牛的人工授精技术

余桂凤

（广西平乐县水产畜牧兽医局，平乐 542400）

1 概述

采精是人工授精的第1个重要环节。采精的原则是保证公牛正常和充分性欲和性行为表现，使射精顺利完成，精液不被污染。目前常用的是假阴道采精法。对爬跨有困难的优秀公牛也可采用电刺激法、对未经采精训练的青年公牛还可采用按摩法。

2 准备工作

2.1 假阴道

（1）清洗假阴道。在每次采精结束后，必须用去污剂（洗衣粉等）在温水中彻底清洗，随后用清水冲净、晾干。集精管要洗净并进行高温消毒。

（2）安装与消毒。若用苏式假阴道，应将内胎放入外壳内，使露出2端的内胎长短相等，将其翻转于外壳的2端，用胶圈固定。用长柄钳夹取70%的酒精棉球擦拭内胎、要均匀、彻底。将经高温消毒的集 精杯经酒精擦拭待其挥发后，扣在假阴道的一端。

（3）注水、测温。从注水孔借助漏斗注入50～60 ℃的温水，一般为假阴道内胎和外壳夹层容积的1/2～2/3，用温度计测量内胎的温度，维持在40～42℃即可。

（4）涂滑润剂。一般用灭菌的白凡士林，在气温较低的冬春季节可用2∶1的凡士林和液体石蜡的混合剂。涂抹的深度一般以假阴道长的1／2～2／3为宜。

（5）压力调节。从注水孔的活塞处吹入空气，使假阴道人口呈丫行形即为适度。为了保温起见，欧美式假阴道设有保温套罩在集精管的外面。大型的公牛站，每次采精头数较多，都将准备好的假阴道码放在保温箱内，随用随取。在采精前要注意测量假阴道内腔的温度，可根据不同公牛的个体要求，控制在40～42 ℃。

2.2 台牛

台牛选择。应选择健康、体壮、体型大小适宜的发情或不发情的母牛，也可选用性情温顺的公牛。采精前，应将台牛保定在采精架内。对台牛的后躯，特别是尾根、外阴及肛门等部位用肥皂或洗衣粉水刷洗干净，再用消毒的布擦干。对初次用做台牛的公母牛也可用2%来苏儿溶液刷洗以上部位后擦干，以防采精过程中污染公牛的阴茎和精液。如有多头公牛同日采精，可令下1头准备采精的公牛观察前1头公牛的采精，这样可增加预采精公牛的性刺激，提高其性欲，缩短采精时间，增加射精量。采精用的台牛也可用假台牛代替，做成固定的或活动的机械台牛。是否使用假台牛采精要根据被采精的公牛情况而定，以不影响公牛的性反射和射精量为原则。

3 采精操作

（1）假阴道。采精对采精的公牛，在其爬跨台牛前要进行适当的控制，待接受台牛的性刺激引起性兴奋、阴茎充分勃起，再令其爬跨。采精员在公牛爬跨前右手持假阴道站在台牛的右侧，使假阴道入口向上。待公牛爬跨台牛准备射精时，右手虎口向上握住假阴道并与水平线呈30°固定于台牛的臀部，左手旋即托住公牛的包皮将阴茎导入假阴道，公牛随即纵身射精。切忌用假阴道去套公牛的阴茎，也不准用手直接握公牛的阴茎，以免造成阴茎外伤。为了减少对精液的污染，在采精前须对公牛下腹部和包皮鞘进行冲洗。采精场地要求安静、整洁、防尘、防滑。

（2）按摩法采精。只适用于未经训练的青年公牛和因肢蹄伤病无爬跨能力的公牛。采精前要对公牛进行适当的保定，采精员通过直肠将左手伸到耻骨下缘，缓缓向后向下沿骨盆底部找到输精管膨大部（壶腹）和精囊腺。以拇指、食指和中指自前后分别轻轻按摩两侧壶腹，随后再按摩两侧精囊腺，如此反复操作多次，最后将手掌向下，对准精囊腺后方的尿处殖道位前后滑动按摩，多数公牛即可在阴茎不充分勃起的情况下射精。按摩法收集的精液一般都比较稀。为防止污染，在采精前应认真冲洗包皮鞘，并剪短包皮鞘前端的长毛。

（3）电刺激法采精。只适用于育种价值高而失去爬跨能力或性反射迟钝的公牛。将2个电极套在以手套绝缘的拇指和食指上，伸入直肠后将手指固定在腰荐部神经的射精中枢部位。交流电压15～20伏，刺激5～10 S，间歇5～10 S，经数次反复刺激，公牛即可射精。由于这种方法 比较复杂，给公牛造成痛苦较大，一般不采用。

4 精液品质检查

目前，在全世界范围内，牛的人工授精已普遍采用冷冻精液输精。因此，在奶牛人工授精中的精液品质检查，主要是指在输精前后，对解冻后的精液进行检查。国内外公牛的冷冻精液都有严格的质量标准，用户对其质量的检查主要是进一步核实其质量，了解或发现操作中的问题。

4.1 精子解冻活率检查

（1）颗粒冷冻精液。取消毒并封装于安瓿内的稀释液，放于40 ℃的温水中，待其温度接近40℃时，打开安瓿放入颗粒冷冻精液1粒，轻轻摇动，使其融化，即可取样在高倍显微镜下观察其活率。检查时显微载物台的温度应保持在37℃左右。在评定活率时，要注意上、中、下3个层次精子活率的变化，左、右、上、下4个方位视野的差异，才能做出较准确的判断。活率在0.3以上即为合格精液。

（2）细管冷冻精液。可直接投入40℃温水中，待其融化后，立即取出，剪去棉塞一端，取样检查。

4.2 死活精子比例检查

先将精子死活染色液分装于容量为0.5 ml左右的指形玻璃小管中，染色液 为伊红。苯胺黑溶液，染色前先放入37 ℃恒温箱或水浴箱中预热，滴入解冻精液2～3滴，混匀后再放入温箱，3 min后即可制做抹片，待抹片风干后在油镜下观察。死精子为红色，活精子不着色或只在头部的核环处呈淡红色。随机观察200个精子并计算出死、活精子的比例。

4.3 密度检查

对精子密度检查的最简单方法是，取1滴解冻精液在低倍显微镜下凭经验粗略地估计其密度是否符合输精的要求。较精确的方法是采用血球计数装置，进行精确的计算，具体方法在这里不作介绍。以此为基础建立起来的光电比色法测定精液中精子密度，已经被大型公牛站广泛应用。通过密度的检查可以计算出被检精液每毫升所含的精子数，再根据解冻后的活率可得每毫升精液中的有效精子数，最后乘以输精剂量计算出每个输精剂量的有效精子数。