霉变日粮中添加酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能、器官指数及血清指标的影响
2011-02-09王兆钧王春维
王兆钧 王春维
霉菌污染的饲料中含有大量的黄曲霉毒素B1(AFB1)、T-2毒素、玉米赤霉烯酮(ZEA)等毒素,霉菌的寄生和霉菌毒素的产生严重影响饲料品质,其中AFB1毒性最强。畜禽长期采食含有黄曲霉毒素B1的日粮会导致肝脏损伤,生长性能和免疫功能降低。霉菌毒素的污染已成为全球性难题,其去毒和解毒的方法一直是人们研究的热点。
国外研究表明,啤酒酵母葡聚糖对ZEA有吸附性,可减少动物消化道中毒素的生物活性;葡聚糖的三维空间构象有利于ZEA接近吸附位点,其三股螺旋结构是影响吸附过程的主要因素[1]。张丽霞等研究表明,酶碱法提取的葡聚糖对ZEA具有较好的吸附效果,吸附量最大可达到2.296 μg/mg葡聚糖[2]。酵母细胞壁中的葡聚糖和甘露寡糖,对细菌、真菌和病毒引起的疾病可产生非特异性免疫力[3],相关的研究论文不断见诸报道,而国内外关于葡聚糖对发霉饲料黄曲霉毒素去毒效果的研究报道较少。本试验采用从废啤酒酵母中提取的葡聚糖,以艾维茵肉仔鸡为试验动物,通过肉仔鸡生长性能、血清指标及器官指数的分析,研究酵母葡聚糖对发霉饲料中霉菌毒素的去毒效果,并探讨其作用机制。
1 材料与方法
1.1 试验材料
酵母葡聚糖由武汉工业学院畜禽饲料工程技术研究中心生产,纯度达85%;霉变玉米于自然条件(温度28~32℃,湿度86%~87%)培养制备[4],将水分控制在20%左右,眼观有明显霉变产生,测定其中AFB1含量为83.2 μg/kg[采用酶标法测定,AFB1试剂盒购自于安德珍生物技术(北京)有限公司]。
1.2 试验设计及日粮
1日龄商品代艾维茵肉仔鸡,正常饲料育雏3 d后,选取180只随机分为5个处理组,每个处理组6个重复,每个重复6羽,经检验,处理间无显著差异,具体分组情况见表1。第4日龄试验开始,试验期为21 d(4~24 d),各处理组的日粮配方和营养水平完全相同,见表2。经计算,发霉饲料组及试验组中AFB1含量为47.2 μg/kg。
表1 试验设计
表2 日粮组成和营养水平
1.3 饲养管理
采用网上平养的方式,每笼6只。试验前鸡舍、鸡笼进行彻底清扫,熏蒸消毒;自由采食和饮水,24 h光照,常规免疫。
1.4 样品采集及处理
于试验第7、14和21 d清晨空腹称重,以重复为单位记录试验0~7 d、7~14 d和14~21 d的体增重和耗料量;试验第7、21 d屠宰,每个重复随机选取1只接近平均体重的肉仔鸡,心脏采血,3 000 r/min离心10 min,分离血清,-20℃冰箱保存;颈静脉放血致死,经正常屠宰,迅速打开腹腔,摘取心脏、肝脏、肾脏、胰腺、胸腺、脾脏和法氏囊,称重。
1.5 测定指标及方法
1.5.1 生长性能指标
体重(BW)、平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
1.5.2 血清指标
丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷氨酰转肽酶(GGT)和尿素氮(BUN),样品由武汉市第七医院采用日立7020全自动生化分析仪检测。
1.5.3 器官指数
称取心脏、肝脏、肾脏、胰腺、脾脏、胸腺、法氏囊的重量,计算器官的相对重量。
器官的相对重量(g/kg)=器官重量/鸡活体重。
1.6 数据处理
数据采用SPSS13.0统计进行单因素方差分析,同时进行Duncan's法多重比较,以P<0.05为显著水平,试验数值以平均值±标准差表示。
2 结果与分析
2.1 酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能的影响
试验分别计算了0~7 d、7~14 d及14~21 d的ADG、ADFI及F/G,结果见表3。由表3可知,发霉饲料组与对照组相比,生长性能指标在整个试验阶段均无显著差异,表明日粮中的低剂量霉菌毒素对肉仔鸡的生长性能无明显影响。
3个试验组与对照组相比,生长性能指标在整个试验阶段均无显著差异,表明酵母葡聚糖对肉仔鸡的生长性能无明显影响。
2.2 酵母葡聚糖对肉仔鸡器官相对重量的影响(见表4、表5)
由表4可知,在试验第7 d时,发霉饲料组肝脏的相对重量高于其它各组(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05);发霉饲料组肾脏的相对重量高于对照组(P>0.05),显著高于试验组Ⅰ、试验组Ⅲ(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05);心脏和胰腺相对重量各组之间差异不显著(P>0.05)。
试验第21 d时,发霉饲料组肝脏的相对重量显著高于其它各组(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05);发霉饲料组心脏的相对重量显著高于对照组、试验组Ⅱ、试验组Ⅲ(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05);发霉饲料组肾脏和胰腺相对重量有升高趋势,各组之间差异不显著(P>0.05)。
表3 酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能的影响
表4 酵母葡聚糖对肉仔鸡器官相对重量的影响(g/kg)
表5 酵母葡聚糖对肉仔鸡免疫器官相对重量的影响(g/kg)
由表5可知,试验第7 d时,发霉饲料组脾脏的相对重量显著高于其它各组(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05);胸腺和法氏囊相对重量各组之间差异不显著(P>0.05)。试验第21 d时,发霉饲料组法氏囊相对重量低于对照组(P>0.05),显著低于试验组Ⅲ(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05)。
2.3 酵母葡聚糖对肉仔鸡血清生化指标的影响(见表6)
由表6可知,试验第7 d时,发霉饲料组TP含量、ALB含量低于对照组(P>0.05),显著低于试验组Ⅲ(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05);发霉饲料组血清尿素氮(BUN)含量低于对照组(P>0.05),显著低于试验组Ⅱ(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05);其它指标各组之间差异不显著(P>0.05)。
试验第21 d时,发霉饲料组AST有升高趋势,各组之间差异不显著(P>0.05);发霉饲料组TP浓度低于对照组(P>0.05),显著低于试验组Ⅲ(P<0.05),3个试验组与对照组相比差异不显著(P>0.05);发霉饲料组BUN含量显著低于对照组(P<0.05);其它指标各组之间差异不显著(P>0.05)。
3 讨论
表6 酵母葡聚糖对肉仔鸡血清生化指标的影响
3.1 酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能的影响
研究表明,在自然条件下污染粮食及饲料的黄曲霉毒素主要有B1、B2、G1、G2等,其中以B1最多,毒性最强[5]。本试验研究表明,日粮中低剂量的霉菌毒素对肉仔鸡的生长性能无明显影响,这可能是由于饲料中霉菌毒素含量较低的原因。
本试验在发霉饲料日粮中添加0.05%~0.15%的酵母葡聚糖,对肉仔鸡的生长性能无明显影响,这与张敬等[6]的试验结果相一致。
3.2 酵母葡聚糖对肉仔鸡器官相对重量的影响
肝脏是黄曲霉毒素作用的靶器官,但不是唯一受损器官。肉仔鸡采食黄曲霉毒素后,首先会出现肝损伤,长时间采食会导致其它器官也受到不同程度的损伤。Raju等研究表明,畜禽采食黄曲霉毒素后,肝脏、肾脏的相对重量升高[7]。研究表明,霉变玉米可显著提高肉鸡肝脏、心脏、肾脏、脾脏的相对重量[8-9]。本试验中,发霉饲料组肝脏在试验第7 d和21 d时明显肿胀,心脏在第21 d时明显肿胀,肾脏和胰腺也有升高趋势,可见霉变玉米对内脏器官造成了损伤。此外,黄曲霉毒素可诱发免疫抑制,使免疫器官发育受阻,引起脾脏肿大,法氏囊、胸腺萎缩。本试验结果表明,试验第7 d时霉变玉米引起仔鸡脾脏明显肿大,第7 d和21 d时胸腺和法氏囊出现萎缩,与Chang C F等[10]的试验结果基本一致。
研究表明,葡聚糖可增强肝细胞抗氧化能力,起到肝损伤的保护作用[11]。据报道,在日粮中添加β-葡聚糖,21日龄时肉仔鸡免疫器官的相对重量都有增加的趋势,即法氏囊相对重量显著增加[12]。本试验在发霉饲料日粮中添加0.05%~0.15%的酵母葡聚糖,使内脏器官肿胀和免疫器官萎缩现象得到了缓解,添加0.15%的酵母葡聚糖显著提高了法氏囊的相对重量,并使其高于对照组水平。结果表明,酵母葡聚糖能在一定程度上降低黄曲霉毒素对内脏的毒害作用,并促进了免疫器官的发育,但其作用机制还有待进一步研究。
3.3 酵母葡聚糖对肉仔鸡血清生化指标的影响
正常情况下,天门冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶及谷氨酰转肽酶主要存在于肝细胞中,当肝脏受损时,细胞膜通透性增强,导致胞内酶外流增加,使血清中酶活明显升高,因此,这些酶可作为反映肝脏功能的重要指标[13]。研究表明,发霉日粮可显著提高肉仔鸡血清中AST、ALT、GGT活性[14-15]。本试验结果表明,在试验21 d时,发霉日粮组仔鸡血清中的AST、ALT、GGT活性略高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。
血清总蛋白和白蛋白水平的高低是反映肝脏蛋白合成能力的一项重要指标,当肝脏严重受损时,其蛋白合成能力将受到影响[9]。徐雪梅报道,发霉玉米的添加使肉仔鸡血清中TP、ALB浓度显著降低[16]。Aravind报道,饲喂自然污染日粮可显著降低血清中BUN浓度[17]。本试验结果表明,发霉饲料组仔鸡血清中TP和ALB含量降低(P>0.05),第21 d时,BUN浓度显著降低(P<0.05),与上述报道一致。
本试验结果表明,在发霉饲料日粮中添加0.05%~0.15%的酵母葡聚糖后,降低了血清中AST和GGT浓度(P>0.05),添加0.15%的酵母葡聚糖提高了血清中ALB浓度,显著提高了血清中TP的浓度(P<0.05)。这可能是由于酵母葡聚糖起到了保护肝脏的作用,使相应的血清指标基本恢复到正常水平。
4 结论
日粮中低剂量的霉菌毒素对肉仔鸡的生长性能无明显影响,但可导致肝脏、心脏和脾脏肿胀,胸腺和法氏囊萎缩及血清中总蛋白、白蛋白、尿素氮浓度降低。在发霉玉米日粮中添加0.05%~0.15%的酵母葡聚糖,对肉仔鸡生长性能无明显影响,器官指数和血清指标基本恢复到对照组水平,但不同添加量之间差异不显著(P>0.05),相对而言,以添加量0.15%的效果最好。说明酵母葡聚糖能够一定程度地降低发霉玉米中霉菌毒素对肉仔鸡的毒害作用,但其作用机制有待于进一步研究。
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