果

2.1 白芍及白芍与柴胡不同比例配伍白芍总苷的含量测定

2.1.1 对照品溶液配置 精密称取苯甲酸对照品于量瓶中，加流动相超声5 min，制成1 mL含10.03 μg的溶液，进样 20 μL。

2.1.2 样品溶液配置精密称取白芍、柴胡各9 g于烧瓶中，精密加入10倍量水，浸泡1 h，回流提取1 h（共2次），合并提取液并浓缩，加水定容至100 mL（A液）。精密吸取2 mL置蒸发皿中蒸干，残渣加1%氢氧化钠（NaOH）溶液10mL溶解，精密量取0.5 mL，置10 mL量瓶中，加流动相8 mL，摇匀，再加1 moL/L的盐酸溶液凋节pH值约为4，用流动相定容至刻度，摇匀，即得，进样 20 μL。

2.1.3 白芍溶液的配制 称取白芍9 g于烧瓶中，其余操作同2.1.2项。

2.1.4 阴性对照品溶液的制备 称取柴胡9 g，置圆底烧瓶中，其余操作同2.1.2项。

2.1.5 色谱条件 色谱柱：Shim-pack VP-ODS（250×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈∶0.1%磷酸－水溶液（25∶75）[2]；流速为 1.0 mL/min，检测波长为230 nm；室温。

2.1.6 专属性实验 精密吸取对照品、阴性对照、样品和白芍溶液各20 μL，按色谱条件进样，结果样品、白芍色谱中，苯甲酸峰与其他相关峰能达到基线分离，阴性对照色谱中，无苯甲酸峰，具有专属性。

2.1.7 含量测定 按表1比例精密称取样品，置圆底烧瓶中，以下操作同2.1.2。结果见表1。

2.1.8 水解条件的选择 1）NaOH水解浓度考察：结果NaOH浓度为1%，5%，10%时样品溶液中白芍总苷含量分别为 29.597 8、29.211 1、28.997 8 mg/g。可见，采用1%NaOH进行水解即可。2）NaOH水解时间考察：结果水解时间为 0、30、60、120、180 min时样品溶液中白芍总苷含量分别为30.426 7，29.564 4、29.791 1、29.080 4、30.308 7 mg/g。可见随着水解时间的延长，白芍总苷的含量并无显著增加，因此选择1%NaOH直接溶解进行实验。

2.2 白芍及白芍与柴胡不同比例配伍游离苯甲酸的含量测定

2.2.1 对照品溶液的配制 按2.1.1项制成每mL含 10.10 μg的溶液，进样 20 μL。

2.2.2 样品溶液的配制 精密吸取2.1.2项下A液4 mL，加水定容至10 mL，过滤，取续滤液过0.45 μm的微孔薄膜，作为样品溶液，进样20 μL。

2.2.3 白芍溶液、阴性对照溶液的配制及专属性实验结果同2.1项。

2.2.4 色谱条件 除流动相为乙腈∶0.1%磷酸-水溶液（27∶73）[2]；流速为 0.8mL/min 外，其余同 2.1.5 项。

2.2.5 含量测定 按表2比例称取样品，置圆底烧瓶中，其余操作同2.1.2。结果见表2。

表1 芍药总苷含量的测定结果（n=3）Tab.1 The decocted quantity of the total glycosides

表2 游离苯甲酸的测定结果（n=3）Tab.2 The isolated quantity of benzoic acid

3 讨论

由于白芍、柴胡水煎液中尚有少量游离苯甲酸，经测定，（游离苯甲酸/总苯甲酸）×100%<1%，故在测定白芍总苷时忽略不计。有文献报道白芍配伍柴胡可以提高白芍苷的煎出量，作者认为探讨该药对配伍对白芍总苷煎出率的影响更有意义[1]。实验结果表明白芍配伍柴胡对白芍总苷煎出量影响不大；但白芍与柴胡合煎后，有害成分苯甲酸的煎出量明显下降；这对阐明这一经典药对配伍的科学性有积极意义。

[1] 苏孝共,朱光辉,王增寿.白芍与柴胡不同比例配伍芍药苷水煎出量的比较[J].中国现代应用药学杂志,2005,22（3）:256-257.

[2] 刘敏彦，高秀强，王 永，等.高效液相色谱法测定白芍药材中白芍总苷含量[J].中国药业，2008,17（5）：22-23.

[3] 容 蓉，袁久荣.四物汤及其配伍组方中苯甲酸煎出量的HPLC法测定[J].中草药，2001,32（2）：114-115.

Comparison of water decocted quantity of total glycosides of Radix Paeoniae ALba and benzoic acid with different
compatibility of Radix Paeoniae ALba and Radix Bupleuri

ZHU Yong-zhi,CHEN Hong-ying,ZHANG Gui-xian,et al.
（Tianjin MedicaL and PharamaceuticaL Science Institute，Tianjin 300020,China）

[Objective]To observe the decocted quantity of the total glycosides of Radix Paeoniae ALba and benzoic acid when co-decocting with different compatibility of Radix Paeoniae Alba and Radix Bupleuri and to explore the influence the traditional compatibility of Radix Paeoniae Alba and Radix Bupleuri on the decocted quantity of the effective and harmful constituent.[Methods]Single Radix Paeoniae Alba,Radix Paeoniae Alba concomitant with Radix Bupleuri(1∶1，1∶2，2∶1)were boiled with water.Direct isolation or isolation after being hydrolyzed were performed to determining the isolated benzoic acid and the total glycoside of the Radix Paeoniae Alba respectively with HPLC.[Results]The isolated quantity of benzoic acid was more decreased when co-decocting Radix Peaoniae Alba with Radix Bupleuri than single Radix Paeoniae Alba was decocted,however the extracted quantity of the total glycoside was not different.[Conclusion]The extracted quantity of benzoic acid,a harmful constituent,can be lowered significantly when Radix Paeoniae Alba was co-decocted with Radix Bupleuri than single Radix Paeoniae Alba was decocted.

Radix Paeoniae Alba；Radix Bupleuri；compatibiLity；total glycosides of Paeony； benzoic acid;HPLC

R285.5

A

1672-1519(2011)01-0078-02

朱永智（1961-），男，副研究员，从事中草药化学科研工作。

2010-11-12）

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